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基于多重微球流式免疫荧光法检测成人血浆12种细胞因子参考区间的初步建立
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作者 王新宇 程星 +5 位作者 郑璐 张玥 马雨婷 牛国平 顾锋 陈永强 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第5期1202-1207,共6页
目的:基于多重微球流式免疫荧光法(MBFFI)初步建立成人血浆12种细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17、IFN-γ、IFN-α、TNF-α)的参考区间。方法:收集2022年1月至2023年12月于徐州市中心医院体检的... 目的:基于多重微球流式免疫荧光法(MBFFI)初步建立成人血浆12种细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17、IFN-γ、IFN-α、TNF-α)的参考区间。方法:收集2022年1月至2023年12月于徐州市中心医院体检的140例健康成人血浆标本,采用流式细胞仪、青岛瑞斯凯尔生物科技有限公司以及泰州谱迪生物科技有限公司试剂盒分别检测血浆中12种细胞因子的水平,并建立参考区间。结果:12种细胞因子均呈非正态分布,而且两家检测试剂95%参考区间存在差异。青岛瑞斯凯尔生物科技有限公司生产的12项细胞因子试剂盒参考区间为IFN-α:<4.91 pg/ml、IL-12 p70:<1.95 pg/ml、IL-5:<12.72 pg/ml、IL-8:<60.68 pg/ml、IL-1β:<27.67 pg/ml、IL-2:<5.01 pg/ml、IL-4:<1.22 pg/ml、IL-6:<6.11 pg/ml、TNF-α:<2.92 pg/ml、IL-17:<10.27 pg/ml、IL-10:<6.88 pg/ml、IFN-γ:<17.68 pg/ml;泰州谱迪生物科技有限公司生产的12项细胞因子试剂盒参考区间为:IFN-α:<4.05 pg/ml、IL-12 p70:<7.33 pg/ml、IL-5:<7.80 pg/ml、IL-8:<13.24 pg/ml、IL-1β:<19.24 pg/ml、IL-2:<2.42 pg/ml、IL-4:<0.99 pg/ml、IL-6:<2.10 pg/ml、TNF-α:<0.87 pg/ml、IL-17:<1.42 pg/ml、IL-10:<1.10 pg/ml、IFN-γ:<1.34 pg/ml。结论:本研究应用MBFFI初步建立了两家试剂检测健康成人血浆12种细胞因子的参考区间,为临床相关疾病的诊治提供了重要参考。 展开更多
关键词 多重微球流式免疫荧光 细胞因子 参考区间
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多重微球流式荧光免疫技术检测成人脑脊液IL-10水平参考区间探索
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作者 邹东梅 刘艳 +3 位作者 段建钢 刘峥 郭轶先 孙婉玲 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第5期1182-1185,1191,共5页
目的:探讨采用多重微球流式荧光免疫技术(MBFFI)检测成人脑脊液IL-10水平的医学参考区间。方法:纳入743例非肿瘤性疾病患者,根据罹患疾病分为8组。采用MBFFI同时检测CSF及血浆IL-10水平。结果:(1)颅内感染组CSFIL-10水平明显高于其他组... 目的:探讨采用多重微球流式荧光免疫技术(MBFFI)检测成人脑脊液IL-10水平的医学参考区间。方法:纳入743例非肿瘤性疾病患者,根据罹患疾病分为8组。采用MBFFI同时检测CSF及血浆IL-10水平。结果:(1)颅内感染组CSFIL-10水平明显高于其他组。(2)选择不合并肿瘤性疾病、感染或炎症性疾病的静脉窦血栓(CVST)组作为近似正常人群的医学参考区间。250例CVST患者脑脊液IL-10水平呈偏态分布,取95%界值作为上限,即CSF IL-10<3.50 pg/ml为医学参考区间。(3)CVST组患者,CSF IL-10水平与血浆IL-10水平无相关性。结论:本研究建立了MBFFI检测成人CSF IL-10的医学参考值区间,即<3.50 pg/ml,可供临床参考应用。 展开更多
关键词 多重流式荧光免疫技术 脑脊液 IL-10 参考区间
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猴D型逆转录病毒p27基因的原核表达及流式免疫荧光微球检测技术的建立
