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利用高效的大片段DNA回收方法改良Fosmid文库的构建
1
作者
张翠翠
赵胜
+2 位作者
王越
张鹏
常玉晓
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第7期220-227,共8页
外源DNA插入片段为40 kb左右的Fosmid文库在基因组学研究中有广泛的应用,但长期以来,40 kb外源片段的分离与纯化依赖于传统的切胶并电洗脱至透析袋的方法,难以得到足够量的DNA片段,极大降低Fosmid文库构建的成功率。通过改进全自动核酸...
外源DNA插入片段为40 kb左右的Fosmid文库在基因组学研究中有广泛的应用,但长期以来,40 kb外源片段的分离与纯化依赖于传统的切胶并电洗脱至透析袋的方法,难以得到足够量的DNA片段,极大降低Fosmid文库构建的成功率。通过改进全自动核酸/蛋白质回收系统SageELF的操作流程,建立一种简单、便捷、高效地回收40 kb左右DNA片段的方法,并用其成功地构建高质量的Fosmid文库。从文库中随机挑选的25个单克隆,经过测序及酶切分析,发现该文库中插入的DNA片段大小为37.9±5.2 kb。以上结果表明,利用改良的操作方法回收40 kb基因组DNA,操作简捷、高效,片段大小精准;另外,用该DNA片段构建的Fosmid文库,插入片段比较集中,有利于后续的基因组学分析。
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关键词
FOSMID文库
大片段dna回收
透析袋
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职称材料
题名
利用高效的大片段DNA回收方法改良Fosmid文库的构建
1
作者
张翠翠
赵胜
王越
张鹏
常玉晓
机构
广西大学生命科学与技术学院
中国农业科学院深圳农业基因组研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第7期220-227,共8页
基金
深圳市科技研发资金(JCYJ20150630165133393)
广西自然科学基金项目(2016GXNSFBA380221)
深圳市大鹏新区产业发展专项资金(KY20150113)。
文摘
外源DNA插入片段为40 kb左右的Fosmid文库在基因组学研究中有广泛的应用,但长期以来,40 kb外源片段的分离与纯化依赖于传统的切胶并电洗脱至透析袋的方法,难以得到足够量的DNA片段,极大降低Fosmid文库构建的成功率。通过改进全自动核酸/蛋白质回收系统SageELF的操作流程,建立一种简单、便捷、高效地回收40 kb左右DNA片段的方法,并用其成功地构建高质量的Fosmid文库。从文库中随机挑选的25个单克隆,经过测序及酶切分析,发现该文库中插入的DNA片段大小为37.9±5.2 kb。以上结果表明,利用改良的操作方法回收40 kb基因组DNA,操作简捷、高效,片段大小精准;另外,用该DNA片段构建的Fosmid文库,插入片段比较集中,有利于后续的基因组学分析。
关键词
FOSMID文库
大片段dna回收
透析袋
Keywords
fosmid library
large size
dna
recovery
dialysis bag
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用高效的大片段DNA回收方法改良Fosmid文库的构建
张翠翠
赵胜
王越
张鹏
常玉晓
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
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