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恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因的构建及其高效表达被引量：1: 1; 作者张青锋潘卫庆《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期22-24,共3页; 目的 :构建一个恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因 (Pf CP- TCL) ,并在毕氏酵母中进行高效分泌表达。方法 :选取了疟原虫红外期疫苗候选抗原 CSP、TRAP和 L SA- 1中的一些重要 T、B细胞表位 ,按一定的次序加以串联连接 ,并全合成该... 展开更多; 关键词恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

犬埃立克体多表位融合抗原蛋白的免疫学特性研究: 2; 作者李重阳孟庆玲 +5 位作者乔军伍晔晖王立霞郭晶马帅才学鹏《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2018年第12期11-19,共9页; 【目的】构建和制备具有较强抗原性的犬埃立克体(Ehrlichia canis)重组蛋白并研究其免疫学特性。【方法】利用ABCpred等在线软件预测分析犬埃立克体gp19、gp140和gp200等蛋白的优势线性抗原表位,构建多表位融合抗原基因E.canis-megp19及... 展开更多; 关键词犬埃立克体 gp19 gp140 gp200 多表位融合抗原基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

非洲猪瘟病毒多表位融合蛋白P72的构建、表达及免疫学特性研究被引量：5: 3; 作者郭晶李重阳 +5 位作者孟庆玲乔军伍晔晖王立霞马帅才学鹏《家畜生态学报》北大核心 2019年第6期60-65,共6页; 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种烈性传染病,对中国猪养殖产业的发展存在巨大的潜在威胁。为了建立有效的检测手段来防控ASFV的流行,本试验以GenBank中ASFV基因组序列为基础,运用在线软件对ASFV结构蛋白P72的优势线性抗原表... 展开更多; 关键词非洲猪瘟病毒 MeP72 多表位融合抗原基因原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于奶牛乳腺炎无乳链球菌rSip-PGK-FbsA融合蛋白的间接ELISA检测方法的建立被引量：2: 4; 作者吴金花布日额 +10 位作者王金良陈金龙锡林高娃孙立杰王华王学理刘燕杜长智朝洛蒙于辰龙白文丽《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期230-234,共5页; 为建立一种快速而准确的奶牛乳腺炎无乳链球菌抗体检测方法,本研究以原核表达并纯化的无乳链球菌的膜表面相关蛋白SIP、磷酸甘油激酶PGK及纤连蛋白FbsA 3种串联表达的融合蛋白rSip-PGK-FbsA为包被抗原,建立了检测奶牛无乳链球菌抗体的间... 展开更多; 关键词无乳链球菌多表位融合抗原rSip-PGK-FbsA 纯化 ELISA检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因的构建及其高效表达被引量：1: 1; 作者张青锋潘卫庆; 机构第二军医大学基础医学部病原生物学教研室; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期22-24,共3页; 基金世界卫生组织专项基金 ( ID980 2 61) 国家杰出青年科学基金 ( 3 0 2 2 5 0 41) 国家高新技术发展规划 ( 863计划 )课题( 2 0 0 1AA2 15 0 2 1); 文摘目的 :构建一个恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因 (Pf CP- TCL) ,并在毕氏酵母中进行高效分泌表达。方法 :选取了疟原虫红外期疫苗候选抗原 CSP、TRAP和 L SA- 1中的一些重要 T、B细胞表位 ,按一定的次序加以串联连接 ,并全合成该融合基因。在毕氏酵母中进行分泌表达 ,并纯化表达产物。结果 :合成的基因在毕氏酵母中高水平分泌表达 ,产量达 1 g/L 以上。经离子交换和凝胶过滤 2步纯化过程 ,获得纯度在 95 %以上的重组蛋白。结论 :全合成的多表位融合抗原基因能在毕氏酵母中高水平分泌表达 ,并产生一种工艺简易的纯化方法。; 关键词恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因表达; Keywords Plasmodium falciparum pre erythrocytic multi epito pe antigen gene expression; 分类号 R382.31 [医药卫生—医学寄生虫学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬埃立克体多表位融合抗原蛋白的免疫学特性研究: 2; 作者李重阳孟庆玲乔军伍晔晖王立霞郭晶马帅才学鹏; 机构石河子大学动物科技学院中国农业科学院兰州兽医研究所; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2018年第12期11-19,共9页; 基金国家十三五重点研发计划子课题(2016YFD0501005) 兵团中青年科技创新领军人才计划项目(2016BC001); 文摘【目的】构建和制备具有较强抗原性的犬埃立克体(Ehrlichia canis)重组蛋白并研究其免疫学特性。【方法】利用ABCpred等在线软件预测分析犬埃立克体gp19、gp140和gp200等蛋白的优势线性抗原表位,构建多表位融合抗原基因E.canis-megp19及E.canis-megp-1,经PCR扩增后将其克隆至表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-32a(+)-E.canis-megp19和pET-32a(+)-E.canis-megp-1,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定正确后转化至感受态细胞大肠杆菌BL21 (DE3)中,优化表达条件(IPTG诱导浓度、温度及时间),表达重组蛋白后检测其免疫原性。