灰葡萄孢多药抗性菌株的筛选和鉴定 被引量：8

1

作者 胡伟群 朱卫刚 +1 位作者 张蕊蕊 陈杰 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期586-590,共5页

从浙江杭州市售草莓上分离得到83个灰葡萄孢菌株,测定了这些菌株对苯醚菌酯、多菌灵和异菌脲的敏感性,筛选出对这3种药剂同时产生了抗性的两个菌株HZ021和HZ054,其在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)平板上的菌丝生长和产孢量与敏感菌株相比无显... 从浙江杭州市售草莓上分离得到83个灰葡萄孢菌株,测定了这些菌株对苯醚菌酯、多菌灵和异菌脲的敏感性,筛选出对这3种药剂同时产生了抗性的两个菌株HZ021和HZ054,其在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)平板上的菌丝生长和产孢量与敏感菌株相比无显著差异,在黄瓜叶片上均表现出很强的致病力。结果表明,HZ021和HZ 054有很高的适合度。通过对抗性菌株中细胞色素b(CYT b)、双组份组氨酸激酶(OS-1)和β-微管蛋白(TUB 2)基因序列进行分析发现,HZ021和HZ054对多种药剂的抗性是由于其药剂靶标基因上的点突变所致。 展开更多

关键词 灰葡萄孢 苯醚菌酯(ZJ0712) 多菌灵 异菌脲 多药抗性

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HL-60多药抗性细胞抗HT诱导凋亡机制的研究 被引量：1

2

作者 程洪艳 李素文 +1 位作者 张鸿卿 薛绍白 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期102-107,共6页

用 1mg·L-1 三尖杉酯碱 (Harringtoning ,HT)处理人早幼粒急性白血病HL 6 0细胞2h ,诱导细胞出现明显的凋亡 (Apoptosis ,Apo)形态学和生化特征 ,包括染色质凝集、Caspase 3(天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶 3)活化、DNA断裂等 ... 用 1mg·L-1 三尖杉酯碱 (Harringtoning ,HT)处理人早幼粒急性白血病HL 6 0细胞2h ,诱导细胞出现明显的凋亡 (Apoptosis ,Apo)形态学和生化特征 ,包括染色质凝集、Caspase 3(天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶 3)活化、DNA断裂等 .来自HL 6 0的多药抗性细胞HR2 0和HT9抗HT诱导的凋亡 ,一般认为是P 糖蛋白 (P GP 170 )对药物的外排作用引起细胞对凋亡的抗性 .但用 2mg·L-1 CsA(CysclosporineA)逆转抗性细胞对药物的外排作用 ,1mg·L-1 HT作用 4 8h仍不能诱导HR2 0和HT9细胞凋亡 ,说明HR2 0和HT9多药抗性细胞抗HT诱导凋亡的机制不仅仅在于细胞膜上的P 糖蛋白对药物的外排作用 ,可能还有凋亡相关因子或其他因素参与作用 .Caspase 3是细胞凋亡通路中的一个中心环节 ,HR2 0和HT9抗HT诱导的Caspase 3活化 ,这可能是HR2 0和HT9不能凋亡的一个重要原因 . 展开更多

关键词 三尖杉酯碱 多药抗性 天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶-3 细胞凋亡 P-糖蛋白

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抗肿瘤细胞多药抗性基因MDR1和MRP1双靶位自剪切核酶的合成及其在体外活性研究 被引量：1

3

作者 徐东平 王福生 +1 位作者 Takao OHNUMA 金磊 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期429-435,共7页

多药耐药基因MDR1和 (或 )MRP1过度表达是引起肿瘤细胞对化疗药物产生多重耐药性的重要原因 .在以往研究抗MDR1基因的核酶 (196MDR1 Rz)的基础上 ,合成了针对MRP1基因 2 10和 730编码子的核酶 (2 10MRP1 Rz ,730MRP1 Rz) ,同时利用RNA... 多药耐药基因MDR1和 (或 )MRP1过度表达是引起肿瘤细胞对化疗药物产生多重耐药性的重要原因 .在以往研究抗MDR1基因的核酶 (196MDR1 Rz)的基础上 ,合成了针对MRP1基因 2 10和 730编码子的核酶 (2 10MRP1 Rz ,730MRP1 Rz) ,同时利用RNA二级结构分析程序mfold 3 0设计合成了一种双靶位自剪切核酶体系 (Coat) .将 196MDR1 Rz和 2 10MRP1 Rz基因同时载入到该体系中 ,建立了抗MDR1 MRP1双靶位核酶 .在无细胞体系中对上述核酶进行的生物活性实验表明 ,2 10MRP1 Rz与 730MRP1 Rz相比能够更有效地切割底物 ;载入Coat的抗MDR1和MRP1核酶均能得以有效释放 ,同时切割各自的靶RNA序列 ,切割效率与单靶位核酶一致 ; 展开更多

