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兔源支气管败血波氏杆菌荧光定量PCR检测方法的建立
1
作者 苏进博 王锦祥 殷光文 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2025年第1期110-116,共7页
【目的】建立兔源支气管败血波氏杆菌(Bb)的快速检测方法,用于兔波氏杆菌病的诊断。【方法】以Bb的fimX基因为靶基因,设计特异性引物并构建质粒标准品。在此基础上建立检测兔源Bb的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,对该方法的特异性、敏感... 【目的】建立兔源支气管败血波氏杆菌(Bb)的快速检测方法,用于兔波氏杆菌病的诊断。【方法】以Bb的fimX基因为靶基因,设计特异性引物并构建质粒标准品。在此基础上建立检测兔源Bb的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评价,并将该方法初步应用于临床样品的检测。【结果】荧光定量PCR方法仅对兔源Bb的检测结果呈阳性,对其他常见兔源病原菌的检测结果均呈阴性;对质粒标准品的最低检测限为13.8拷贝·μL^(-1),敏感性是普通PCR方法的10倍;批内重复性试验的变异系数小于2%,批间重复性试验的变异系数小于3%;对68份临床样品进行检测,阳性检出率为39.71%,比普通PCR方法的高2.95%。【结论】建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,且对临床样品的阳性检出率比普通PCR方法高,为兔源Bb的快速检测和防控提供了技术支持。 展开更多
关键词 兔 兔波氏杆菌病 支气管败血波氏杆菌 荧光定量PCR方法 检出率
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犬支气管败血波氏杆菌的诊断与防治研究进展
2
作者 朱骞 《中国工作犬业》 2025年第10期51-52,共2页
犬传染性呼吸道综合征(CIRDC),俗称犬窝咳,是一种由多种病原引发的急性传染性呼吸道疾病。犬支气管败血波氏杆菌(Bb)是主要病原之一。Bb引起CIRDC,主要特征是气管和支气管的黏膜充血和黏液样或黏液脓性外分泌物,还可能发现渗出性肺炎的... 犬传染性呼吸道综合征(CIRDC),俗称犬窝咳,是一种由多种病原引发的急性传染性呼吸道疾病。犬支气管败血波氏杆菌(Bb)是主要病原之一。Bb引起CIRDC,主要特征是气管和支气管的黏膜充血和黏液样或黏液脓性外分泌物,还可能发现渗出性肺炎的斑片状区域,以及胸膜表面的斑点和出血。大多数病犬的组织学检查显示为气管支气管炎。 展开更多
关键词 犬传染性呼吸道综合征 犬支气管败血波氏杆菌
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藏猪多杀性巴氏杆菌、肺炎支原体、支气管败血波氏杆菌和传染性胸膜肺炎放线杆菌四重PCR方法的建立与初步应用
3
作者 肖晨冬 潘瑶 +4 位作者 陈亭宇 王艳琼 赵红燕 陈和强 赵晓刚 《甘肃畜牧兽医》 2024年第6期83-88,共6页
为了迅速、高效检测引起藏猪呼吸道疾病的4种主要病原菌,本研究选择猪多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)的kmt 1基因、猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mh)的P36ldh基因、猪支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptic... 为了迅速、高效检测引起藏猪呼吸道疾病的4种主要病原菌,本研究选择猪多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)的kmt 1基因、猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mh)的P36ldh基因、猪支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)的DNT基因和猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)的apxIV基因为靶标,设计4组特异性引物,建立灵敏、特异、可同时检测Pm、Mh、Bb和App的四重PCR检测方法,并初步用于调查甘孜州乡城县这4种细菌的流行情况。