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多重PCR方法检测食品中转基因成分被引量：16: 1; 作者刘光明苏文金 +3 位作者梁基选高榕宋思扬陈伟铃《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2002年第4期379-383,共5页; 根据转基因农作物中最常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 3 5S)和根癌农杆菌终止子(NOS)的序列 ,设计合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针 (FDCP) ,分别建立了多重PCR、应用FDCP的实时荧光PCR同时检测转基因成分 3 5S启动子... 展开更多; 关键词多重pcr方法检测食品转基因成分; 在线阅读下载PDF 职称材料

多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立被引量：9: 2; 作者岳丰雄崔尚金 +2 位作者冉多良戚亭周盛华《养猪》 2010年第3期41-44,共4页; 本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-... 展开更多; 关键词多重pcr方法猪圆环病毒2型猪细小病毒猪伪狂犬病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

鉴定金黄色葡萄球菌的多重PCR方法被引量：1: 3; 作者王娉劳华均 +3 位作者胡玥袁飞杨海荣陈颖《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期195-198,共4页; 建立了一种快速鉴定和鉴别金黄色葡萄球菌的多重PCR方法。利用金黄色葡萄球菌的特异基因、耐甲氧西林基因和4种肠毒素基因nuc、mecA和sea、sec、sed、see建立6重PCR反应体系,并对PCR体系,引物浓度进行优化。6对PCR引物均能特异地扩出相... 展开更多; 关键词金黄色葡萄球菌多重pcr方法检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪瘟和猪伪狂犬野毒与其疫苗株多重PCR鉴别方法的建立被引量：7: 4; 作者李达马萍 +6 位作者汤德元张元鑫张华曾智勇刘霞王洪光韦冠东《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期127-132,共6页; 为建立一步法鉴别检测猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株与其疫苗株感染的多重PCR方法(m PCR),本实验通过比对分析Gen Bank中登录的CSFV和PRV的相关基因序列分别设计可以区分CSFV与PRV及其疫苗株的5对特异性引物,建立了其多重... 展开更多; 关键词猪瘟病毒猪伪狂犬病病毒疫苗病毒株多重pcr方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

多重PCR快速诊断猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型与猪细小病毒方法的建立被引量：5: 5; 作者谢燕婷郑敏 +2 位作者石磊王隆柏张志刚《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第1期60-64,共5页; 利用Primer Premier 5.0及DNAstar软件对猪伪狂犬病毒gB基因、猪圆环病毒2型ORF2基因和猪细小病毒VP2基因的保守区进行引物设计,选出扩增序列为猪伪狂犬病毒(373 bp)、猪圆环病毒2型(430 bp)和猪细小病毒(495 bp)的3对引物.敏感性和特... 展开更多; 关键词多重pcr方法猪伪狂犬病病毒猪圆环病毒2型猪细小病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

三种犬呼吸道常见病毒多重PCR检测方法建立被引量：2: 6; 作者俞向前闫洁新 +6 位作者文德亮郭志波陈琦潘世友刘广庆朱建国叶承荣《上海畜牧兽医通讯》 2020年第6期2-5,共4页; 为建立犬呼吸道冠状病毒(Canine respiratory coronavirus,CRCoV)、犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)3种病毒的多重PCR方法,根据GenBank中CRCoV、CPV和CDV的基因序列,进行BLAST同源性分析,... 展开更多; 关键词犬呼吸道冠状病毒犬细小病毒犬瘟热病毒多重pcr方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

多重PCR快速检测猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型方法的建立: 7; 作者谢燕婷《福建畜牧兽医》 2013年第5期15-17,共3页; 根据GenBank上猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）的已知序列，利用Primer Premier 5.0及DNAstar软件对上述病毒基因保守区进行引物设计，选出扩增序列为PRV gB基因373 bp、PCV2 ORF2基因430 bp两对引物。在优化单项PCR反应... 展开更多; 关键词多重pcr方法猪伪狂犬病病毒猪圆环病毒2型; 在线阅读下载PDF 职称材料

