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大豆叶绿体多顺反子单交换表达载体的构建被引量：3: 1; 作者常玲张江 +2 位作者陈俊张银波马立新《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期26-30,共5页; 根据已知序列(GeneBankX076075),设计引物,用PCR方法获得了一段大豆叶绿体DNA片段,命名为soy。将来源于质粒pBluescriptSK( +)的含氨苄抗性基因Ampr和大肠杆菌质粒复制起始点ColE1ori的一段DNA片段克隆到这段大豆叶绿体DNA片段中,然后... 展开更多; 关键词大豆叶绿体表达盒功能鉴定多顺反子单交换; 在线阅读下载PDF 职称材料

甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表达载体构建被引量：2: 2; 作者武玉永姚庆收马立新《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第11期4431-4434,共4页; [目的]为研究质体定位的乙酰辅酶A羧化酶转化叶绿体奠定基础。[方法]根据GeneBank上的甘蓝型油菜的叶绿体DNA序列设计1对引物,通过PCR扩增获得与甘蓝型油菜叶绿体基因组可发生同源重组的DNA片段,构建甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表... 展开更多; 关键词甘蓝型油菜叶绿体DNA 多顺反子单交换表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

水稻多顺反子质体表达载体的构建被引量：1: 3; 作者陆云华马立新《宜春学院学报》 2005年第2期5-9,共5页; 根据发表的水稻叶绿体基因组序列,对比烟草高频同源重组目标区(NCBI编号:X1 5 90 1 )设计引物,用PCR的方法克隆到一段3 . 939kb叶绿体DNA片段,命名为crDNA 以其作为外源基因定点整合的同源重组片段,以来自烟草叶绿体的强启动子Prrn、甘... 展开更多; 关键词载体构建多顺反子质体表达载体水稻功能鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

安全环保的烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建: 4; 作者陆云华张新马立新《宜春学院学报》 2005年第6期4-8,共5页; 根据已发表的序列,通过PCR技术克隆了一系列构建烟草叶绿体多顺反子表达载体所需的元件:质体核糖体(16S)RNA操纵元启动子(Prrn)、质体psbA基因3’端(psbA3’)、山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)、烟草叶绿体高频同源重组片段(psaA/psbC,... 展开更多; 关键词多顺反子载体构建叶绿体功能鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

构建多顺反子表达载体系统的新策略被引量：3: 5; 作者沈俊杰单娟娟 +2 位作者骆菁菁刘立钱程《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2009年第4期561-566,共6页; 利用pSM155-GFP载体为骨架质粒,构造IRES-2A联用结构,成功实现该结构向2A结构的简单切换,得到可以同时表达shRNA和多基因、可切换多功能的真核表达载体。克服目前在单基因或多基因功能机制的研究中,普遍需要构建多个真核表达载体才能完... 展开更多; 关键词多顺反子 IRES 2A SHRNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌植酸酶appA2基因联合人MxA基因真核表达载体的构建及表达研究被引量：3: 6; 作者鞠辉明白立景 +3 位作者牟玉莲杨述林刘宗平李奎《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1550-1555,共6页; 本研究旨在探讨通过构建同时表达大肠杆菌植酸酶appA2及人抗黏液病毒基因A(Myxovirus resistance gene,MxA)的真核表达载体,比较双基因表达载体和相应单基因表达载体中外源基因的表达效率;从pcDNA-ap-pA2载体上扩增CMV-appA2-BGHpA片段... 展开更多; 关键词人抗黏液病毒基因A 植酸酶 appA2 真核表达载体多顺反子; 在线阅读下载PDF 职称材料

miR-17-5p在宫颈癌组织中的表达变化及其对宫颈癌细胞生长增殖影响被引量：7: 7; 作者魏倩张鹏《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第43期8-10,共3页; 目的观察miR-17-5p在宫颈癌组织中的表达变化及其对宫颈癌细胞生长和增殖的影响。方法用实时荧光定量PCR法对20例宫颈癌患者的癌组织和癌旁组织中的miR-17-5p进行检测。将人宫颈癌细胞株He La分组,分别转染人工构建的miR-17-5p质粒、阴... 展开更多; 关键词多顺反子miRNA基因 miR-17-5p基因宫颈肿瘤宫颈癌宫颈癌细胞细胞生长细胞增殖; 在线阅读下载PDF 职称材料

