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1株多重耐药大肠杆菌噬菌体BP32的分离鉴定及生物学特性分析 被引量:1
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作者 吴静楠 李占鸿 +3 位作者 李富祥 张振兴 张以芳 宋建领 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3540-3551,共12页
[目的]拟分离1株可裂解多重耐药大肠杆菌的噬菌体,明确其生物学特性及基因组特征。[方法]本研究从病死山羊肺脏组织中分离大肠杆菌,并通过药敏试验分析其耐药性。以大肠杆菌ER2738菌株为宿主菌,从养殖场污水中进行噬菌体的初步增殖,通... [目的]拟分离1株可裂解多重耐药大肠杆菌的噬菌体,明确其生物学特性及基因组特征。[方法]本研究从病死山羊肺脏组织中分离大肠杆菌,并通过药敏试验分析其耐药性。以大肠杆菌ER2738菌株为宿主菌,从养殖场污水中进行噬菌体的初步增殖,通过点滴法确定分离噬菌体的宿主谱,采用双层琼脂平板法分离纯化特异性裂解大肠杆菌的噬菌体,进一步对其形态、最佳感染复数(MOI)、生长曲线、酸碱度和温度耐受性等生物学特性进行研究;通过高通量测序平台测定其全基因组序列,并对其基因组及遗传进化特征进行分析。[结果]从病死山羊肺脏中分离到1株多重耐药性大肠杆菌,命名为YNEC001。从养殖场污水中分离到1株可特异性裂解YNEC001菌株的噬菌体BP32,电镜观察显示噬菌体BP32属于肌尾科噬菌体,最佳MOI为0.1,潜伏期约为30 min,爆发期持续约60 min,裂解量约为660 PFU/cell,在30~50℃和pH 4.0~10.0条件下可保持稳定的活性。噬菌体BP32基因组长度为166346 bp,GC含量偏低(35.42%),未发现耐药基因和毒力因子,基因组共包含261个开放阅读框(ORF),其中125个为已知功能基因,含有8个tRNA。在全基因组水平上,噬菌体BP32与肠杆菌噬菌体Escherichia phage BF15(MW822007)核苷酸序列相似性最高(98.25%),但基于末端酶大亚基序列的进化分析则表明BP32与大肠杆菌噬菌体Escherichia phage vB_EcoM_SP1(MT682709)的亲缘关系最近,而与Escherichia phage BF15(MW822007)的关系较远。[结论]本研究分离到1株多重耐药大肠杆菌YNEC001,并分离到可特异性裂解YNEC001菌株的噬菌体BP32,该噬菌体具有较强的裂解能力和良好的稳定性,具备开发为耐药性大肠杆菌治疗制剂的潜力。 展开更多
关键词 多重耐药大肠杆菌 噬菌体 生物学特征 全基因组分析
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蒲公英水提物联合抗菌药对含CTX-M基因多重耐药大肠杆菌的体外抑菌效果研究 被引量:8
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作者 李铮 李崇 +1 位作者 沈水宝 司红彬 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期85-88,I0004,共5页
为了研究蒲公英水提物与抗菌药对CTX-M型产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌的体外联合抑制效果,为畜牧业的用药提供参考依据。通过PCR的方法选取了含有CTX-M基因的大肠杆菌为受试菌株;采用微量肉汤二倍稀释法,测定了蒲公英水提物和11... 为了研究蒲公英水提物与抗菌药对CTX-M型产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌的体外联合抑制效果,为畜牧业的用药提供参考依据。通过PCR的方法选取了含有CTX-M基因的大肠杆菌为受试菌株;采用微量肉汤二倍稀释法,测定了蒲公英水提物和11种抗菌药单独使用时,各药物对该大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC);采用微量肉汤传代法和微量棋盘法,测定了蒲公英水提物与11种抗菌药联合使用时,二者联合对该大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小部分抑菌浓度指数(FICI)。结果显示,蒲公英对受试大肠杆菌的MIC值为250 mg/mL,在与痢菌净、氟苯尼考、阿奇霉素和利福平的联合传代和棋盘试验中发现,蒲公英与这4种抗菌药联用可降低抗菌药MIC且联合使用效果均为相加作用。表明蒲公英与这4种抗菌药联用可增强4种抗菌药的效果,可减少畜牧生产中抗菌药的使用量。 展开更多