关键词 肿瘤细胞 多药抗性基因 MDR1 MRP1 双靶位自剪切核酶 合成 体外活性 化疗药物 耐药性

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用PCR方法定量检测多药抗性基因的表达 被引量：2

4

作者 汲言山 沈倍奋 +2 位作者 王文香 郭静竹 李锦云 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第3期326-330,共5页

肿瘤细胞对化疗药物的抗性是癌症有效化疗的主要障碍。人类细胞中多药抗性基因(MDR1)编码一种p-糖蛋白,后者功能是能量依赖的跨膜药物外输泵,可降低细胞毒药物在胞内的积累。定量分析MDR1表达水平可说明病人抗药能力的高低。本文应用PC... 肿瘤细胞对化疗药物的抗性是癌症有效化疗的主要障碍。人类细胞中多药抗性基因(MDR1)编码一种p-糖蛋白,后者功能是能量依赖的跨膜药物外输泵,可降低细胞毒药物在胞内的积累。定量分析MDR1表达水平可说明病人抗药能力的高低。本文应用PCR技术建立了灵敏度高、专一性好、可定量检测临床标本中MDR1表达水平的方法。对周血标本的初步检测表明:白血病化疗效果与MDR1表达水平的高低有关。 展开更多

关键词 多药抗性基因 聚合酶链反应 抗药性

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反义核酸对肿瘤细胞多药抗性的抑制——作用靶点及作用方式的研究

5

作者 钱江潮 魏东芝 张嗣良 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2000年第2期157-161,共5页

为了用反义寡聚 DNA调控抗阿霉素肿瘤细胞 KB- A- 1的多药抗性 ,对反义核酸的预期作用位点、作用方式和硫代化类似物进行了研究。筛选得到两段对应于翻译起始区 ( 3)和 P-糖蛋白ATP结合位点 ( 9)的 2 0聚反义片段 ,发现反义核酸的使用... 为了用反义寡聚 DNA调控抗阿霉素肿瘤细胞 KB- A- 1的多药抗性 ,对反义核酸的预期作用位点、作用方式和硫代化类似物进行了研究。筛选得到两段对应于翻译起始区 ( 3)和 P-糖蛋白ATP结合位点 ( 9)的 2 0聚反义片段 ,发现反义核酸的使用次数对结果的检测有很大影响 ,采用5μmol/L的反义片段 9连续处理 4d,实现了将近 50 %抑制效果 ,而其正义和错义链在 1 0 μmol/L浓度的同样处理条件下则没有检测到抑制效果。还表明硫代化反义核酸在没有助转染剂时效果不如天然片段。 展开更多

关键词 多药抗性 反义核酸 肿瘤细胞 化疗药物 抑制

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用流式细胞术研究PKC及VRP，CsA对多药抗性细胞的调制与逆转

6

作者 周卫东 张鸿卿 +1 位作者 方敏 薛绍白 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CSCD 1996年第1期129-133,共5页

利用流式细胞术检测抗药性细胞内Ｒｈｏ－１２３的荧光强度作为检测抗性细胞抗性程度的指标，研究了蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｈ７，肿瘤促进剂佛波酯（ＴＰＡ）对多药抗性细胞的调节；钙离子通道阻断剂维拉帕米（ＶＲＰ），免疫抑制... 利用流式细胞术检测抗药性细胞内Ｒｈｏ－１２３的荧光强度作为检测抗性细胞抗性程度的指标，研究了蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｈ７，肿瘤促进剂佛波酯（ＴＰＡ）对多药抗性细胞的调节；钙离子通道阻断剂维拉帕米（ＶＲＰ），免疫抑制剂（ＣｓＡ）对多药抗性的逆转作用．测定了抗性细胞细胞膜和胞浆ＰＫＣ活性水平，指出ＰＫＣ可能通过磷酸化细胞膜上的Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）来调节多药抗性细胞的抗性水平，并提供了一种筛选多药抗性逆转药物的简便方法． 展开更多

关键词 流式细胞术 多药抗性 蛋白激酶 VRP

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恶性疟原虫多药抗性蛋白pfMRP1研究新进展 被引量：1