3种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立被引量：17: 8; 作者刘忠梅徐义刚 +3 位作者曲敏莫春生刘新亮李苏龙《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期186-190,共5页; 应用靶序列富集多重聚合酶链式反应（t arget-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR）技术建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌3种食源性致病菌的快速检测方法。分别以金黄色葡萄球菌fem A基因、沙门氏菌inv A基... 展开更多; 关键词靶序列富集多重pcr方法沙门氏菌金黄色葡萄球菌志贺氏菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪圆环病毒3的流行及应对措施分析被引量：2: 9; 作者肖佳旭李晴 +2 位作者王裕华张泽李佳爱《吉林畜牧兽医》 2020年第1期110-111,共2页; 猪圆环病毒3是一种影响范围极大的病毒,对畜牧养殖工作有着重要影响。本文在了解猪圆环病毒病源的基础上,明确了猪圆环病毒3的病原学与流行病学特征,结合近年来社会发展对养猪提出的要求,分析如何做好猪圆环病毒3的应对工作。; 关键词猪圆环病毒3 诊断多重pcr方法荧光pcr方法 LAMP方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多重PCR方法检测食品中转基因成分被引量：16: 1; 作者刘光明苏文金梁基选高榕宋思扬陈伟铃; 机构厦门大学生命科学学院厦门出入境检验检疫局; 出处《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2002年第4期379-383,共5页; 基金厦门市科技计划项目 (350 2Z2 0 0 1 1 0 9)资助课题; 文摘根据转基因农作物中最常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 3 5S)和根癌农杆菌终止子(NOS)的序列 ,设计合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针 (FDCP) ,分别建立了多重PCR、应用FDCP的实时荧光PCR同时检测转基因成分 3 5S启动子和NOS终止子的方法 .并利用该套方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等实物样品进行了检测 ,发现 1 3份样品中有 6份检出3 5S启动子、NOS终止子 ,其余 7份样品的检测结果为阴性 .表明作者建立的多重PCR方法能有效检测出 3 5S和NOS成分 ,其中多重PCR法具有灵敏度高、特异性好的特点 ,多重荧光PCR法则更为简便、快速。; 关键词多重pcr方法检测食品转基因成分; Keywords genetically modified food multiplex pcr fluorescence pcr fluorophore double chain probe; 分类号 TS201 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立被引量：9: 2; 作者岳丰雄崔尚金冉多良戚亭周盛华; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室新疆农业大学动物医学学院; 出处《养猪》 2010年第3期41-44,共4页; 文摘本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-1基因271bp片段、PRRSVMN基因美洲型434bp片段、PRVgB基因194bp片段。通过人为混合以上4种病毒进行特异性及敏感性试验,结果表明,该方法具有很好的特异性和敏感性。对猪瘟病毒、大肠杆菌和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性;该mPCR方法对PPV的最低检测量为8.64×10-3μg,PRV的最低检测量为2.36×10-3μg,PRRSV的最低检测量为3.68×10-3μg,PCV2的最低检测量为2.90×10-4μg。该方法的建立对临床上PCV2、PPV、PRV、PRRSV的鉴别诊断以及以上这4种病毒的流行病学调查具有十分重要的意义。; 关键词多重pcr方法猪圆环病毒2型猪细小病毒猪伪狂犬病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒; Keywords Multiplex pcr（mpcr）： porcine circovirus type Ⅱ（PCV2）： porcine parvovirus （PPV）； porcine pseudorabies virus （PRV）： porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鉴定金黄色葡萄球菌的多重PCR方法被引量：1: 3; 作者王娉劳华均胡玥袁飞杨海荣陈颖; 机构中国检验检疫科学研究院宁波出入境检验检疫局; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期195-198,共4页; 基金十一五科技支撑计划项目(No.2009BAD9B06); 文摘建立了一种快速鉴定和鉴别金黄色葡萄球菌的多重PCR方法。利用金黄色葡萄球菌的特异基因、耐甲氧西林基因和4种肠毒素基因nuc、mecA和sea、sec、sed、see建立6重PCR反应体系,并对PCR体系,引物浓度进行优化。6对PCR引物均能特异地扩出相应的目的基因。对47株金黄色葡萄球菌的检测结果与应用单重PCR鉴定结果完全一致。实验所建立的多重PCR方法能在一个反应体系中鉴定和鉴别金黄色葡萄球菌,为食品中金黄色葡萄球菌的快速检测提供了一种有效的检测手段。