肿瘤治疗学: 8; 《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 1997年第3期120-121,共2页; 9710354 超抗原诱导的人 CD4+辅助性/杀伤性 T 细胞的现象:对 Th1类型的辅助性/杀伤性 T 细胞的选择性诱导作用及应用于肿瘤的免疫治疗/Kuge S//J Im-munol.-1995,154（4）.-1777～1778... 展开更多; 关键词逆转录病毒免疫治疗杀伤性载体介导辅助性超抗原癌症病人诱导作用选择性多顺反子; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大豆叶绿体多顺反子单交换表达载体的构建被引量：3: 1; 作者常玲张江陈俊张银波马立新; 机构湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室中国农业科学院油料作物研究所; 出处《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期26-30,共5页; 基金国家"863"项目( 2002AA227011) 湖北省自然科学资金项目(2003ABA118)资助; 文摘根据已知序列(GeneBankX076075),设计引物,用PCR方法获得了一段大豆叶绿体DNA片段,命名为soy。将来源于质粒pBluescriptSK( +)的含氨苄抗性基因Ampr和大肠杆菌质粒复制起始点ColE1ori的一段DNA片段克隆到这段大豆叶绿体DNA片段中,然后与由三个基因(壮观霉素抗性基因aadA、甘露聚糖酶基因man及绿色荧光蛋白基因gfp)串联的表达盒相连,以构建大豆叶绿体多顺反子表达载体pCS。并在大肠杆菌中通过平板定性分析和Western印迹的方法对所构建载体上的表达盒进行了功能鉴定,结果表明同一多顺反子的三个基因均得到了表达。; 关键词大豆叶绿体表达盒功能鉴定多顺反子单交换; Keywords Chloroplast DNA Expression cassette Function identification Multicistron; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S565.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表达载体构建被引量：2: 2; 作者武玉永姚庆收马立新; 机构滨州医学院遗传学教研室湖北大学生命科学学院分子微生物学与基因工程实验室; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第11期4431-4434,共4页; 基金国家"863"项目(2002AA227011) 湖北省自然科学基金(2003ABA118); 文摘 [目的]为研究质体定位的乙酰辅酶A羧化酶转化叶绿体奠定基础。[方法]根据GeneBank上的甘蓝型油菜的叶绿体DNA序列设计1对引物,通过PCR扩增获得与甘蓝型油菜叶绿体基因组可发生同源重组的DNA片段,构建甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表达载体,并在大肠杆菌中通过平板定性分析和Western印迹对所构建载体上的表达盒进行功能鉴定。[结果]以甘蓝型油菜的叶片叶绿体基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得4 357 bp的DNA片段,包含2个开放阅读框RbcL和β-CT。成功构建了甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表达载体pHBM720,而且同一多顺反子的3个基因均在大肠杆菌中得到表达。[结论]该叶绿体多顺反子单交换表达载体具有较强的通用性与安全性,比双交换表达载体更具优越性。; 关键词甘蓝型油菜叶绿体DNA 多顺反子单交换表达载体; Keywords Brassica napus L. Chloroplast DNA Multicistron Single ross expression vector; 分类号 S565.4 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水稻多顺反子质体表达载体的构建被引量：1: 3; 作者陆云华马立新; 机构湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室; 出处《宜春学院学报》 2005年第2期5-9,共5页; 基金本课题是国家"863"项目 (2 0 0 2AA2 2 70 11) 国家"十五"科技攻关 (2 0 0 1BA70BB) 湖北省自然科学基金 (2 0 0 3ABA118)资助; 文摘根据发表的水稻叶绿体基因组序列,对比烟草高频同源重组目标区(NCBI编号:X1 5 90 1 )设计引物,用PCR的方法克隆到一段3 . 