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PKD2在骨髓间充质干细胞成脂分化过程中的表达变化及作用
被引量：
2
1
作者
单丽英
吴晓文
+3 位作者
师晓丽
朱恩东
袁海瑞
王宝利
《山东医药》
CAS
2021年第14期1-5,共5页
目的观察多囊肾致病基因2(PKD2)在骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化过程中的表达变化及作用。方法培养骨髓间充质干细胞株ST2并进行成脂分化诱导,采用qRT-PCR法分别检测成脂分化诱导0、1、2、3、4、5 d时细胞中的PKD2基因。以pcDNA3.1为...
目的观察多囊肾致病基因2(PKD2)在骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化过程中的表达变化及作用。方法培养骨髓间充质干细胞株ST2并进行成脂分化诱导,采用qRT-PCR法分别检测成脂分化诱导0、1、2、3、4、5 d时细胞中的PKD2基因。以pcDNA3.1为载体,构建PKD2过表达质粒。将ST2细胞分为对照组(转染pcDNA3.1质粒)和实验组(转染PKD2过表达质粒),进行成脂分化诱导,采用油红O染色进行鉴定;采用qRT-PCR法检测成脂分化相关基因[过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、脂肪酶(adipsin)mRNA];采用Western blotting法检测PPARγ、C/EBPα、FABP4。将ST2细胞分为对照组和实验组,分别转染pcDNA3.1与PKD2过表达质粒,不进行成脂分化诱导,转染后72 h采用Western blotting法检测Wnt信号通路相关蛋白(t-Lrp6、p-Lrp6、t-GSK3β、p-GSK3β、t-β-catenin、活化β-catenin、TCF7L2)。结果成脂分化诱导1 d以后ST2细胞中PKD2基因相对表达量均显著高于0 d时,以诱导4 d时PKD2基因相对表达量最高(P均<0.05)。实验组油红定量少于对照组(P<0.05)。实验组细胞中PPARγ、C/EBPα、FABP4、adipsin mRNA表达低于对照组;PPARγ、C/EBPα、FABP4蛋白表达低于对照组(P均<0.05)。实验组细胞中p-Lrp6、p-GSK3β、活化β-catenin、TCF7L2表达高于对照组(P均<0.05)。结论ST2细胞成脂分化过程中PKD2的表达增高;PKD2过表达可抑制BMSCs向脂肪细胞分化,机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。
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关键词
多囊肾致病基因2
骨髓间充质干细胞
成脂分化
WNT/Β-CATENIN信号通路
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题名
PKD2在骨髓间充质干细胞成脂分化过程中的表达变化及作用
被引量：
2
1
作者
单丽英
吴晓文
师晓丽
朱恩东
袁海瑞
王宝利
机构
天津医科大学朱宪彝纪念医院天津市内分泌研究所国家卫健委激素与发育重点实验室
天津医科大学基础医学院
出处
《山东医药》
CAS
2021年第14期1-5,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(81871741)
天津市自然科学基金资助项目(18JCZDJC32200)。
文摘
目的观察多囊肾致病基因2(PKD2)在骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化过程中的表达变化及作用。方法培养骨髓间充质干细胞株ST2并进行成脂分化诱导,采用qRT-PCR法分别检测成脂分化诱导0、1、2、3、4、5 d时细胞中的PKD2基因。以pcDNA3.1为载体,构建PKD2过表达质粒。将ST2细胞分为对照组(转染pcDNA3.1质粒)和实验组(转染PKD2过表达质粒),进行成脂分化诱导,采用油红O染色进行鉴定;采用qRT-PCR法检测成脂分化相关基因[过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、脂肪酶(adipsin)mRNA];采用Western blotting法检测PPARγ、C/EBPα、FABP4。将ST2细胞分为对照组和实验组,分别转染pcDNA3.1与PKD2过表达质粒,不进行成脂分化诱导,转染后72 h采用Western blotting法检测Wnt信号通路相关蛋白(t-Lrp6、p-Lrp6、t-GSK3β、p-GSK3β、t-β-catenin、活化β-catenin、TCF7L2)。结果成脂分化诱导1 d以后ST2细胞中PKD2基因相对表达量均显著高于0 d时,以诱导4 d时PKD2基因相对表达量最高(P均<0.05)。实验组油红定量少于对照组(P<0.05)。实验组细胞中PPARγ、C/EBPα、FABP4、adipsin mRNA表达低于对照组;PPARγ、C/EBPα、FABP4蛋白表达低于对照组(P均<0.05)。实验组细胞中p-Lrp6、p-GSK3β、活化β-catenin、TCF7L2表达高于对照组(P均<0.05)。结论ST2细胞成脂分化过程中PKD2的表达增高;PKD2过表达可抑制BMSCs向脂肪细胞分化,机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。
关键词
多囊肾致病基因2
骨髓间充质干细胞
成脂分化
WNT/Β-CATENIN信号通路
Keywords
polycystic kidney disease-
2
bone marrow mesenchymal stem cells
adipogenic differentiation
Wnt/β-catenin signaling pathway
分类号
R589 [医药卫生—内分泌]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PKD2在骨髓间充质干细胞成脂分化过程中的表达变化及作用
单丽英
吴晓文
师晓丽
朱恩东
袁海瑞
王宝利
《山东医药》
CAS
2021
2
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