结果显示:该方法特异性强,不与猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪伪狂犬病毒等9种病原的DNA/RNA反应;敏感性高,Pm、Mh、Bb和App的最低检测量分别为3.13×10^(3)、1.95×10^(3)、4.32×10^(4)和2.45×10^(4);重复性好,批内的试验、批间的试验结果都一致;临床检测显示,Pm、Mh、Bb和App阳性率分别为25.86%(45/174)、29.89%(52/174)、19.54%(34/174)、25.29%(44/174),与已报道的检测方法一致,符合率达100%。因此,本研究建立的四重PCR方法具有迅速、高效、敏感性高、特异性强的优点,对临床防控藏猪细菌性呼吸道疾病及进行流行病学调查具有重要意义。 展开更多
关键词 猪多杀性巴氏杆菌 猪肺炎支原体 猪支气管败血波氏杆菌 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 四重PCR
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家兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因检测 被引量：1
4
作者 曹洪志 李成贤 +2 位作者 彭茜翎 其美拉姆 史纪强 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第5期70-76,共7页
为深入了解兔支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),试验将病兔体内分离得到的菌株进行菌株鉴定、生长曲线测定、致病性研究、药敏试验及耐药基因检测,期望了解该菌的生长规律,为临床用药及防控奠定基础。通过Gram染色镜... 为深入了解兔支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),试验将病兔体内分离得到的菌株进行菌株鉴定、生长曲线测定、致病性研究、药敏试验及耐药基因检测,期望了解该菌的生长规律,为临床用药及防控奠定基础。通过Gram染色镜检、分离培养、16S rDNA序列分析对分离菌株进行鉴定,测定了该分离株的生长曲线、半数致死量、耐药性并对分离菌株进行β-内酰胺酶耐药基因的检测。结果表明:分离得到1株革兰氏阴性杆菌,命名为P201215,该分离株的16S rDNA基因序列与GenBank中支气管败血波氏杆菌(登录号为NR113628.1)的同源性为99%。分离株的对数生长期为2~9 h,9 h后进入平台期;对KM小鼠的半数致死量为1.19×107 CFU。药敏试验结果显示,分离株对部分头孢菌素类药物耐药,对大部分β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类及氨基糖苷类药物敏感,PCR检测未检出超广谱β-内酰胺酶耐药基因。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 分离鉴定 生长曲线 半数致死量 超广谱Β-内酰胺酶
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兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌复合PCR方法的建立及临床应用 被引量：11
5
作者 范志宇 魏后军 +5 位作者 胡波 宋艳华 王芳 薛家宾 徐为中 苏国清 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期376-381,共6页
根据Gen Bank中多杀性巴氏杆菌ATP合成酶基因(atp B)的保守序列设计特异性引物,建立巴氏杆菌PCR检测方法,并与已建立的支气管败血波氏杆菌PCR检测方法进行合并,经反应条件的优化,成功建立多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌复合PCR诊... 根据Gen Bank中多杀性巴氏杆菌ATP合成酶基因(atp B)的保守序列设计特异性引物,建立巴氏杆菌PCR检测方法,并与已建立的支气管败血波氏杆菌PCR检测方法进行合并,经反应条件的优化,成功建立多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌复合PCR诊断方法。该方法检出的最小多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌菌数分别为40 CFU和4 CFU;对兔源产气荚膜梭菌、大肠杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪鼻支原体、链球菌的检测结果均为阴性,说明该方法具有良好的特异性。用该方法对中国4个省份采集的临床鼻拭子样本共712份进行检测,结果显示,多杀性巴氏杆菌阳性率为25.56%,支气管败血波氏杆菌阳性率为34.55%,双阳性率为13.20%。该复合PCR方法能快速、敏感地从家兔鼻拭子样品中检出多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌,为临床疾病检测和流行病学调查提供了技术保障。 展开更多