7

作者 徐淑慧 杨照青 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期751-753,共3页

近几年在疟疾的治疗中，抗疟药抗药性的产生成为疟疾控制的最大难题，随着分子生物学技术的发展，从分子水平上研究恶性疟原虫的抗药性的产生取得了重大突破性进展，恶性疟原虫多药抗性蛋白声fMRPl（TheP．falciparumMultidrugResist—a... 近几年在疟疾的治疗中，抗疟药抗药性的产生成为疟疾控制的最大难题，随着分子生物学技术的发展，从分子水平上研究恶性疟原虫的抗药性的产生取得了重大突破性进展，恶性疟原虫多药抗性蛋白声fMRPl（TheP．falciparumMultidrugResist—anteProtein1）被认为是和多种药物抗性产生有关的ABC转运蛋白，与抗疟药抗性的产生有密切关系。 展开更多

关键词 ABC转运蛋白 恶性疟原虫 多药抗性 分子生物学技术 分子水平 药物抗性 抗药性 抗疟药

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灰葡萄孢多药抗性转运蛋白研究进展 被引量：3

8

作者 李志勇 高娜娜 崔志峰 《浙江农业科学》 2016年第9期1467-1471,共5页

灰葡萄孢多药抗性转运蛋白是导致其多药耐药性和抗真菌药物作用效果明显下降的主要原因。文章对灰葡萄孢中的ABC(ATP-binding cassette transporter,ABC)多药抗性转运蛋白和MFS(major facilitator superfamily,MFS)多药抗性转运蛋白的... 灰葡萄孢多药抗性转运蛋白是导致其多药耐药性和抗真菌药物作用效果明显下降的主要原因。文章对灰葡萄孢中的ABC(ATP-binding cassette transporter,ABC)多药抗性转运蛋白和MFS(major facilitator superfamily,MFS)多药抗性转运蛋白的种类、多药抗性及其调节剂的研究进展作一综述,为深入了解灰葡萄孢的多药抗性机制以及探讨克服多向耐药性的策略和提高药效提供参考。 展开更多

关键词 灰葡萄孢 多药抗性 ABC转运蛋白 MFS转运蛋白

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植物病原菌对杀菌剂多药抗性的发生现状 被引量：16

9

作者 宋佳露 程星凯 +1 位作者 刘鹏飞 刘西莉 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期28-33,65,共7页

近年来,随着杀菌剂在农作物病害田间防治中的大量使用,植物病原菌的多药抗性(multidrug resistance,MDR)现象发生越来越普遍。本文综述了在草坪币斑病、灰霉病、小麦叶枯病和苹果青霉病等病害防治中,病原菌对杀菌剂多药抗性发生的情况... 近年来,随着杀菌剂在农作物病害田间防治中的大量使用,植物病原菌的多药抗性(multidrug resistance,MDR)现象发生越来越普遍。本文综述了在草坪币斑病、灰霉病、小麦叶枯病和苹果青霉病等病害防治中,病原菌对杀菌剂多药抗性发生的情况。以及在紫外诱导和杀菌剂离体驯化下,致病疫霉Phytophthora infestans、立枯丝核菌Rhizoctonia solani、指状青霉Penicillium digitatum的多药抗性发生情况。分析了导致植物病原菌多药抗性产生的外排转运蛋白过表达、解毒酶代谢和靶标位点变化等相关机制,并在此基础上提出了多药抗性预防和治理的策略,以期为田间杀菌剂的高效利用,延缓药剂的抗性风险提供科学参考。 展开更多

关键词 植物病原菌 多药抗性 抗性机制 抗性治理

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MTT法测定人表皮癌细胞的抗药性 被引量：9

10

作者 钱江潮 魏东芝 +1 位作者 陈笑岚 张嗣良 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期103-106,共4页

在用ＭＴＴ测定细胞存活率以研究人表皮癌细胞ＫＢ－３－１ 及其抗阿霉素细胞株ＫＢ－Ａ－１对化疗药物阿霉素、长春花碱和秋水仙碱的多药抗性时，发现培养基中血清浓度的变化对ＭＴＴ法测定结果有影响。吸光值在血清浓度为ｗ ＝ ０．０... 在用ＭＴＴ测定细胞存活率以研究人表皮癌细胞ＫＢ－３－１ 及其抗阿霉素细胞株ＫＢ－Ａ－１对化疗药物阿霉素、长春花碱和秋水仙碱的多药抗性时，发现培养基中血清浓度的变化对ＭＴＴ法测定结果有影响。吸光值在血清浓度为ｗ ＝ ０．０２ 时最高，ｗ ＝ ０．３０ 时最低，ｗ ＝ ０．０５～０．２０ 之间波动不大。而不加血清使甲酉尤溶解困难而产生误差。培养基中的血清（常为ｗ ＝ ０．１０）不影响ＭＴＴ法的结果，在完全培养基中用ＭＴＴ法测定了两株细胞的抗药性。ＫＢ－Ａ－１ 对阿霉素、长春花碱和秋水仙碱的相对抗药性分别为ＫＢ－３－１ 的１７６、４５ 和１３７ 倍。ＭＴＴ法可简便地用于抗癌药物的筛选。 展开更多