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作者 刘助红 王静 +4 位作者 李秀珍 尹雪琴 张钰 郭鹏举 黄韧 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第9期17-23,共7页
目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间... 目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间。采取GST树脂纯化目标蛋白,包被磁珠,建立流式免疫荧光微球检测技术,用于临床样本的检测。结果重组蛋白以可溶的上清液进行表达,诱导的最佳时间为4 h。包被磁珠后,成功建立流式免疫荧光微球检测技术,对阳性血清稀释81倍仍可检测为阳性,对猴类其他病原的阳性血清无交叉反应,特异性强,与ELISA法同时对24份临床样本进行检测,其中3份样品的流式免疫荧光微球检测结果为阳性,ELISA检测结果为2份阳性,1份阴性,两种方法的检测结果符合率为96%。结论成功表达猴D型逆转录病毒p27蛋白,并运用该蛋白建立了灵敏度高,特异性强,样本需求少的流式免疫荧光微球检测技术,为后续推广应用多重流式免疫荧光微球检测技术奠定了基础。 展开更多
关键词 猴D型逆转录病毒 P27基因 原核表达 流式免疫荧光检测技术
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多重微球流式荧光免疫技术检测抗核抗体谱的评价与临床应用 被引量:14
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作者 尚晓莹 于腾 +4 位作者 孙桂荣 姚远 张丽君 贺侠琴 刘明军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期331-334,共4页
目的:分析和评估多重微球流式荧光免疫技术(MBFFI)检测抗核抗体谱的结果和临床应用价值。方法:同时用MBFFI和免疫印迹技术检测333例自身免疫病患者、44例其他疾病患者和59例健康者血清的抗核抗体谱,进行结果的一致性检验,并用间接免疫... 目的:分析和评估多重微球流式荧光免疫技术(MBFFI)检测抗核抗体谱的结果和临床应用价值。方法:同时用MBFFI和免疫印迹技术检测333例自身免疫病患者、44例其他疾病患者和59例健康者血清的抗核抗体谱,进行结果的一致性检验,并用间接免疫荧光技术检测抗核抗体,比较3种方法的灵敏度、特异度。结果:MBFFI与免疫印迹技术检测所有标本抗核抗体谱一致率为83. 26%,Kappa值=0. 655;病例组各项目一致率在79. 88%至99. 40%之间,Kappa值在0. 106至0. 958之间。对照组各项目一致率在96. 61%至100. 00%之间,其他疾病组各项目一致率在95. 45%至100. 00%之间。间接免疫荧光技术诊断自身免疫病的灵敏度最高(P<0. 01),MBFFI诊断自身免疫病的特异度最高(P<0. 05),MBFFI与间接免疫荧光技术联合检测可提高灵敏度(P<0. 01)。结论:多重微球流式荧光免疫技术检测抗核抗体谱与免疫印迹技术相比,一致性尚可,特异度更高,可以替代免疫印迹技术成为新一代的抗核抗体确认试验检测方法。 展开更多
关键词 抗核抗体谱 抗核抗体 多重流式荧光免疫技术 免疫印迹技术 间接免疫荧光技术
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主客体结构微球的流式免疫荧光检测的方法
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作者 吴志民 徐宏 古宏晨 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1361-1366,共6页
采用纳米氧化硅客体子球和聚苯乙烯磁性主体母球设计并制备了一种新型的主客体组装结构复合微球,将抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)抗体化学固载于组装微球表面,在流式免疫荧光检测平台中研究其免疫检测性能,并与传统的酶联免疫(ELISA)检测... 采用纳米氧化硅客体子球和聚苯乙烯磁性主体母球设计并制备了一种新型的主客体组装结构复合微球,将抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)抗体化学固载于组装微球表面,在流式免疫荧光检测平台中研究其免疫检测性能,并与传统的酶联免疫(ELISA)检测方法进行了比较.结果表明,主客体组装结构微球在流式免疫荧光检测中具有优异的检测性能,在微球用量极低的情况下仍然具有非常好的检测线性和检测重复性,并且空白限较传统的ELISA方法降低了6/7. 展开更多
关键词 主客体组装结构 生物载体 流式免疫荧光检测 酶联免疫检测