; 关键词金黄色葡萄球菌多重pcr方法检测; Keywords Staphylococcus aureus, multiplex pcr, detection; 分类号 R440 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪瘟和猪伪狂犬野毒与其疫苗株多重PCR鉴别方法的建立被引量：7: 4; 作者李达马萍汤德元张元鑫张华曾智勇刘霞王洪光韦冠东; 机构贵州大学动物科学学院贵州省贵阳市黔灵山公园动物园贵州省动物疫病预防控制中心; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期127-132,共6页; 基金贵州省农业攻关项目资助(黔科合NY字[2014]3055号) 贵州省科学技术基金项目资助(黔科合J字[2013]2110号) 贵州大学研究生创新基金资助(农研[2015]030号); 文摘为建立一步法鉴别检测猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株与其疫苗株感染的多重PCR方法(m PCR),本实验通过比对分析Gen Bank中登录的CSFV和PRV的相关基因序列分别设计可以区分CSFV与PRV及其疫苗株的5对特异性引物,建立了其多重PCR鉴别检测方法。结果表明,建立的多重PCR方法对CSFV和PRV扩增为阳性,而对PCV2、PRRSV、JEV和BVDV扩增结果均为阴性;最低核酸检测量分别为1.7×10~3拷贝/μL(CSFV野毒株)、9.9×10~3拷贝/μL(CSFV-C疫苗株)、1.3×10~3拷贝/μL Guizhou-DY)、6.9×10~3拷贝/μL(Bartha-K61)和5.5×10~3拷贝/μL(SA215)。采用该方法对134份可疑临床样品进行检测,结果表明CSFV和PRV疫苗株与野毒株在能繁母猪、育肥猪、保育猪和哺乳仔猪中的5重感染率分别为2.6%(1/38)、7.7%(2/26)、8.3%(3/36)和8.8%(3/34)。本研究建立的多重PCR方法为从病原学方面快速鉴别CSF和PR疫苗毒与野毒提供了新的技术支撑,为规模化猪场实现猪瘟与猪伪狂犬的净化提供一种新方法。; 关键词猪瘟病毒猪伪狂犬病病毒疫苗病毒株多重pcr方法; Keywords classical swine fever pseudorabies virus vaccine viruses multiplex pcr; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多重PCR快速诊断猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型与猪细小病毒方法的建立被引量：5: 5; 作者谢燕婷郑敏石磊王隆柏张志刚; 机构厦门银祥集团有限公司肉食品安全生产技术国家重点实验室福建省农业科学院畜牧兽医研究所华南理工大学轻工与食品学院; 出处《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第1期60-64,共5页; 基金 "十二五"国家科技支撑计划资助项目(2012BAD28B09 2014BAD13B01); 文摘利用Primer Premier 5.0及DNAstar软件对猪伪狂犬病毒gB基因、猪圆环病毒2型ORF2基因和猪细小病毒VP2基因的保守区进行引物设计,选出扩增序列为猪伪狂犬病毒(373 bp)、猪圆环病毒2型(430 bp)和猪细小病毒(495 bp)的3对引物.敏感性和特异性试验结果表明,mPCR对3种病毒的核酸检测限量从猪伪狂犬病毒至猪细小病毒分别为1.62×10-6、1.47×10-6和1.28×10-4ng,对灭菌双蒸水、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒cDNA和猪瘟病毒cDNA的mPCR扩增结果均为阴性.mPCR可作为临床上猪伪狂犬病、猪圆环病毒2型感染和猪细小病毒病的病原学快速诊断方法.; 关键词多重pcr方法猪伪狂犬病病毒猪圆环病毒2型猪细小病毒; Keywords mpcr PRV PCV2, PPV; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名三种犬呼吸道常见病毒多重PCR检测方法建立被引量：2: 6; 作者俞向前闫洁新文德亮郭志波陈琦潘世友刘广庆朱建国叶承荣; 机构浦东新区动物疫病预防控制中心上海交通大学农业与生物学院上海市浦东新区川沙新镇集体资产管理事务中心上海市动物疫病预防控制中心上海喜乐缘宠物用品有限公司上海元和利宠宠物诊疗有限公司; 出处《上海畜牧兽医通讯》 2020年第6期2-5,共4页; 基金浦东新区科技发展基金民生科技项目“犬传染性呼吸系统疾病重要病原感染流行及其诊治技术研究”(PKJ2018-N04)。; 文摘为建立犬呼吸道冠状病毒(Canine respiratory coronavirus,CRCoV)、犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)3种病毒的多重PCR方法,根据GenBank中CRCoV、CPV和CDV的基因序列,进行BLAST同源性分析,找出保守序列,并根据保守序列对每个病毒设计引物,建立扩增3种病毒的多重PCR方法,并通过已建立的方法对收集的呼吸道病犬病料进行检测。结果表明,所建立的三重PCR体系组成为2×Taq Mix 12.5μL,3对上、下游引物各0.6μL,混合模板1μL,ddH 2 O 7.9μL;扩增程序为94℃5 min;94℃30 s,54℃1 min,72℃24 s,共35个循环;72℃8 min。该方法具有较高的灵敏性和特异性。临床验证实验表明,本实验所建立的多重PCR方法可用于临床诊断。; 关键词犬呼吸道冠状病毒犬细小病毒犬瘟热病毒多重pcr方法; 分类号 S858.292 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多重PCR快速检测猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型方法的建立: 7; 作者谢燕婷; 机构厦门银祥集团肉食品安全生产技术国家重点实验室; 出处《福建畜牧兽医》 2013年第5期15-17,共3页; 基金厦门市科技计划项目"肉品安全快速基因检测方法的研究"(3502Z20110001)资助; 文摘根据GenBank上猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）的已知序列，利用Primer Premier 5.0及DNAstar软件对上述病毒基因保守区进行引物设计，选出扩增序列为PRV gB基因373 bp、PCV2 ORF2基因430 bp两对引物。