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黄芪多糖调控Sirt1/FoxO1通路抑制多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞自噬的研究 被引量:10
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作者 阳丽 吴湘 +1 位作者 李昂 何薇薇 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期93-98,共6页
目的探究黄芪多糖(APS)调控沉默信息调节因子1/叉头状转录因子O1(Sirt1/FoxO1)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬的影响。方法大鼠中分离卵巢颗粒细胞并经促卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光鉴定,且CCK8检测APS对卵巢颗粒细胞增... 目的探究黄芪多糖(APS)调控沉默信息调节因子1/叉头状转录因子O1(Sirt1/FoxO1)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬的影响。方法大鼠中分离卵巢颗粒细胞并经促卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光鉴定,且CCK8检测APS对卵巢颗粒细胞增殖的影响。10-5mol/L丙酸睾丸酮、10μmol/L C2-神经酰胺作用大鼠卵巢颗粒细胞24 h诱导PCOS大鼠颗粒细胞自噬模型,CCK8检测细胞增殖情况;透射电镜观察自噬体情况;免疫印迹法检测细胞中Sirt1、Fox O1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达情况。结果免疫荧光检测显示,FSHR蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的平均阳性表达量93.18%>90%,可进行接下来实验。0、100、200、400μg/mL APS处理正常卵巢颗粒细胞,在贴壁0、24 h比较,细胞OD450差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常组相比,模型组细胞核附近出现大量自噬小体,双层、单层膜包裹胞质形成封闭、圆形结构,部分自噬小体内膜溶解,自噬小体周围可见单层膜结构包裹着一些被降解的胞浆、类似自噬小体结构;100μg/mL APS组与模型组细胞结构类似,随着APS剂量的升高,自噬小体数量减少,在400μg/m L APS组时细胞正常。正常组、模型组、100、200、400μg/mL APS组在细胞贴壁0 h时,细胞OD450差异无统计学意义(P>0.05)。细胞贴壁24 h,与正常组相比,模型组细胞OD450降低(P<0.05),细胞中Sirt1、Fox O1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平升高(P<0.05);与模型组相比,100、200、400μg/mL APS组细胞OD450升高(P<0.05),细胞中Sirt1、Fox O1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平降低(P<0.05)。结论APS可以抑制PCOS大鼠颗粒细胞自噬,可能是通过抑制自噬通路Sirt1/FoxO1实现的。 展开更多
关键词 黄芪多糖 沉默信息调节因子1/叉头状转录因子O1通路 多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞自噬
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归术益坤方对多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞自噬通路P53/AMPK中关键基因表达的影响 被引量:14
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作者 邢玉 刘艳霞 +2 位作者 刘欣 肖慧 佟庆 《辽宁中医杂志》 CAS 2020年第9期184-187,共4页
目的研究归术益坤方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬通路P53/AMPK中关键基因表达的影响。方法以丙酸睾丸酮和自噬诱导剂(C2-神经酰胺)干预颗粒细胞,通过透射电镜检测颗粒细胞的自噬情况,建立大鼠PCOS颗粒细胞的自噬模型。实验... 目的研究归术益坤方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬通路P53/AMPK中关键基因表达的影响。方法以丙酸睾丸酮和自噬诱导剂(C2-神经酰胺)干预颗粒细胞,通过透射电镜检测颗粒细胞的自噬情况,建立大鼠PCOS颗粒细胞的自噬模型。实验分为空白组、模型组(10-5mol/L丙酸睾丸酮、10μmol/L C2-神经酰胺)、归术益坤方高、中、低剂量组(浓度分别为0.1、0.01、0.001 mg/mL)及自噬阻断剂3MA组(10 mmol/L),采用Real-time PCR法检测各组颗粒细胞中P53、mT OR、AMPK基因的表达。结果10-5mol/L TP、10μmol/LC2-神经酰胺作用颗粒细胞24 h后,细胞超微结构中可观察到自噬小体。与模型组相比,高、中、低剂量归术益坤方可显著上调P53基因的表达(P<0.01,P<0.05),下调AMPK基因的表达(P<0.01),差异有统计学意义;与模型组相比,高、中剂量归术益坤方可显著上调mT OR基因的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。中药低剂量组与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠PCOS颗粒细胞的自噬模型成功建立。归术益坤方可以通过调控P53/AMPK信号通路中关键基因的表达,来抑制自噬,这可能是归术益坤方治疗多囊卵巢综合征的新机制。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 细胞模型 自噬 P53/AMPK信号通路 归术益坤方