关键词 MTT法 多药抗性 肿瘤 化疗药物

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抗阿霉素中国仓鼠卵巢上皮细胞的细胞骨架变化

11

作者 姜兵 张鸿卿 +1 位作者 王瑞虹 薛绍白 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1993年第1期141-142,共2页

肿瘤细胞对多种结构不同、作用靶位不同的抗癌药物的抗药性,是导致化疗失败的主要原因,国外对多药抗性的机理进行了大量的研究工作,但很少有抗药性与细胞骨架关系的报道。我们实验室用已建立的抗阿霉素(ADR)的中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO... 肿瘤细胞对多种结构不同、作用靶位不同的抗癌药物的抗药性,是导致化疗失败的主要原因,国外对多药抗性的机理进行了大量的研究工作,但很少有抗药性与细胞骨架关系的报道。我们实验室用已建立的抗阿霉素(ADR)的中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO)抗性模型(RC 1),运用荧光显微光度术,同时测定单细胞的DNA和聚合微管含量,DNA和F-微丝含量,发现RC 1聚合微管含量降低,F-微丝含量增加。 展开更多

关键词 肿瘤细胞 多药抗性 阿霉素 抗药性

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MDR现象及其相关单克隆抗体

12

作者 钱江潮 张元兴 周燕 《高技术通讯》 CAS CSCD 1995年第3期47-52,共6页

ＭＤＲ现象及其相关单克隆抗体钱江潮，张元兴，周燕（华东理工大学生化工程研究所上海２００２３７）细胞的多药抗性（ＭｕｌｔｉｄｒｕｇＲｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）现象广泛地存在于细菌、酵母以及哺乳动物细胞中。这种抗药性可... ＭＤＲ现象及其相关单克隆抗体钱江潮，张元兴，周燕（华东理工大学生化工程研究所上海２００２３７）细胞的多药抗性（ＭｕｌｔｉｄｒｕｇＲｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）现象广泛地存在于细菌、酵母以及哺乳动物细胞中。这种抗药性可能是内源性的，也可能是经诱导而产生... 展开更多

关键词 细胞多药抗性 单克隆抗体 抗药性

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一种针对mdr1基因的寡核苷酸-阿霉素偶联物 :对KB-A-1细胞的毒性及其抑制P-gp蛋白表达的效果(英文) 被引量：1

13

作者 詹晓云 任宇红 +3 位作者 张强 卢艳花 魏东芝 刘建文 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第4期403-410,共8页

目的 :癌细胞膜上P gp糖蛋白的过量表达是肿瘤多药抗性的主要机制。人体内编码P gp糖蛋白的基因中仅有mdr1涉及多药抗性。本研究中设计了针对mdr1的反义核酸与阿霉素的偶联物 ,并且对其细胞毒性进行了考察。同时对偶联物对人表皮癌细胞... 目的 :癌细胞膜上P gp糖蛋白的过量表达是肿瘤多药抗性的主要机制。人体内编码P gp糖蛋白的基因中仅有mdr1涉及多药抗性。本研究中设计了针对mdr1的反义核酸与阿霉素的偶联物 ,并且对其细胞毒性进行了考察。同时对偶联物对人表皮癌细胞株KB A 1内的P gp蛋白的表达也做了分子水平上的研究。方法 :使用MTT法考察偶联物对KB A 1细胞的毒性。用HPLC考察偶联物对细胞内阿霉素的积累量的影响。对于P gp蛋白表达的变化 ,主要是通过RT PCR及WesternBlot方法进行了研究。结果 :偶联物的细胞毒性比寡核苷酸高。在低剂量的偶联物 (0 .5 μmol·L-1)的作用下 ,细胞对阿霉素的敏感性提高。偶联物能有效的提高细胞内阿霉素的积累量。并且从RT PCR及WesternBlot看 ,偶联物处理后的细胞内P gp表达最少。结论 :选用合适的基团 ,对反义核酸进行结构修饰能够较好的增强反义核酸的性能。采用阿霉素作为偶联基团尽管增强了细胞毒性 ,但是在更大程度上增强了其抑制P gp蛋白的效力 ,提高了肿瘤耐药性的逆转倍数 ,具有一定的潜在应用价值。 展开更多

关键词 反义寡核苷酸 偶联物 细胞毒性 多药抗性 P-GP蛋白

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