关键词 蒲公英 多重耐药大肠杆菌 CTX-M 中西联合使用 ESBLS
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连翘联合抗菌药物对多重耐药大肠杆菌B_3的抗菌试验 被引量:4
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作者 兰仕梅 何彦蓉 +7 位作者 周江南 柴晓娟 刘校羽 杨溢欢 杜港 沙莎 孙裕光 吴青 《上海畜牧兽医通讯》 2018年第4期18-21,共4页
目的:测定连翘水煎剂及其与抗菌药物联合对多重耐药大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)B_3菌株的抑菌效果。方法:采用牛津杯法测定连翘对B_3菌的抑菌作用,利用微量肉汤稀释法测定连翘、四环素和磺胺间甲氧嘧啶钠对B_3菌的最小抑菌浓度(m... 目的:测定连翘水煎剂及其与抗菌药物联合对多重耐药大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)B_3菌株的抑菌效果。方法:采用牛津杯法测定连翘对B_3菌的抑菌作用,利用微量肉汤稀释法测定连翘、四环素和磺胺间甲氧嘧啶钠对B_3菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);通过棋盘稀释法来测定连翘和上述抗菌药物的联合抑菌效果。结果:连翘能抑制多重耐药大肠杆菌B_3菌株的生长繁殖,呈现抗菌作用;试验药物对B_3菌株的最小抑菌浓度分别为连翘125.0mg/mL、四环素12.8 mg/mL、磺胺间甲氧嘧啶钠50.0 mg/mL;部分抑菌浓度(fractional inhibitory concentration,FIC)指数结果显示连翘与四环素联合呈相加作用,连翘与磺胺间甲氧嘧啶钠联合呈无关作用。本试验为兽医临床解决细菌耐药问题提供了用药新思路,同时为开发中草药制剂提供依据。 展开更多
关键词 连翘 四环素 磺胺间甲氧嘧啶钠 多重耐药大肠杆菌 抗菌
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苦豆子提取物对多重耐药大肠杆菌的体外抑菌作用 被引量:5
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作者 李志君 崔生玲 +4 位作者 张雯 张宝锁 邵倩 杨奇 张为民 《中国兽药杂志》 2022年第11期10-16,共7页
为探究苦豆子提取物对多重耐药大肠杆菌的体外抑菌作用,本研究以从蛋鸡粪便样本中分离的1株多重耐药大肠杆菌为研究对象,测定了苦豆子提取物的最小抑菌浓度(MIC)以及与抗菌药物联用的抑菌效果,并测定了对多重耐药大肠杆菌生长曲线、生... 为探究苦豆子提取物对多重耐药大肠杆菌的体外抑菌作用,本研究以从蛋鸡粪便样本中分离的1株多重耐药大肠杆菌为研究对象,测定了苦豆子提取物的最小抑菌浓度(MIC)以及与抗菌药物联用的抑菌效果,并测定了对多重耐药大肠杆菌生长曲线、生物被膜以及运动能力的影响。结果表明,苦豆子提取物MIC为125 mg/mL,与头孢噻呋联用呈现协同作用;与对照组相比,1/2MIC和MIC的苦豆子提取物可明显抑制菌株的生长;不同浓度苦豆子提取物对菌株生物被膜具有一定程度的抑制和清除作用,1/2MIC和MIC组可极显著降低菌株的运动能力(P<0.01)。表明苦豆子提取物对多重耐药大肠杆菌具有良好的体外抑菌作用。 展开更多
关键词 苦豆子提取物 多重耐药大肠杆菌 体外抑菌
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云南多重耐药猪源大肠杆菌的分离鉴定及其耐药机制初步研究 被引量:4