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基于p53/AMPK信号通路探讨补肾调泡周期疗法对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞的影响
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作者 何忆清 王茜 +3 位作者 刘泉 张颖 魏逍萱 杨硕 《中成药》 北大核心 2025年第6期1976-1981,共6页
目的 探讨补肾调泡周期疗法对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞的影响。方法 将SD大鼠随机分成正常组、模型组、逍遥散组(11.97 g/kg)、三子汤组(15.75 g/kg)、补肾调泡周期疗法组、阳性药物组(克罗米芬5.25 g/kg),每组6只。采用... 目的 探讨补肾调泡周期疗法对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞的影响。方法 将SD大鼠随机分成正常组、模型组、逍遥散组(11.97 g/kg)、三子汤组(15.75 g/kg)、补肾调泡周期疗法组、阳性药物组(克罗米芬5.25 g/kg),每组6只。采用来曲唑(1 mg/kg)构建PCOS大鼠模型,造模后正常组与模型组灌胃给予蒸馏水,各给药组灌胃给予相应剂量药物,持续12 d。记录大鼠体质量、卵巢质量及子宫质量,瑞氏染色法观察大鼠动情周期,HE染色法观察卵巢组织形态,ELISA法检测大鼠血清性激素[促黄体生成素(LH)、促卵泡生长激素(FSH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、孕酮(P)]及抗苗勒氏激素(AMH)水平,Western blot法检测大鼠卵巢颗粒细胞p53、AMPK、mTOR、Beclin 1、LC3蛋白表达,RT-qPCR法检测p53、AMPK、mTOR、Beclin 1 mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量、卵巢质量升高(P<0.01),子宫质量降低(P<0.05);动情周期紊乱;颗粒细胞减少,囊性卵泡增加;血清LH、LH/FSH、T、AMH水平升高(P<0.05,P<0.01),FSH、E2、P水平降低(P<0.01);卵巢颗粒细胞p53、mTOR蛋白及mRNA表达降低(P<0.01),AMPK、Beclin 1蛋白及mRNA表达升高(P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,补肾调泡周期疗法组大鼠卵巢质量降低(P<0.05),子宫质量升高(P<0.05);各动情阶段规律出现;颗粒细胞层数增加,优势卵泡可见;血清LH、LH/FSH、T、AMH水平降低(P<0.05,P<0.01),FSH、E2、P水平升高(P<0.05,P<0.01);卵巢颗粒细胞p53、mTOR蛋白及mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),AMPK、Beclin 1蛋白及mRNA表达降低(P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ表达降低(P<0.05)。结论 补肾调泡周期疗法可通过调控p53/AMPK通路相关蛋白及自噬相关因子的表达,调节PCOS大鼠卵巢颗粒细胞自噬平衡,促进卵泡发育。 展开更多
关键词 补肾调泡周期疗法 多囊卵巢综合征 卵巢颗粒细胞 自噬 p53/AMPK信号通路
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SMAD4对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的调控作用
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作者 董安琪 郑金丹 +1 位作者 于晓萌 刘丽丽 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第3期223-227,共5页
目的探讨SMAD4对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法脱氢表雄酮(DHEA)法构建PCOS大鼠模型,体外提取并培养颗粒细胞。实时定量PCR、Western blotting检测大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平。SMAD4-siRNA转染PCO... 目的探讨SMAD4对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法脱氢表雄酮(DHEA)法构建PCOS大鼠模型,体外提取并培养颗粒细胞。实时定量PCR、Western blotting检测大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平。SMAD4-siRNA转染PCOS大鼠卵巢颗粒细胞,实时定量PCR检测转染后细胞中SMAD4 mRNA水平,Western blotting检测转染后细胞中SMAD4、PCNA、BAX、BCL-2蛋白表达水平。CCK-8法检测siRNA干扰PCOS大鼠卵巢颗粒细胞后细胞生长情况。结果HE染色显示,PCOS组大鼠卵巢卵泡空泡增多,颗粒细胞层数和黄体数明显减少,造模成功。FSHR阳性率大于95%。与对照组相比,PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平升高(P<0.05)。siRNA可显著降低PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平(P<0.01),并可促进颗粒细胞增殖、抑制凋亡。结论PCOS大鼠卵巢颗粒细胞发育障碍可能与SMAD4基因过表达有关,SMAD4有望成为治疗PCOS患者排卵障碍的潜在靶点。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 颗粒细胞 SMAD4
