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β-烟酰胺单核苷酸制备用酶的共表达及其应用
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作者 刘杰虎 宿玲恰 +1 位作者 付慧娴 吴敬 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第8期139-147,共9页
【目的】降低生产β-烟酰胺单核苷酸(β-NMN)的成本,并简化其酶催化法的生产流程。【方法】在作者所在课题组前期建立的6种酶催化合成β-NMN体系的基础上,将这6种酶基因进行两两组合,构建双酶共表达重组菌;采用共表达获得的粗酶液进行... 【目的】降低生产β-烟酰胺单核苷酸(β-NMN)的成本,并简化其酶催化法的生产流程。【方法】在作者所在课题组前期建立的6种酶催化合成β-NMN体系的基础上,将这6种酶基因进行两两组合,构建双酶共表达重组菌;采用共表达获得的粗酶液进行多酶级联催化反应,以合成β-NMN。【结果】当底物D-核糖浓度为10 mmol/L时,β-NMN的产率达72.90%;各双酶共表达重组菌的最佳发酵条件均为诱导温度25℃、IPTG诱导浓度0 mmol/L;确定了对5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成酶(Ec Prs)储存稳定性有显著提升作用的盐离子和多羟基化合物,且发现Mn2+、乳糖和山梨醇对β-NMN产率基本无影响。【结论】该研究建立的双酶共表达体系下多酶级联催化反应制备β-NMN的方法,以及对Ec Prs储存稳定性的优化策略,为酶催化法合成β-NMN提供了新思路。 展开更多
关键词 β-烟酰胺单核苷酸 共表达重组菌 多酶级联催化反应 储存稳定性
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