关键词 兔支气管败血波氏杆菌 多杀性巴氏杆菌 复合PCR
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犬源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定和全基因组测序分析
6
作者 李雅卓 颜亚松 +2 位作者 王昊 孔令聪 马红霞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第11期24-31,共8页
为明确致犬严重呼吸道症状的病原菌及其病原特征,本试验采集患有严重呼吸道症状病死犬肺脏脓包样本,通过病原菌的分离纯化和形态学观察、生化试验、16S rRNA基因测序鉴定、生长曲线绘制对分离菌株进行种属鉴定;通过微量肉汤稀释法检测... 为明确致犬严重呼吸道症状的病原菌及其病原特征,本试验采集患有严重呼吸道症状病死犬肺脏脓包样本,通过病原菌的分离纯化和形态学观察、生化试验、16S rRNA基因测序鉴定、生长曲线绘制对分离菌株进行种属鉴定;通过微量肉汤稀释法检测分离菌株的药物敏感性;通过溶血试验和小鼠感染试验检测分离菌株的致病性;通过全基因组测序分析分离菌株基因环境。结果显示,本试验分离菌株为支气管败血波氏杆菌,命名为Z2。药敏试验结果显示,分离菌株Z2对头孢曲松、头孢喹肟、链霉素和替米考星耐药,对恩诺沙星、多西环素和氟苯尼考等11种药物敏感。该分离菌株具有一定的溶血活性,对小鼠的半数致死量(LD50)为5.01×10^(5)CFU/mL。该分离菌株全基因组大小为5257583 bp,含有4887个基因;仅携带3个耐药基因,介导其对磺胺类和氨基糖苷类药物耐药,但未检测到β-内酰胺类耐药基因;共有1169个致病性相关基因,其中粘附性毒力基因最多,包括细胞间粘附蛋白、百日咳粘附素、菌毛、鞭毛和被膜等毒力基因。结果表明,分离菌株Z2具有较高的耐药性和致病性。本试验结果为支气管败血波氏杆菌的致病性研究提供了一定的参考价值。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 分离鉴定 耐药性分析 全基因组测序
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犬支气管败血波氏杆菌的分离鉴定和灭活疫苗初步应用
7
作者 王潘龙 赵悦 +10 位作者 孙强 周昊 尹月 曲雪婷 原昆鹏 栾庆东 陈淑贞 卢艳敬 臧立玉 韩海峰 尹燕博 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期41-48,共8页
某实验比格犬养殖场部分犬出现咳喘和口鼻流血等症状,严重者死亡。为了调查发病原因并采取针对性措施,本试验采集临床发病犬的鼻腔拭子、死亡犬的肺脏和气管分泌物等,进行细菌分离培养;通过形态观察、革兰染色、16S rRNA和ptxA基因测序... 某实验比格犬养殖场部分犬出现咳喘和口鼻流血等症状,严重者死亡。为了调查发病原因并采取针对性措施,本试验采集临床发病犬的鼻腔拭子、死亡犬的肺脏和气管分泌物等,进行细菌分离培养;通过形态观察、革兰染色、16S rRNA和ptxA基因测序,对分离细菌进行鉴定,并对部分菌株进行药敏试验。选取1株致病性强的分离菌株制备支气管败血波氏杆菌蜂胶佐剂灭活疫苗,进行免疫保护试验,分别采用1.0和0.5 mL剂量免疫小鼠,免疫后21 d攻毒;对养殖场临床发病犬和同群健康犬进行紧急免疫接种,剂量为4月龄以上犬每只1.0 mL、2~4月龄犬每只0.5 mL。对临床病死犬和攻毒死亡小鼠进行组织病理学观察。结果显示,从临床发病犬的鼻腔拭子、肺脏、气管和鼻腔黏液状分泌物共分离鉴定获得30株支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果显示,临床分离菌株对环丙沙星和米诺环素高度敏感,但临床治疗效果不明显。免疫保护试验中,1.0 mL和0.5 mL蜂胶佐剂灭活疫苗对小鼠的保护率均可达100%;紧急免疫接种后,临床发病犬逐渐恢复,同群健康犬无新发病个体,疫苗免疫效果良好。组织病理学观察发现,临床病死犬和攻毒死亡小鼠均表现典型的支气管肺炎和肺气肿病变,肝细胞呈水泡样变。结果表明,支气管败血波氏杆菌是导致该场部分犬出现呼吸道疾病的病原体,蜂胶灭活疫苗可有效防控实验用比格犬支气管败血波氏杆菌感染。 展开更多
