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Mg^(2+)和Na^+对多核酶系统体外切割反应的影响(英文)
1
作者
田生礼
郑硕
+2 位作者
刘士德
徐东平
Takao OHNUMA
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期612-618,共7页
为了进一步了解2价Mg2+和1价Na+存在与否的情况下,多核酶系统对底物RNA的切割效率,构建了pGEM-Coat′A,pGEM-Coat′A196Rz质粒和pGEM-MDR1靶质粒.通过用SP6/T7转录试剂盒在体外转录RNA,在无细胞系统进行切割反应,反应产物通过6%变性聚...
为了进一步了解2价Mg2+和1价Na+存在与否的情况下,多核酶系统对底物RNA的切割效率,构建了pGEM-Coat′A,pGEM-Coat′A196Rz质粒和pGEM-MDR1靶质粒.通过用SP6/T7转录试剂盒在体外转录RNA,在无细胞系统进行切割反应,反应产物通过6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,干胶、X光片曝光自显影,利用ImageJ生物图像分析软件分析.结果表明,多核酶系统的切割效率依赖于二价Mg2+的浓度,切割产物随Mg2+浓度的增加而增加,而且具有反应时间的依赖性.在Na+浓度低于200mmol/L且单独存在时,没有切割产物生成.相反,在Na+和Mg2+共存时,表现出Na+抑制Mg2+诱导的切割活性,切割效率明显低于Mg2+单独存在时的结果.这些结果提示,在生理环境下,Mg2+对于多核酶系统对底物的切割反应是必需的,而Na+则不是.
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关键词
多核酶系统
MG^2+
NA^+
RNA切割
切割反应
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题名
Mg^(2+)和Na^+对多核酶系统体外切割反应的影响(英文)
1
作者
田生礼
郑硕
刘士德
徐东平
Takao OHNUMA
机构
深圳市微生物基因工程重点实验室
北京
Mount Sinai School of Medicine
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期612-618,共7页
基金
深圳市科技局项目支柱(20008)
T.J.Martell Foundation for AIDS,Leukemia and Cancer Research~~
文摘
为了进一步了解2价Mg2+和1价Na+存在与否的情况下,多核酶系统对底物RNA的切割效率,构建了pGEM-Coat′A,pGEM-Coat′A196Rz质粒和pGEM-MDR1靶质粒.通过用SP6/T7转录试剂盒在体外转录RNA,在无细胞系统进行切割反应,反应产物通过6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,干胶、X光片曝光自显影,利用ImageJ生物图像分析软件分析.结果表明,多核酶系统的切割效率依赖于二价Mg2+的浓度,切割产物随Mg2+浓度的增加而增加,而且具有反应时间的依赖性.在Na+浓度低于200mmol/L且单独存在时,没有切割产物生成.相反,在Na+和Mg2+共存时,表现出Na+抑制Mg2+诱导的切割活性,切割效率明显低于Mg2+单独存在时的结果.这些结果提示,在生理环境下,Mg2+对于多核酶系统对底物的切割反应是必需的,而Na+则不是.
关键词
多核酶系统
MG^2+
NA^+
RNA切割
切割反应
Keywords
multiribozyme system
divalent Mg^2＋
monovalent Na^＋
RNA cleavage
cleavage reaction
分类号
Q527 [生物学—生物化学]
Q752 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
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被引量
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1
Mg^(2+)和Na^+对多核酶系统体外切割反应的影响(英文)
田生礼
郑硕
刘士德
徐东平
Takao OHNUMA
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
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