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多重细胞因子检测试剂的开发及其在骨髓瘤中的应用 被引量:1
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作者 彭火英 张之尧 +4 位作者 郑向君 韦鹏 胡迪 陈文明 于晓波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1944-1950,共7页
目的:开发多重细胞因子检测试剂,分析复发难治性多发性骨髓瘤(RRMM)的细胞因子、血管生成、骨重塑蛋白表达水平变化。方法:采用多重微球流式荧光免疫技术建立多重细胞因子定量检测试剂,并应用于55例RRMM患者和22例健康对照血清样本的测... 目的:开发多重细胞因子检测试剂,分析复发难治性多发性骨髓瘤(RRMM)的细胞因子、血管生成、骨重塑蛋白表达水平变化。方法:采用多重微球流式荧光免疫技术建立多重细胞因子定量检测试剂,并应用于55例RRMM患者和22例健康对照血清样本的测定,分析患者细胞因子、血管生成、骨重塑蛋白表达水平及其与临床特征的相关性。结果:本研究成功开发了十重细胞因子免疫分析检测试剂,平均灵敏度为7.1 pg/ml,平均回收率为97.4%,平均批内变异系数为4.8%,平均批间变异系数为9.0%。此外,RRMM样本结果发现IL-2、IL-17、DKK1、RANKL、OPG水平与IgG单克隆蛋白水平呈正相关,TIMP1与IgG、IgA单克隆蛋白水平呈正相关。结论:本研究开发出10种具有较高灵敏度和特异性的细胞因子检测试剂,并发现IL-2、IL-17、DKK1、RANKL、OPG、TIMP1在RRMM中具有追踪疾病进程的潜在价值。建立的多重细胞因子试剂开发流程对今后拓展蛋白标志物多重检测试剂的研发和应用具有重要参考价值。 展开更多
关键词 多重流式荧光免疫技术 复发难治性多发性骨髓瘤 细胞因子 血管生成 骨重塑
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炎症相关细胞因子表达升高与类风湿关节炎病情程度的相关性分析 被引量:4
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作者 闫大伟 万磊 +2 位作者 张孟雨 王思宇 李峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期715-722,共8页
目的检测类风湿关节炎(RA)患者血清中细胞因子的含量,探讨炎性相关细胞因子联合检测对RA病情程度评估的临床应用价值。方法募集RA患者28例和同期15例健康体检者。多重微球流式免疫荧光发光法检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-5、IL-... 目的检测类风湿关节炎(RA)患者血清中细胞因子的含量,探讨炎性相关细胞因子联合检测对RA病情程度评估的临床应用价值。方法募集RA患者28例和同期15例健康体检者。多重微球流式免疫荧光发光法检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-5、IL-6、IL-8、IL-12P70、IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、α干扰素(IFN-α)、IFN-γ、IL-4、IL-10炎症相关细胞因子表达情况,全自动生化分析仪检测C反应蛋白(CRP),魏氏法测量红细胞沉降率(ESR),获取炎症指标数据。计算RA组患者28关节疾病活动指数(DAS28),比较各细胞因子与RA疾病活动度的曲线下面积,分析RA患者炎症相关细胞因子血清水平与CRP、ESR的相关性。结果RA患者血清中IL-2、IL-6、IL-12P70、IL-4、IL-10与RA疾病活动度的指标DAS28-CRP显著相关,IL-12P70、TNF-α、IL-4与RA疾病活动度的指标DAS28-ESR显著相关,反映RA患者病情程度的指标CRP与IL-6(r=0.515)、IL-12P70(r=0.530)、IL-4(r=0.539)、IL-10(r=0.434)呈正相关,ESR与IL-6(r=0.403)、IL-12P70(r=0.475)、TNF-α(r=0.497)、IL-4(r=0.450)呈正相关。与CRP、ESR正常组比较,CRP异常组中IL-6、IL-12P70、IL-2、IL-4、IL-10水平升高,ESR异常组中IL-12P70、IL-4、TNF-α水平升高。RA组患者IL-8、IFN-α、IFN-γ表达较健康组升高。结论血清中炎症相关细胞因子检测对RA的早期诊断和病情程度判断有重要的参考价值,可作为确诊RA的重要预测指标。 展开更多
关键词 类风湿关节炎(RA) 促炎性细胞因子 抑炎性细胞因子 多重微球流式免疫荧光 病情评估
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