关键词 比格犬 支气管败血波氏杆菌 16S rRNA 组织病理学观察 蜂胶佐剂灭活疫苗
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兔支气管败血波氏杆菌病及其防治措施 被引量：1
8
作者 孟凡勇 《中国畜牧业》 2024年第6期85-86,共2页
兔支气管败血波氏杆菌病是家兔养殖业中常见的呼吸道性传染病,临床表现为严重的鼻炎、咳嗽、流涕、支气管肺炎和败血症,影响仔兔的成活率和生长速度。养殖者可通过加强日常饲养管理、降低刺激因素、强化生物安全防控、接种支气管败血波... 兔支气管败血波氏杆菌病是家兔养殖业中常见的呼吸道性传染病,临床表现为严重的鼻炎、咳嗽、流涕、支气管肺炎和败血症,影响仔兔的成活率和生长速度。养殖者可通过加强日常饲养管理、降低刺激因素、强化生物安全防控、接种支气管败血波氏杆菌灭活苗或兔波氏杆菌与巴氏杆菌二联苗等进行预防。对于发病兔需隔离并进行及时治疗,以降低发病率,推动兔养殖业健康发展。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 日常饲养管理 支气管肺炎 二联苗 巴氏杆菌 及时治疗 仔兔 生物安全防控
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猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立 被引量：8
9
作者 袁翠霞 罗阿东 +5 位作者 徐景峨 唐源 李建华 文明 李永明 周碧君 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期896-899,共4页
对表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离得到的34株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),采用针对Bb flagellum gene的一对引物进行PCR扩增,结果所有分离物均能扩增出237bp特异性DNA条带,与传统生化鉴定结果相一致,且其... 对表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离得到的34株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),采用针对Bb flagellum gene的一对引物进行PCR扩增,结果所有分离物均能扩增出237bp特异性DNA条带,与传统生化鉴定结果相一致,且其最小检出量为0.64pg;而猪鼻腔和肺组织中常见的多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌及大肠埃希氏菌均未能出现任何DNA条带。这表明,本试验建立的PCR方法具有特异性强、灵敏度高、可靠性好等特点,可用于猪萎缩性鼻炎的临床诊断。 展开更多
关键词 猪萎缩性鼻炎 支气管败血波氏杆菌 PCR方法 检测
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兔源支气管败血波氏杆菌和肺炎克雷伯菌的分离鉴定及其对抗菌药物的敏感性分析 被引量：17
10
作者 张自强 王佳佳 +3 位作者 任玉莹 朱慧杰 张倩文 刘玉梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2254-2264,共11页
兔感染支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)后,常引起兔多发性呼吸道疾病,严重危害家兔养殖业。作者剖检河南省某兔场疑似病死兔,并采集组织分离鉴定病原菌,然后进行药敏试验,以期确... 兔感染支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)后,常引起兔多发性呼吸道疾病,严重危害家兔养殖业。作者剖检河南省某兔场疑似病死兔,并采集组织分离鉴定病原菌,然后进行药敏试验,以期确定引起兔呼吸困难、腹泻的病原。结果显示,经细菌分离培养得到1株革兰阴性、两端钝圆的小杆状可疑致病菌及1株革兰阴性、卵圆形的可疑致病菌;其16S rRNA基因序列扩增片段大小分别为1492和1494 bp,与B.bronchiseptica AU 12671和K.pneumoniae菌株F5feb.57相似性分别为99.85%和100.00%,即该兔场患病兔为B.bronchiseptica和K.pneumoniae混合感染。药敏试验结果显示所分离的B.bronchiseptica和K.pneumoniae同时对庆大霉素、头孢曲松、头孢唑啉3种药物敏感,对其他药物有不同程度的耐药性。综上表明,此次分离的细菌为B.bronchiseptica和K.pneumoniae,本试验为家兔B.bronchiseptica和K.pneumoniae混合感染的分离鉴定及科学用药提供参考。 展开更多