939kb叶绿体DNA片段,命名为crDNA 以其作为外源基因定点整合的同源重组片段,以来自烟草叶绿体的强启动子Prrn、甘露聚糖酶man、绿荧光蛋白gfp、氨基糖苷3’-腺苷酰基转移酶基因aadA和终止子psbA3’,构建水稻质体多顺反子表达载体pLM3(-psbC$CPrrn -SD -man -SD -gfp -SD -aadA -psbA3’-trnm - ) 并在大肠杆菌中通过平板定性对所构建载体上的表达盒进行了功能鉴定,结果表明:在大肠杆菌中,多顺反子盒式表达结构中的三个基因(man ,gfp ,aadA); 关键词载体构建多顺反子质体表达载体水稻功能鉴定; Keywords construction of the vector multicistron chloroplast expression vector function identification; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名安全环保的烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建: 4; 作者陆云华张新马立新; 机构湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室宜春学院生物工程系; 出处《宜春学院学报》 2005年第6期4-8,共5页; 基金国家"863"项目(2002AA227011) 国家"十五"科技攻关(2001BA70BB)资助项目; 文摘根据已发表的序列,通过PCR技术克隆了一系列构建烟草叶绿体多顺反子表达载体所需的元件:质体核糖体(16S)RNA操纵元启动子(Prrn)、质体psbA基因3’端(psbA3’)、山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)、烟草叶绿体高频同源重组片段(psaA/psbC,大小3463bp)、甘露聚糖酶基因(man)、绿荧光蛋白基因(gfp)。构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM7(-psaA-Prrn-SD-man-SD-gfp-SD-BADH-psbA3’-psbC-)。并在大肠杆菌中通过平板定性分析等方法对所构建载体上的表达盒进行了功能鉴定。; 关键词多顺反子载体构建叶绿体功能鉴定; Keywords Multicistron Construction of chloroplast expression vector Tobacco Function identification; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名构建多顺反子表达载体系统的新策略被引量：3: 5; 作者沈俊杰单娟娟骆菁菁刘立钱程; 机构浙江理工大学生命科学学院; 出处《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2009年第4期561-566,共6页; 基金 863项目(2006AA02Z126) 973计划(2004CB518804) 浙江省科技厅重点项目(No.2006C23006); 文摘利用pSM155-GFP载体为骨架质粒,构造IRES-2A联用结构,成功实现该结构向2A结构的简单切换,得到可以同时表达shRNA和多基因、可切换多功能的真核表达载体。克服目前在单基因或多基因功能机制的研究中,普遍需要构建多个真核表达载体才能完成的研究过程。并进一步将p53基因克隆至载体中,通过多种方法证实构建得到的IRES-2A和2A元件均能有效介导多顺反子的表达,且表达的蛋白具有完好的生物活性。; 关键词多顺反子 IRES 2A SHRNA; Keywords polycistron IRES 2A shRNA; 分类号 R73-362 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌植酸酶appA2基因联合人MxA基因真核表达载体的构建及表达研究被引量：3: 6; 作者鞠辉明白立景牟玉莲杨述林刘宗平李奎; 机构扬州大学兽医学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室中国农业大学动物医学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1550-1555,共6页; 基金国家转基因新品种培育重大专项(2008ZX08010-004-006) 国家863计划(2008AA10Z143) +2 种基金 30500359) 扬州大学博士启动金费资助; 文摘本研究旨在探讨通过构建同时表达大肠杆菌植酸酶appA2及人抗黏液病毒基因A(Myxovirus resistance gene,MxA)的真核表达载体,比较双基因表达载体和相应单基因表达载体中外源基因的表达效率;从pcDNA-ap-pA2载体上扩增CMV-appA2-BGHpA片段,通过MluI酶切位点连接到pcDNA-MxA载体中,构建重组载体pcDNA-appA-MxA(下称AMP),分别将pcDNA3.1(+)、pcDNA-MxA、pcDNA-appA2及AMP质粒转染猪PK15细胞,经G418筛选后,取细胞通过实时荧光定量PCR测定细胞内appA2及MxA的表达,同时部分细胞通过Westernblot测定细胞内MxA蛋白表达量,采用改进的钼酸铵显色法测定细胞内植酸酶活性;酶切及测序结果表明成功构建了AMP载体;QRT-PCR结果表明,转AMP细胞组MxA表达水平是转pcDNA-MxA组的1.118倍,转AMP细胞组appA2表达水平是转pcDNA-appA2组的1.134倍,上述各组间差异显著(P<0.05)。