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中国猪瘟C-株(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆
被引量:
8
1
作者
胡建和
刘湘涛
+4 位作者
张彦明
韩雪清
刘在新
张永国
谢庆阁
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期490-493,共4页
应用RT PCR、NestedPCR和Half nestedPCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C 株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18 T或pGEM TEasy载体后进行测序。运用T A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2...
应用RT PCR、NestedPCR和Half nestedPCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C 株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18 T或pGEM TEasy载体后进行测序。运用T A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2、F3、F4与F5、F6、F7分别克隆到pGEM 5Zf(+)载体后,得到两个半长cDNA亚克隆重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 4和pGEM 5Zf(+)/F5 7,再将两个半长cDNA重叠片段连接并克隆到pGEM 5Zf(+)载体,构建出了CSFVC 株全长cDNA重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 7。全长cDNA的成功构建为进一步研究CSFV分子生物学提供了良好的工具。
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关键词
中国
猪瘟
C-株
脾淋毒
CDNA
分子克隆
兔脾组织
RNA
克隆
多片段一步连接法
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职称材料
题名
中国猪瘟C-株(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆
被引量:
8
1
作者
胡建和
刘湘涛
张彦明
韩雪清
刘在新
张永国
谢庆阁
机构
中国农科院兰州兽医研究所
西北农林科技大学
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期490-493,共4页
基金
国家重点基础研究发展规划(G19990119)
文摘
应用RT PCR、NestedPCR和Half nestedPCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C 株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18 T或pGEM TEasy载体后进行测序。运用T A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2、F3、F4与F5、F6、F7分别克隆到pGEM 5Zf(+)载体后,得到两个半长cDNA亚克隆重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 4和pGEM 5Zf(+)/F5 7,再将两个半长cDNA重叠片段连接并克隆到pGEM 5Zf(+)载体,构建出了CSFVC 株全长cDNA重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 7。全长cDNA的成功构建为进一步研究CSFV分子生物学提供了良好的工具。
关键词
中国
猪瘟
C-株
脾淋毒
CDNA
分子克隆
兔脾组织
RNA
克隆
多片段一步连接法
Keywords
Classical Swine Fever Virus
C-strain
Full-length cDNA
Molecular cloning and construction
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
中国猪瘟C-株(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆
胡建和
刘湘涛
张彦明
韩雪清
刘在新
张永国
谢庆阁
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
8
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