关键词 兔 支气管败血波氏杆菌 肺炎克雷伯菌 腹泻 呼吸道疾病 耐药性
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呼吸道综合征的猪肺中支气管败血波氏杆菌的分离、鉴定及特性分析 被引量：8
11
作者 张彦兵 黎倩倩 +7 位作者 石元元 魏建超 李蓓蓓 刘珂 邵东华 马志永 孙延鸣 邱亚峰 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第2期61-65,共5页
临床上猪呼吸道综合征(porcine respiratory disease complex,PRDC)大多为多种病原微生物共感染所致,支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)为PRDC的常见病原,但其在PRDC发生中的作用还不十分清楚。为了研究Bb在PRDC中的作... 临床上猪呼吸道综合征(porcine respiratory disease complex,PRDC)大多为多种病原微生物共感染所致,支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)为PRDC的常见病原,但其在PRDC发生中的作用还不十分清楚。为了研究Bb在PRDC中的作用,本研究聚焦于PRDC的猪肺中Bb的分离、鉴定及特性分析。首先,利用16S rRNA基因序列对分离的细菌进行鉴定,结果从15头已鉴定为PRDC的猪肺中共获得5株Bb分离菌株。随后,对Bb相关毒力因子包括皮肤坏死毒素(dermonecrotic toxin,DNT)、百日咳杆菌粘附素(bordetellaad hesin,PRN)以及鞭毛蛋白(flagellin,fla B)进行PCR鉴定,结果发现所有分离株上述毒力因子都为阳性。最后,对Bb分离株进行18种抗生素的药敏实验,发现所有分离株对阿莫西林、头孢噻呋、链霉素、氨苄西林等8种药物高度耐药,而对卡那霉素、美罗培南以及庆大霉素高度敏感;此外,部分菌株对红霉素、氟苯尼考、强力霉素以及阿米卡星耐药。总之,本研究从PRDC的猪肺中分离到5株支气管败血波氏杆菌,这些分离株显示出不同的耐药特性,同时,分离株含有的与毒力相关的毒力因子,暗示了其致病特性。 展开更多
关键词 猪呼吸道综合征 支气管败血波氏杆菌 16S rRAN 毒力因子 耐药性
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兔支气管败血波氏杆菌PRN基因缺失突变株的构建及特性研究 被引量：5
12
作者 李洪广 王芳 +2 位作者 姜平 范志宇 胡波 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期299-305,共7页
利用自杀性质粒构建兔支气管败血波氏杆菌百日咳黏附素(PRN)缺失突变株以研究PRN在支气管败血波氏杆菌(Bb)致病机理中的作用,同时为支气管败血波氏杆菌病减毒活疫苗的研究提供理论依据。PCR扩增出PRN1(PRN上游基因)和PRN2(PRN下游基因)... 利用自杀性质粒构建兔支气管败血波氏杆菌百日咳黏附素(PRN)缺失突变株以研究PRN在支气管败血波氏杆菌(Bb)致病机理中的作用,同时为支气管败血波氏杆菌病减毒活疫苗的研究提供理论依据。PCR扩增出PRN1(PRN上游基因)和PRN2(PRN下游基因)2个目的基因片段,运用基因重组技术将庆大霉素抗性基因(GM)连接到PRN1和PRN2之间,将连接好的基因片段克隆到pMEG-375自杀性载体中,构建自杀性载体pMEG375-PRN1-GM-PRN2,将其转化到宿主菌SM-10中,通过宿主菌SM-10与受体菌Bb固相滤膜交配,自杀性载体转移到受体菌,根据同源重组原理,抗性筛选得到基因缺失突变株,命名为Bb(△PRN)。对突变株Bb(△PRN)与野生株WT进行了遗传稳定性、生长特性、溶血特性、细胞黏附特性、毒力、免疫保护性等比较研究。结果表明:Bb(△PRN)具有遗传稳定性;与野生株相比,突变株生长速度较慢,毒力有所下降,溶血活性及对Hep-2细胞的黏附能力没有明显变化;小鼠免疫原性试验结果显示,突变株免疫小鼠后可以产生强有力的免疫力,能够抵抗野生株的攻击。Bb(△PRN)突变株构建成功并具有良好的免疫原性,为支气管败血波氏杆菌病减毒活疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 兔 支气管败血波氏杆菌 百日咳杆菌黏附素 基因缺失 生物学特性 免疫原性