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多囊卵巢综合征不孕患者颗粒细胞中PTEN mRNA表达水平对卵泡液激素分泌的影响 被引量:1
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作者 姚建凤 吴培雅 +7 位作者 陈丽影 王燕婷 凌幼霞 陈晓燕 陈婉真 陶萍 黄荣富 李友筑 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期164-171,共8页
目的:检测多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者卵泡液(FF)中性激素和胰岛素水平与颗粒细胞中人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)mRNA表达水平,并初步阐释胰岛素水平与PTEN mRNA表达水平的相关性。方法:选取70例不孕患者作为研... 目的:检测多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者卵泡液(FF)中性激素和胰岛素水平与颗粒细胞中人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)mRNA表达水平,并初步阐释胰岛素水平与PTEN mRNA表达水平的相关性。方法:选取70例不孕患者作为研究对象,根据不孕因素,分为PCOS组和对照组(输卵管阻塞或男方因素不孕),所有患者均接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗,在取卵当天收集患者FF和卵巢颗粒细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组患者卵巢组织颗粒细胞中PTEN mRNA表达水平;采用电化学发光法检测2组患者FF中性激素和胰岛素水平;采用Spearman相关性分析法分析2组患者卵巢颗粒细胞中PTEN mRNA表达水平和FF中睾酮(T)水平与FF中胰岛素水平的相关性。结果:2组患者年龄、不孕年限、体质量指数(BMI)、基础性激素、促性腺激素(Gn)总剂量和促排天数比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,PCOS组患者抗缪勒管激素(AMH)和窦卵泡计数(AFC)均明显升高(P<0.05)。RT-qPCR法,PCOS组患者卵巢颗粒细胞中PTEN mRNA水平高于对照组(P<0.001)。电化学发光法,PCOS组患者FF中T和胰岛素水平高于对照组(P<0.05),雌激素和孕激素水平均低于对照组(P<0.05)。Spearman相关性分析,PCOS组患者FF中T水平和卵巢颗粒细胞中PTEN mRNA表达水平与FF中胰岛素水平均呈正相关关系(r=0.577,P<0.001;r=0.616,P<0.001),而对照组患者FF中T水平和卵巢颗粒细胞中PTEN mRNA表达水平与FF中胰岛素水平无相关性(r=0.266,P=0.123;r=-0.214,P=0.216)。结论:PCOS不孕患者颗粒细胞中高表达PTEN可能与卵巢内局部高胰岛素水平有关,PTEN参与PCOS的发生发展过程。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 卵泡液 胰岛素 颗粒细胞 人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因
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多囊卵巢综合征高雄激素介导二酰基甘油酰基转移酶2基因促进颗粒细胞铁死亡
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作者 李远成 李荔 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第16期2498-2506,共9页
目的探讨高雄激素通过DGAT2诱导铁死亡在多囊卵巢综合征(PCOS)颗粒细胞功能损伤中的作用机制。方法体外培养人卵巢颗粒细胞系KGN,分别给予不同浓度睾酮(1、10、100μmol/L)处理,检测DGAT2及铁死亡标志物(GPX4、ROS、MDA)、脂质代谢指标... 目的探讨高雄激素通过DGAT2诱导铁死亡在多囊卵巢综合征(PCOS)颗粒细胞功能损伤中的作用机制。方法体外培养人卵巢颗粒细胞系KGN,分别给予不同浓度睾酮(1、10、100μmol/L)处理,检测DGAT2及铁死亡标志物(GPX4、ROS、MDA)、脂质代谢指标(TG、PUFAs)、脂滴积聚及细胞存活率的变化。此外,通过siRNA敲低DGAT2并联合Erastin处理,进一步验证DGAT2对铁死亡的影响。结果睾酮处理上调DGAT2表达(P<0.01),增加了细胞内TG和PUFAs含量(P<0.001),促进了脂滴积聚,伴随ROS和MDA水平升高(P<0.05,P<0.001)及GPX4表达下降(P<0.001),明显降低细胞活力(P<0.001)。DGAT2敲低可逆转上述变化,缓解铁死亡并显著改善细胞存活率(P<0.001)。结论DGAT2可能参与了PCOS患者高雄激素介导的颗粒细胞铁死亡过程。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 二酰基甘油酰基转移酶2 铁死亡 颗粒细胞 高雄激素
