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通过CRISPR/Cas9建立豌豆基因组大片段敲除体系
1
作者
黄淑贤
刘荣
+4 位作者
李冠
疏琴
徐斐
宗绪晓
杨涛
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期1658-1668,共11页
豌豆是世界上主要食用豆类作物之一,因其丰富的营养价值和良好的生态价值而受到越来越多的重视。CRISPR/Cas9作为一种生物育种的新型技术手段,已广泛应用于各种作物的品种改良中,但在豌豆中的应用报道非常少见。本研究以“中豌6号”品...
豌豆是世界上主要食用豆类作物之一,因其丰富的营养价值和良好的生态价值而受到越来越多的重视。CRISPR/Cas9作为一种生物育种的新型技术手段,已广泛应用于各种作物的品种改良中,但在豌豆中的应用报道非常少见。本研究以“中豌6号”品种为试验材料,采用CRISPR/Cas9技术手段成功地实现了豌豆基因组中Psat01G0240600-T1、Psat03G0303300-T1和Psat03G0304700-T1基因的大片段缺失,其大片段敲除效率分别是24.1%、13.0%和3.6%。进一步对结果分析发现,不同靶点的编辑效率相差较大,并且大片段缺失的效率取决于2个靶点中较低编辑效率的靶点。本研究利用发状根体系探索了CRISPR/Cas9在豌豆中的应用,首次在豌豆中实现了大片段敲除,对于豌豆的研究具有重要意义。
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关键词
豌豆
CRISPR/Cas9
发状根
大片段敲除
在线阅读
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职称材料
利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立FcγR基因大片段敲除小鼠模型
被引量:
4
2
作者
吴曦
霍桂桃
+5 位作者
刘甦苏
谷文达
曹愿
柳全明
吕建军
范昌发
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期583-591,共9页
目的使用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除长度约为90kb的小鼠FcγR2b,FcγR3,FcγR4基因簇,为构建FcγR基因人源化小鼠奠定基础。方法使用在线预测软件在FcγR2b,FcγR3外显子区设计sgRNA,在每一位点挑选脱靶效应较低的五个候选sgRNA。通过...
目的使用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除长度约为90kb的小鼠FcγR2b,FcγR3,FcγR4基因簇,为构建FcγR基因人源化小鼠奠定基础。方法使用在线预测软件在FcγR2b,FcγR3外显子区设计sgRNA,在每一位点挑选脱靶效应较低的五个候选sgRNA。通过CRISPR/Cas9活性检测试剂盒检测sgRNA在体外的活性。选取活性较高的sgRNA体外转录,与Cas9mRNA一并注射受精卵。通过PCR检测及测序,得到1只敲除片段为89711bp的基因修饰小鼠,且同时敲除FcγR2b基因5’端,FcγR3基因3’端及FcγR4基因。而且还利用软件预测了8个脱靶可能性最高的位点,并对首建鼠基因组的上述8个脱靶位点全部测序确认。结果结果显示未在预测脱靶位点附近发现小片段插入或缺失。结论建立了利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除基因组超大片段的技术,该技术结合BAC转基因技术,将为建立含有复杂基因族的人源化小鼠提供新的途径。
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关键词
CRISPR/Cas9
FcγR基因
大片段敲除
小鼠
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职称材料
题名
通过CRISPR/Cas9建立豌豆基因组大片段敲除体系
1
作者
黄淑贤
刘荣
李冠
疏琴
徐斐
宗绪晓
杨涛
机构
中国农业科学院作物科学研究所
山东省农业科学院农作物种质资源研究所
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期1658-1668,共11页
基金
国家自然科学基金项目(32241042)
财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-08-G11)
作物基因资源与育种全国重点实验项目资助。
文摘
豌豆是世界上主要食用豆类作物之一,因其丰富的营养价值和良好的生态价值而受到越来越多的重视。CRISPR/Cas9作为一种生物育种的新型技术手段,已广泛应用于各种作物的品种改良中,但在豌豆中的应用报道非常少见。本研究以“中豌6号”品种为试验材料,采用CRISPR/Cas9技术手段成功地实现了豌豆基因组中Psat01G0240600-T1、Psat03G0303300-T1和Psat03G0304700-T1基因的大片段缺失,其大片段敲除效率分别是24.1%、13.0%和3.6%。进一步对结果分析发现,不同靶点的编辑效率相差较大,并且大片段缺失的效率取决于2个靶点中较低编辑效率的靶点。本研究利用发状根体系探索了CRISPR/Cas9在豌豆中的应用,首次在豌豆中实现了大片段敲除,对于豌豆的研究具有重要意义。
关键词
豌豆
CRISPR/Cas9
发状根
大片段敲除
Keywords
pea
CRISPR/Cas9
hairy root
large fragment knockout
分类号
S643.3 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立FcγR基因大片段敲除小鼠模型
被引量:
4
2
作者
吴曦
霍桂桃
刘甦苏
谷文达
曹愿
柳全明
吕建军
范昌发
机构
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所
中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期583-591,共9页
基金
国家自然科学基金(81502396)
艾滋病和毒性肝炎等重大传染病防治专项(2017ZX10304402)~~
文摘
目的使用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除长度约为90kb的小鼠FcγR2b,FcγR3,FcγR4基因簇,为构建FcγR基因人源化小鼠奠定基础。方法使用在线预测软件在FcγR2b,FcγR3外显子区设计sgRNA,在每一位点挑选脱靶效应较低的五个候选sgRNA。通过CRISPR/Cas9活性检测试剂盒检测sgRNA在体外的活性。选取活性较高的sgRNA体外转录,与Cas9mRNA一并注射受精卵。通过PCR检测及测序,得到1只敲除片段为89711bp的基因修饰小鼠,且同时敲除FcγR2b基因5’端,FcγR3基因3’端及FcγR4基因。而且还利用软件预测了8个脱靶可能性最高的位点,并对首建鼠基因组的上述8个脱靶位点全部测序确认。结果结果显示未在预测脱靶位点附近发现小片段插入或缺失。结论建立了利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除基因组超大片段的技术,该技术结合BAC转基因技术,将为建立含有复杂基因族的人源化小鼠提供新的途径。
关键词
CRISPR/Cas9
FcγR基因
大片段敲除
小鼠
Keywords
CRISPR/Cas9
FcγR gene
large fragment knockout
mouse
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
通过CRISPR/Cas9建立豌豆基因组大片段敲除体系
黄淑贤
刘荣
李冠
疏琴
徐斐
宗绪晓
杨涛
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立FcγR基因大片段敲除小鼠模型
吴曦
霍桂桃
刘甦苏
谷文达
曹愿
柳全明
吕建军
范昌发
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
4
在线阅读
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职称材料
已选择
0
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引证文献
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