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支气管败血波氏杆菌dnt基因的克隆、表达及活性鉴定 被引量：3
13
作者 赵战勤 薛云 +3 位作者 裴洁 王臣 丁轲 程相朝 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第11期112-115,共4页
通过PCR扩增获得支气管败血波氏杆菌的全长4 395 bpdnt基因,并利用pET-28a/BL21系统对其进行了融合表达。Western-blot检测结果表明,表达产物具有良好的免疫学活性。使用His-band purification kit纯化后,得到纯度为93.2%的融合蛋白HIS6... 通过PCR扩增获得支气管败血波氏杆菌的全长4 395 bpdnt基因,并利用pET-28a/BL21系统对其进行了融合表达。Western-blot检测结果表明,表达产物具有良好的免疫学活性。使用His-band purification kit纯化后,得到纯度为93.2%的融合蛋白HIS6-DNT。在乳鼠皮肤坏死试验中,表达产物HIS6-DNT和天然DNT均能导致乳鼠皮肤产生坏死性病变。在乳鼠皮肤坏死阻断试验中,兔抗HIS6-DNT血清能中和天然DNT,使其失去对乳鼠皮肤的坏死毒性。试验结果表明,重组蛋白具有天然DNT的生物学毒性和免疫原性,所产生的抗体具有中和活性,为DNT的结构和功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 皮肤坏死毒素 dnt基因 表达
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支气管败血波氏杆菌PRN黏附素R1区蛋白的免疫原性 被引量：2
14
作者 吴庭才 赵战勤 +4 位作者 王臣 张春杰 吴斌 程相朝 何启盖 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1370-1375,共6页
百日咳杆菌黏附素(PRN)是支气管败血波氏杆菌最重要的保护性抗原。为研究PRN的R1区多肽的免疫原性,分别将prn基因的全长编码区2 040 bp及5′端1 173 bp的片段(prnR1)克隆到原核表达载体pGEX-KG,经IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了表达。SDS... 百日咳杆菌黏附素(PRN)是支气管败血波氏杆菌最重要的保护性抗原。为研究PRN的R1区多肽的免疫原性,分别将prn基因的全长编码区2 040 bp及5′端1 173 bp的片段(prnR1)克隆到原核表达载体pGEX-KG,经IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了表达。SDS-PAGE和Western blot检测证实2种表达产物GST-R1和GST-PRN均具有良好的免疫学反应活性。在主动免疫保护试验中,GST-R1和GST-PRN免疫组小鼠均能产生较高的PRN抗体水平;当使用3 LD50的Bb强毒株HH0809进行鼻腔攻毒后,其保护率均为100%(9/9);当使用10 LD50HH0809攻毒时,其保护率分别为33.3%(3/9)和77.8%(7/9)。在被动免疫保护试验中,腹腔免疫GST-R1和GST-PRN兔抗血清均能100%(10/10)保护小鼠抵抗10 LD50HH0809的腹腔攻击,但经PRN吸附后的2种兔抗血清均失去了保护力(0/5)。这些研究结果表明,重组PRN的N端R1区多肽具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 百日咳杆菌黏附素 免疫原性
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猪肺炎支原体与猪支气管败血波氏杆菌在猪体液免疫和生长性能上的协同作用 被引量：3
15
作者 邓均华 熊焰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期223-226,共4页