灰度分析结果表明,AMP细胞组细胞内MxA表达量是转染pcDNA-MxA细胞组的1.07倍;植酸酶活性测定试验结果表明,转AMP、pcDNA-appA2细胞组及对照组细胞内植酸酶酶活和对照组平均酶活分别为0.294、0.235及0.082FTU·μL-1,2个试验组间差异不显著,试验组和对照组间差异极显著(P<0.01);试验结果表明本研究构建双基因表达载体中外源基因的表达效率比相应单基因表达载体表达效率高,本研究为以后多基因共表达及制备多基因转基因动物奠定了基础。; 关键词人抗黏液病毒基因A 植酸酶 appA2 真核表达载体多顺反子; Keywords myxovirus resistance gene A phytase appA2 eukaryotic expression vector polycistron; 分类号 S813.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名miR-17-5p在宫颈癌组织中的表达变化及其对宫颈癌细胞生长增殖影响被引量：7: 7; 作者魏倩张鹏; 机构天津医科大学肿瘤医院暨国家肿瘤临床医学研究中心及天津市肿瘤防治重点实验室; 出处《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第43期8-10,共3页; 基金天津医科大学肿瘤医院科学研究基金资助项目(Y1207); 文摘目的观察miR-17-5p在宫颈癌组织中的表达变化及其对宫颈癌细胞生长和增殖的影响。方法用实时荧光定量PCR法对20例宫颈癌患者的癌组织和癌旁组织中的miR-17-5p进行检测。将人宫颈癌细胞株He La分组,分别转染人工构建的miR-17-5p质粒、阴性对照质粒、miR-17-5p的反义寡核苷酸质粒及无关序列寡核苷酸质粒,采用MTT法和平板克隆形成实验检测细胞生长活性和克隆数目。结果宫颈癌组织、癌旁组织中miR-17-5p的相对表达量分别为0.315±0.185、1.143±1.373,两者相比,P<0.05。与转染阴性对照质粒的He La细胞相比,转染miR-17-5p质粒的He La细胞生长活性、克隆形成率明显降低(P均<0.05);与转染无关序列寡核苷酸质粒的He La细胞相比,转染miR-17-5p的反义寡核苷酸质粒的He La细胞生长活性、克隆形成率明显升高(P均<0.05)。结论宫颈癌组织中miR-17-5p表达减少,其可抑制宫颈癌细胞的生长和增殖。; 关键词多顺反子miRNA基因 miR-17-5p基因宫颈肿瘤宫颈癌宫颈癌细胞细胞生长细胞增殖; Keywords polycistronic mRNA miR-17-5p gene cervical neoplasms cervical carcinoma cervical carcinoma cells cell growth cell proliferation; 分类号 R737.33 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肿瘤治疗学: 8; 出处《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 1997年第3期120-121,共2页; 文摘 9710354 超抗原诱导的人 CD4+辅助性/杀伤性 T 细胞的现象:对 Th1类型的辅助性/杀伤性 T 细胞的选择性诱导作用及应用于肿瘤的免疫治疗/Kuge S//J Im-munol.-1995,154（4）.-1777～1778四军大9710355 伊曲康唑与氟康唑在癌症病人与体内蛋白结合/Arredondo G//Int J ClinPharmacol.～1995,33（8）.-449～452军医图9710356; 关键词逆转录病毒免疫治疗杀伤性载体介导辅助性超抗原癌症病人诱导作用选择性多顺反子; 分类号 R730.5 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	大豆叶绿体多顺反子单交换表达载体的构建	常玲张江陈俊张银波马立新	《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表达载体构建	武玉永姚庆收马立新	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	水稻多顺反子质体表达载体的构建	陆云华马立新	《宜春学院学报》	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	安全环保的烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建	陆云华张新马立新	《宜春学院学报》	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	构建多顺反子表达载体系统的新策略	沈俊杰单娟娟骆菁菁刘立钱程	《浙江理工大学学报（自然科学版）》	2009	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	大肠杆菌植酸酶appA2基因联合人MxA基因真核表达载体的构建及表达研究	鞠辉明白立景牟玉莲杨述林刘宗平李奎	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	miR-17-5p在宫颈癌组织中的表达变化及其对宫颈癌细胞生长增殖影响	魏倩张鹏	《山东医药》 CAS 北大核心	2015	7	在线阅读下载PDF 职称材料
8	肿瘤治疗学		《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS	1997	0	在线阅读下载PDF 职称材料