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作者 毕保良 李富祥 +2 位作者 胡骑 宋建领 李华春 《上海畜牧兽医通讯》 2012年第5期6-7,共2页
从云南省3个规模化猪场仔猪黄白痢病猪病例分离到7株革兰氏阴性小杆菌,用生理生化鉴定、药敏试验和致病性试验对分离菌株进行鉴定,并提取细菌的质粒,分析质粒与细菌耐药性之间的相关性。结果表明:7株分离株经生理生化试验鉴定为仔猪黄... 从云南省3个规模化猪场仔猪黄白痢病猪病例分离到7株革兰氏阴性小杆菌,用生理生化鉴定、药敏试验和致病性试验对分离菌株进行鉴定,并提取细菌的质粒,分析质粒与细菌耐药性之间的相关性。结果表明:7株分离株经生理生化试验鉴定为仔猪黄白痢大肠杆菌,对小白鼠有强致病性,分离株对15种抗生素表现为多重耐药,其中14耐1株、13耐2株、11耐2株、8和8耐以下2株,头孢类抗生素是治疗仔猪黄白痢的首选药物,表明云南猪大肠杆菌已经呈现出十分严重的耐药性。质粒图谱分析表明,4株分离株均携带分子量约为5000bp的一个质粒,而另外3株不携带任何质粒。质粒转化实验表明,分离株所携带的质粒为非耐药性质粒,与细菌耐药性无直接相关性。 展开更多
关键词 仔猪黄白痢 多重耐药大肠杆菌 分离 鉴定 质粒
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不同环境胁迫因子对猪源耐药大肠杆菌生长的影响 被引量:3
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作者 廖书丹 谭艾娟 +5 位作者 孙海峰 向润 杨剑 张元鑫 宋旭琴 吕世明 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期946-957,共12页
【目的】探究环境胁迫因子对猪源多重耐药大肠杆菌生存适应性的影响,为创造多重耐药菌株带来高适应代价的环境及加速降低种群耐药水平提供理论依据。【方法】以分离自贵州省规模化猪场的多重耐药大肠杆菌QL15为研究对象,以大肠杆菌质控... 【目的】探究环境胁迫因子对猪源多重耐药大肠杆菌生存适应性的影响,为创造多重耐药菌株带来高适应代价的环境及加速降低种群耐药水平提供理论依据。【方法】以分离自贵州省规模化猪场的多重耐药大肠杆菌QL15为研究对象,以大肠杆菌质控(敏感)菌株ATCC25922为对照,经体外竞争试验测定不同环境(培养基浓度、碳源、氮源、pH和温度)胁迫下耐药菌株QL15相对于敏感菌株ATCC25922的适应性,并通过重测序变异位点和实时荧光定量PCR测定分析耐药基因表型及外排泵和外膜孔道蛋白基因表达与细菌适应性代价的关系。【结果】耐药菌株QL15在体外独立及混合培养时,除在稀释LB培养基(1/4、1/8和1/16)中的长势较敏感菌株ATCC25922低外,在低碳源(0.1%和0.5%)、低氮源(0.01%和0.05%)、酸碱性(p H=5.0、pH=6.0和pH=8.0)及低温(20℃)和高温(42℃)胁迫下的生长均优于敏感菌株ATCC25922,且混合培养结果优于独立培养。将耐药菌株QL15基因组序列与敏感菌株ATCC25922基因组序列进行比对,共检测到509个InDel突变位点,其中Delete突变位点233个、Insert突变位点276个;共注释到71个功能基因,以细胞壁与细胞膜相关基因突变最多(10个),占14.1%。与敏感菌株ATCC25922相比,耐药菌株QL15在不同环境胁迫下其外排泵与外膜孔道蛋白相关基因emr B、acr B、tol C和omp C呈下调表达,而omp F基因呈上调表达。【结论】多重耐药大肠杆菌耐药性的获得促使其具有更强的适应性,但对可直接利用营养物质的获取弱于敏感菌株,即处于竞争劣势。耐药大肠杆菌的多重耐药性主要是由多种外排泵和外膜孔道蛋白介导完成,其中,omp F基因在pH胁迫、全营养胁迫和高、低温胁迫下均处于上调表达状态,故推测omp F基因的高表达有利于大肠杆菌在上述胁迫条件下生长。 展开更多
关键词 多重耐药大肠杆菌 猪源 环境胁迫因子 相对适应性
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