【结果】成功构建并合成了多表位融合抗原基因E.canis-megp19和E.canis-megp-1,其PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶电泳后分别出现大小为414和429bp的片段;重组载体pET-32a(+)-E.canis-megp19和pET-32a(+)-E.canis-megp-1双酶切后得到了预期长度的目标片段;SDS-PAGE结果显示,当加入1.0mmol/L IPTG、37℃诱导8h后,E.canis-megp19及E.canis-megp-1重组蛋白均可大量表达,其分子质量分别为38和39ku;Western blot分析显示,该重组蛋白可被犬埃立克体阳性血清特异性识别,证实其具有良好的反应原性;小鼠免疫试验表明,该重组蛋白可诱导机体产生特异性抗体。【结论】制备的多表位融合重组蛋白能够高效地在大肠杆菌中表达且能够诱导机体产生特异性抗体。; 关键词犬埃立克体 gp19 gp140 gp200 多表位融合抗原基因; Keywords Ehrlichia canis gp19 gp140 gp200 multi- epitope fusion antigen gene; 分类号 S852.64 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名非洲猪瘟病毒多表位融合蛋白P72的构建、表达及免疫学特性研究被引量：5: 3; 作者郭晶李重阳孟庆玲乔军伍晔晖王立霞马帅才学鹏; 机构石河子大学动物科技学院中国农业科学院兰州兽医研究所; 出处《家畜生态学报》北大核心 2019年第6期60-65,共6页; 基金国家十三五重点研发计划子课题(2017YFD0502300) 兵团中青年科技创新领军人才计划(2016BC001); 文摘非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种烈性传染病,对中国猪养殖产业的发展存在巨大的潜在威胁。为了建立有效的检测手段来防控ASFV的流行,本试验以GenBank中ASFV基因组序列为基础,运用在线软件对ASFV结构蛋白P72的优势线性抗原表位进行预测分析,利用预测结果分析合成多表位融合基因P72 (MeP72)。再将MeP72经pMD19-T克隆后插入到原核表达载体pET-32a(+)中得到重组质粒pET-MeP72,双酶切验证在402 bp及5 000 bp以上有条带,证明重组质粒构建成功。转化重组质粒pET-MeP72至大肠杆菌感受态细胞E.coli BL21 (DE3),用IPTG诱导表达并优化诱导条件,分析重组蛋白反应原性。SDS-PAGE检测结果显示,MeP72重组蛋白的分子质量为30.74 kDa;Western blot分析显示MeP72重组蛋白可被ASFV阳性血清特异性识别,表明其反应原性良好;小鼠免疫试验证实MeP72蛋白可诱导机体产生特异性抗体,具有良好的免疫原性。研究表明MeP72重组蛋白可在大肠杆菌中高效表达,并诱导机体产生特异性抗体,为诊断抗原的研发奠定了前期基础。; 关键词非洲猪瘟病毒 MeP72 多表位融合抗原基因原核表达; Keywords African swine fever viral(ASFV) MeP72 multi-epitope fusion antigen gene prokaryotic expression; 分类号 S811.5 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于奶牛乳腺炎无乳链球菌rSip-PGK-FbsA融合蛋白的间接ELISA检测方法的建立被引量：2: 4; 作者吴金花布日额王金良陈金龙锡林高娃孙立杰王华王学理刘燕杜长智朝洛蒙于辰龙白文丽; 机构内蒙古民族大学生命科学学院内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所山东省滨州畜牧兽医研究院山东绿都生物科技有限公司; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期230-234,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31260600 31560689) 内蒙古民族大学与通辽市政府合作项目(SXYB2012086); 文摘为建立一种快速而准确的奶牛乳腺炎无乳链球菌抗体检测方法,本研究以原核表达并纯化的无乳链球菌的膜表面相关蛋白SIP、磷酸甘油激酶PGK及纤连蛋白FbsA 3种串联表达的融合蛋白rSip-PGK-FbsA为包被抗原,建立了检测奶牛无乳链球菌抗体的间接ELISA方法。该方法与化脓性链球菌阳性血清、大肠杆菌阳性血清、金黄色葡萄球菌阳性血清、表皮葡萄球菌阳性血清均无交叉反应,特异性良好;阳性血清稀释至1颐12 800仍检测为阳性,具有较高的敏感性;批内和批间试验变异系数均小于10%,重复性好。利用该方法与以SIP、PGK单一蛋白建立的ELISA方法对160份已知样品进行检测,结果显示,该方法的阳性符合率达到98.6%,高于SIP、PGK单一蛋白建立的ELISA方法的阳性符合率。对389份临床样品进行奶牛无乳链球菌抗体检测,其阳性检出率为46.53%。本研究建立的间接ELISA方法为奶牛无乳链球菌的快速检测提供了一种更加准确、可靠的血清学方法。; 关键词无乳链球菌多表位融合抗原rSip-PGK-FbsA 纯化 ELISA检测; Keywords Streptococcus agalactiae rSip-PGK-FbsA purification indirect ELISA; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因的构建及其高效表达	张青锋潘卫庆	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	犬埃立克体多表位融合抗原蛋白的免疫学特性研究	李重阳孟庆玲乔军伍晔晖王立霞郭晶马帅才学鹏	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	非洲猪瘟病毒多表位融合蛋白P72的构建、表达及免疫学特性研究	郭晶李重阳孟庆玲乔军伍晔晖王立霞马帅才学鹏	《家畜生态学报》北大核心	2019	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	基于奶牛乳腺炎无乳链球菌rSip-PGK-FbsA融合蛋白的间接ELISA检测方法的建立	吴金花布日额王金良陈金龙锡林高娃孙立杰王华王学理刘燕杜长智朝洛蒙于辰龙白文丽	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料