在优化单项PCR反应条件基础上，建立了PRV-PCV2两重PCR检测方法。敏感性及特异性试验结果显示，该mPCR对2种病毒的核酸检测可至1.47×10-6~1.62×10-6 ng，而对灭菌双蒸水、猪细小病毒（PPV）猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）多重PCR的扩增结果均为阴性，作为临床上猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型感染的病原学快速诊断方法具有可行性。; 关键词多重pcr方法猪伪狂犬病病毒猪圆环病毒2型; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名3种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立被引量：17: 8; 作者刘忠梅徐义刚曲敏莫春生刘新亮李苏龙; 机构黑龙江出入境检验检疫局哈尔滨商业大学食品工程学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期186-190,共5页; 基金公益性行业(质检)科研专项(201310126); 文摘应用靶序列富集多重聚合酶链式反应（t arget-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR）技术建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌3种食源性致病菌的快速检测方法。分别以金黄色葡萄球菌fem A基因、沙门氏菌inv A基因和志贺氏菌ipa H基因为靶基因,设计3对特异性引物,并与通用引物连接组成Tem-PCR引物,通过反应条件优化,建立了Tem-PCR检测方法。结果显示,建立的Tem-PCR方法特异性强,对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌的检测灵敏度分别为1.1×10^3、2×10^3 CFU/m L和1.2×10^3 CFU/m L。Tem-PCR检测方法有效地解决了传统多重PCR引物扩增效率不均衡的问题。; 关键词靶序列富集多重pcr方法沙门氏菌金黄色葡萄球菌志贺氏菌; Keywords Tem-pcr assay Salmonella Staphyloc occus aureus Shigella; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学] R155.5 [医药卫生—营养与食品卫生学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒3的流行及应对措施分析被引量：2: 9; 作者肖佳旭李晴王裕华张泽李佳爱; 机构河北农业大学; 出处《吉林畜牧兽医》 2020年第1期110-111,共2页; 文摘猪圆环病毒3是一种影响范围极大的病毒,对畜牧养殖工作有着重要影响。本文在了解猪圆环病毒病源的基础上,明确了猪圆环病毒3的病原学与流行病学特征,结合近年来社会发展对养猪提出的要求,分析如何做好猪圆环病毒3的应对工作。; 关键词猪圆环病毒3 诊断多重pcr方法荧光pcr方法 LAMP方法; 分类号 S85 [农业科学—兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	多重PCR方法检测食品中转基因成分	刘光明苏文金梁基选高榕宋思扬陈伟铃	《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心	2002	16	在线阅读下载PDF 职称材料
2	多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立	岳丰雄崔尚金冉多良戚亭周盛华	《养猪》	2010	9	在线阅读下载PDF 职称材料
3	鉴定金黄色葡萄球菌的多重PCR方法	王娉劳华均胡玥袁飞杨海荣陈颖	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪瘟和猪伪狂犬野毒与其疫苗株多重PCR鉴别方法的建立	李达马萍汤德元张元鑫张华曾智勇刘霞王洪光韦冠东	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	7	在线阅读下载PDF 职称材料
5	多重PCR快速诊断猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型与猪细小病毒方法的建立	谢燕婷郑敏石磊王隆柏张志刚	《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2014	5	在线阅读下载PDF 职称材料
6	三种犬呼吸道常见病毒多重PCR检测方法建立	俞向前闫洁新文德亮郭志波陈琦潘世友刘广庆朱建国叶承荣	《上海畜牧兽医通讯》	2020	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	多重PCR快速检测猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型方法的建立	谢燕婷	《福建畜牧兽医》	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	3种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立	刘忠梅徐义刚曲敏莫春生刘新亮李苏龙	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2016	17	在线阅读下载PDF 职称材料
9	猪圆环病毒3的流行及应对措施分析	肖佳旭李晴王裕华张泽李佳爱	《吉林畜牧兽医》	2020	2	在线阅读下载PDF 职称材料