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从大容量抗体库中筛选抗TNF-α人单链抗体 被引量:9
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作者 王欲晓 乔媛媛 +1 位作者 周丽君 王琰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期878-880,共3页
目的:从天然的单链大容量噬菌体抗体库中筛选特异性的抗TNF-α的人单链抗体(scFv)。方法:以TNF-α为抗原,通过"吸附-洗脱-扩增"过程从大容量抗体库中筛选特异性抗体,对其抗原结合活性和序列进行分析鉴定。结果:经过4轮筛选,获... 目的:从天然的单链大容量噬菌体抗体库中筛选特异性的抗TNF-α的人单链抗体(scFv)。方法:以TNF-α为抗原,通过"吸附-洗脱-扩增"过程从大容量抗体库中筛选特异性抗体,对其抗原结合活性和序列进行分析鉴定。结果:经过4轮筛选,获得62个与TNF-α结合的阳性克隆,其中27个特异性结合的克隆,指纹分析有7种不同的可变区片段;其中5种获得可溶性表达;基因序列分析表明其轻重链分属VλⅠ和VHⅣ亚群。结论:利用单链大容量抗体库技术可以不经免疫制备获得特异性抗TNF-α的scFv,为今后的研究和应用提供依据。 展开更多
关键词 大容量噬菌体抗体库 TNF-Α 噬菌体抗体
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从大容量抗体库中筛选抗蓖麻毒蛋白抗体 被引量:2
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作者 乔媛媛 王欲晓 +4 位作者 周丽君 赵宇 王玉霞 赵晓航 王琰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期924-927,共4页
目的:从天然的单链大容量噬菌体抗体库中筛选特异性的抗蓖麻毒蛋白的人源抗体。方法:将蓖麻毒蛋白固定在抗原管上,通过5轮"吸附-洗脱-扩增"过程从大容量抗体库中筛选到特异性抗体,并转染到HB2151菌中,经IPTG诱导,制备抗蓖麻... 目的:从天然的单链大容量噬菌体抗体库中筛选特异性的抗蓖麻毒蛋白的人源抗体。方法:将蓖麻毒蛋白固定在抗原管上,通过5轮"吸附-洗脱-扩增"过程从大容量抗体库中筛选到特异性抗体,并转染到HB2151菌中,经IPTG诱导,制备抗蓖麻毒蛋白的可溶性单链抗体。结果:经过5轮筛选,获得40个与蓖麻毒蛋白结合的阳性克隆,其中12个特异性结合的克隆,指纹分析有7种不同的可变区片段;经过基因测序,分析了可变区基因的亚群。并将其制备成可溶性的抗体。结论:利用单链大容量抗体库获得抗蓖麻毒蛋白的噬菌体抗体并且成功制备成可溶性抗体,为今后的研究和应用奠定基础。 展开更多
关键词 大容量噬菌体抗体库 蓖麻毒蛋白 噬菌体抗体 可溶性抗体
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利用大型天然噬菌体抗体库筛选抗死亡受体5人源抗体 被引量:1
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作者 蒋效 何立东 +5 位作者 王欲晓 丁立 吴成林 熊丽娟 周丽君 王育红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期833-837,共5页
目的从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗人死亡受体5(DR5)单链抗体(sc Fv)并对其抗原结合活性进行鉴定。方法以前期真核表达纯化的DR5-Fc蛋白包被筛选管,从自主构建的大容量天然噬菌体抗体库中,通过4轮筛选过程获得噬菌体抗体,采用免疫... 目的从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗人死亡受体5(DR5)单链抗体(sc Fv)并对其抗原结合活性进行鉴定。方法以前期真核表达纯化的DR5-Fc蛋白包被筛选管,从自主构建的大容量天然噬菌体抗体库中,通过4轮筛选过程获得噬菌体抗体,采用免疫细胞化学染色、ELISA鉴定其抗原结合活性;DNA指纹图谱分析和序列测定确定其抗体类型。结果经过4轮筛选,获得26株与DR5特异性结合的阳性克隆,DNA指纹分析有4种不同的可变区片段;经过基因测序,分析可变区基因的亚群,并将其制备成可溶性的抗体,进一步用免疫细胞化学技术证实所获得的抗体可特异性结合SW480细胞的DR5蛋白。结论利用噬菌体抗体库技术成功获得了特异性抗DR5的人源性sc Fv。 展开更多
关键词 抗死亡受体5抗体 人源单链抗体 大容量噬菌体抗体库
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