试验选用10日龄成华×大约克杂交猪36头,随机分成四组(1、2、3、4),每组9头。其中1、2组用猪肺炎支原体全菌抗原免疫后再分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒,3、4组注射生理盐水作为对照,并与前两组同时分别用猪肺... 试验选用10日龄成华×大约克杂交猪36头,随机分成四组(1、2、3、4),每组9头。其中1、2组用猪肺炎支原体全菌抗原免疫后再分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒,3、4组注射生理盐水作为对照,并与前两组同时分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒。采用间接ELISA、组织切片等方法对猪血清中的抗体水平、肺脏的病理变化及生长性能进行测定。试验表明:用猪肺炎支原体全菌抗原接种猪后,在血清中能检测到较高的抗体水平(25)。猪肺炎支原体攻毒后2周,免疫猪和对照猪血清中猪肺炎支原体抗体的滴度分别为23.8与22.4(P<0.05),且免疫猪的生长性能比对照猪好。在猪支气管败血波氏杆菌攻毒组,攻毒2周和4周后免疫猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体水平与对照猪相比分别提高了26.67%和30.00%(P>0.05),6周后免疫猪和对照猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体分别为21.7和20.3(P<0.05),且在攻毒后4～6周,免疫猪的生长性能有了显著的改善。组织切片显示,无论是用猪肺炎支原体攻毒还是用猪支气管败血波氏杆菌攻毒,免疫猪的肺脏病变程度都较对照猪轻。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 猪支气管败血波氏杆菌 体液免疫 生长性能
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四川地区动物源支气管败血波氏杆菌多重耐药性调查研究 被引量：1
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作者 徐昌文 刘宁 +5 位作者 文斌 张凯 余志菊 简文素 傅祥超 刘汉中 《草学》 2021年第5期67-72,79,共7页
本研究旨在揭示四川地区动物源支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bbs)流行分布情况,表征其多重耐药特性,指导临床用药,并延缓Bbs耐药性出现。采用K-B纸片琼脂法分析,检测2018~2020年分离自四川省多个地区的178株Bbs对17种... 本研究旨在揭示四川地区动物源支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bbs)流行分布情况,表征其多重耐药特性,指导临床用药,并延缓Bbs耐药性出现。采用K-B纸片琼脂法分析,检测2018~2020年分离自四川省多个地区的178株Bbs对17种常用抗生素耐药性,分析Bbs多重耐药表型特征。结果显示:Bbs对17种抗生素耐药率介于0~81.46%,其中氟苯尼考、阿莫西林克拉维酸钾、头孢哌酮舒巴坦、粘菌素4种药物均表现为敏感,利福平(75.84%)、呋喃妥因(75.84%)、氨曲南(70.79%)、厄他培南(70.79%)、四环素(67.98%)、复方新诺明(67.98%)、庆大霉素(67.98%)、阿米卡星(67.98%)耐药率较高,头孢他啶(81.46%)、头孢西丁(81.46%)耐药率最高;178株Bbs可分为6种耐药表型,其中多重耐药有4种表型,多重耐药率达75.84%。因此,四川地区Bbs对部分常用药物耐药较为严重,且多数菌株呈多重耐药。 展开更多
关键词 动物源 支气管败血波氏杆菌(Bbs) 多重耐药性 四川省
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犬源性支气管败血波氏杆菌生物学特性的初步研究 被引量：2
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作者 哈利 张梅 《畜牧兽医科技信息》 2005年第10期47-48,共2页
关键词 支气管败血波氏杆菌 病犬 生物特性 猪传染性萎缩性鼻炎 呼吸道疾病 治疗效果 波氏杆菌病 生物学特性 五联疫苗
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兔病毒性出血症并发支气管败血波氏杆菌病的诊治 被引量：1
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作者 王自然 《中国草食动物》 2004年第4期33-34,共2页
关键词 兔 病毒性出血症 支气管败血波氏杆菌病 并发症 症状 病理剖检 诊断 防制
