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猪主要RNA病毒病多重二温式RT-PCR检测方法的建立及初步应用
被引量：
5
1
作者
路斌
王一成
+4 位作者
吴润
袁秀芳
徐丽华
李军星
王朝文
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第6期38-43,共6页
通过对Genbank登录的CSFV、PRRSV和JEV的核苷酸序列进行比对分析,找出CSFV的E2基因,PRRSV的Nsp2基因和JEV的E基因为相对保守区域[1]。利用生物学软件在保守序列分别设计一对引物,通过对PCR反应条件的优化,确定了最佳引物浓度、最佳Mg2+...
通过对Genbank登录的CSFV、PRRSV和JEV的核苷酸序列进行比对分析,找出CSFV的E2基因,PRRSV的Nsp2基因和JEV的E基因为相对保守区域[1]。利用生物学软件在保守序列分别设计一对引物,通过对PCR反应条件的优化,确定了最佳引物浓度、最佳Mg2+浓度和最佳退火温度,建立了多重二温式PCR方法检测CSFV、PRRSV和JEV。其扩增的目的片断大小分别为CSFV(482 bp)、PRRSV(576 bp)和JEV(375 bp),将传统三温式PCR过程中的退火与延伸合并为一步,从而大大节省临床检测时间,同时又能通过一个反应体系对CSFV、PRRSV及JEV三种猪主要RNA病毒病进行检测。用50份临床病料对本研究多重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为93%以上。表明建立的多重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。
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关键词
CSFV
PRRSV
JEV
多重二温式pcr
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题名
猪主要RNA病毒病多重二温式RT-PCR检测方法的建立及初步应用
被引量：
5
1
作者
路斌
王一成
吴润
袁秀芳
徐丽华
李军星
王朝文
机构
甘肃农业大学
浙江省农业科学院畜牧兽医研究所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第6期38-43,共6页
基金
浙江省重大科技专项农业项目(2008C12049)
文摘
通过对Genbank登录的CSFV、PRRSV和JEV的核苷酸序列进行比对分析,找出CSFV的E2基因,PRRSV的Nsp2基因和JEV的E基因为相对保守区域[1]。利用生物学软件在保守序列分别设计一对引物,通过对PCR反应条件的优化,确定了最佳引物浓度、最佳Mg2+浓度和最佳退火温度,建立了多重二温式PCR方法检测CSFV、PRRSV和JEV。其扩增的目的片断大小分别为CSFV(482 bp)、PRRSV(576 bp)和JEV(375 bp),将传统三温式PCR过程中的退火与延伸合并为一步,从而大大节省临床检测时间,同时又能通过一个反应体系对CSFV、PRRSV及JEV三种猪主要RNA病毒病进行检测。用50份临床病料对本研究多重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为93%以上。表明建立的多重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。
关键词
CSFV
PRRSV
JEV
多重二温式pcr
Keywords
Classical Swine fever virus
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus
Japanese encephalitis virus
Multiplex two-step RT-
pcr
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪主要RNA病毒病多重二温式RT-PCR检测方法的建立及初步应用
路斌
王一成
吴润
袁秀芳
徐丽华
李军星
王朝文
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010
5
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