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猪支气管败血波氏杆菌的鉴定和生物学特性
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作者 马有智 徐海圣 李双茂 《浙江农业科学》 2013年第8期1040-1042,共3页
从某猪场呼吸道症状严重的发病猪病料中分离到4株细菌,经形态和培养特征、生化试验、小鼠致病性试验和PCR方法鉴定为猪支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果显示,4株分离菌对阿米卡星、卡那霉素、妥布霉素、氧呱嗪青霉素、环丙沙星、氟派... 从某猪场呼吸道症状严重的发病猪病料中分离到4株细菌,经形态和培养特征、生化试验、小鼠致病性试验和PCR方法鉴定为猪支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果显示,4株分离菌对阿米卡星、卡那霉素、妥布霉素、氧呱嗪青霉素、环丙沙星、氟派酸等敏感,对新霉素、红霉素、壮观霉素、复方新诺明、四环素等不敏感,对小白鼠致病性强弱不一,生物被膜的形成能力不同。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 生物被膜 药敏
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猪源支气管败血波氏杆菌对庆大霉素异质性耐药的研究 被引量：2
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作者 樊浩然 高树基 +5 位作者 王海堃 袁朔 张小玲 赵战勤 张慧 汪洋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期801-806,共6页
为分析临床分离的52株猪源支气管败血波氏杆菌(Bb)在纸片扩散法(K-B)药敏试验中出现的庆大霉素(GEN)异质性耐药(HR)情况,本研究采用微量肉汤稀释法检测52株Bb分离株对GEN的最小抑菌浓度(MIC);采用K-B法检测分离株对GEN的敏感性;通过观... 为分析临床分离的52株猪源支气管败血波氏杆菌(Bb)在纸片扩散法(K-B)药敏试验中出现的庆大霉素(GEN)异质性耐药(HR)情况,本研究采用微量肉汤稀释法检测52株Bb分离株对GEN的最小抑菌浓度(MIC);采用K-B法检测分离株对GEN的敏感性;通过观察抑菌环内是否有菌落初步筛选疑似GEN HR菌株;采用菌落谱性分析法(PAP)测定初筛菌株的MIC与最大不抑菌浓度(MNIC)的比值,以及耐药亚群菌株的发生频率,验证初筛的HR菌株。结果显示:52株猪源Bb对GEN耐药的菌株占13.46%(7/52),多数分离株的MIC值为2μg/mL~8μg/mL,对GEN表现为敏感或中介,占全部菌株的86.54%(45/52),其中Bb48株的MIC为2μg/mL,抑菌环直径为16 mm属于GEN敏感菌株。通过观察纸片法药敏试验中的抑菌环内是否存在菌落,初步筛选对GEN HR的菌株。结果显示,有7株疑似HR菌株;PAP试验结果显示,6株疑似HR菌株的MIC/MNIC比值均小于8,为假阳性HR菌株,只有Bb48株的MIC/MNIC值为16且耐药亚群发生频率为1.3×10^(-6),按照标准判定其为GEN HR Bb菌株。从PAP试验验证的Bb48株中有菌落生长的最高浓度GEN平板上随机挑3株耐药亚群菌株,37℃培养12 h,每小时测一次菌落数,共测12 h连同Bb48株一起绘制生长曲线;将上述试验选取的3株耐药亚群菌株连续传50代,每5代测其MIC值判定耐药亚群菌株的耐药遗传稳定性。生长曲线结果显示Bb48株及其耐药亚群菌株的生长速率均无显著差异(P>0.05);耐药遗传稳定性试验结果显示,将Bb48株中的3株耐药亚群菌株传代,其中两株菌各代次的MIC均为32μg/mL,1株菌的MIC为8μg/mL~32μg/mL。表明耐药亚群菌株对GEN的耐药性能够有效遗传。上述结果表明,52株猪源Bb中的Bb48为GEN HR菌株,Bb48及其耐药亚群菌株的生长速率基本一致,且对GEN的耐药性能够稳定遗传。本研究首次得到了罕见的对GEN HR的Bb菌株,提示临床中应合理使用GEN,并监测HR菌株的出现,对临床使用GEN治疗猪源Bb感染具有重要指导意义。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 庆大霉素 异质性耐药 临床治疗
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