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柚皮素下调RIP1-RIP3-MLKL信号通路抑制多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞凋亡 被引量:6
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作者 吕向阳 任晓爽 +1 位作者 张良 许继群 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期483-489,共7页
目的基于受体相互作用蛋白激酶(receptor interacting protein kinase,RIP)1-RIP3-混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like proteins,MLKL)介导的细胞坏死性凋亡途径,探究柚皮素对多囊卵巢综合征(polycystic ovary ... 目的基于受体相互作用蛋白激酶(receptor interacting protein kinase,RIP)1-RIP3-混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like proteins,MLKL)介导的细胞坏死性凋亡途径,探究柚皮素对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、柚皮素组、RIP1抑制剂(Nec-1)组、RIP1-RIP3-MLKL坏死信号激活剂(Z-VAD-fmk)组、柚皮素+Z-VAD-fmk组,每组15只。ELISA法检测卵巢组织IL-1β、TNF-α水平;HE法观察卵巢形态;分离卵巢组织颗粒细胞,流式细胞术检测凋亡率及坏死率;免疫组化法检测卵巢组织磷酸化RIP1(p-RIP1)阳性表达;Western blot法检测RIP1-RIP3-MLKL途径相关蛋白表达。结果RIP1特异性抑制剂Nec-1和柚皮素可阻断RIP1磷酸化活化,抑制RIP1-RIP3-MLKL信号通路,并降低PCOS大鼠炎症水平,缓解卵巢颗粒细胞坏死及凋亡(P<0.05)。Z-VAD-fmk可促进RIP1-RIP3-MLKL途径活化,加重卵巢颗粒细胞凋亡,并部分减弱柚皮素的抗卵巢颗粒细胞凋亡作用(P<0.05)。结论柚皮素可能通过阻断RIP1-RIP3-MLKL介导的坏死性凋亡途径活化,抵抗PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡。 展开更多
关键词 柚皮素 多囊卵巢综合征 卵巢颗粒细胞 RIP1-RIP3-MLKL通路 坏死性凋亡 炎症
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抑制NLRP3炎症小体激活可调节自噬改善多囊卵巢综合征颗粒细胞凋亡 被引量:1
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作者 符山花 包利利 +3 位作者 赵达 李俊 林芳婷 胡荣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1646-1652,共7页
目的:在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的表达及其与颗粒细胞凋亡的关系。方法:收集17例PCOS患者(PCOS组)和20例非PCOS患者(对照组)的卵泡液与卵巢颗粒细胞,ELISA检测卵泡液中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL... 目的:在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的表达及其与颗粒细胞凋亡的关系。方法:收集17例PCOS患者(PCOS组)和20例非PCOS患者(对照组)的卵泡液与卵巢颗粒细胞,ELISA检测卵泡液中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-18等表达水平,RT-PCR和Western blot检测颗粒细胞中NLRP3 mRNA和NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、含CARD的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及裂解型天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved caspase-1)和自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与p62的表达水平;TUNEL法检测两组受试者颗粒细胞的凋亡水平;体外培养人卵巢癌颗粒细胞系KGN细胞,siRNA干扰技术将沉默NLRP3的siRNA(si-NLRP3)和阴性对照序列(si-NC)转染入细胞中,并采用TNF-α进行刺激以模拟PCOS相关的细胞损伤;将KGN细胞按处理方式的不同分为4组:Ctrl组、TNF-α组、TNF-α+si-NLRP3组和TNF-α+si-NC组;ELISA检测各组细胞上清液中脱氢表雄酮(DHEA)、睾酮和IL-1β与IL-18水平;TUNEL法检测各组KGN细胞的凋亡水平;Western blot检测各组KGN细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、NLRP3、ASC与cleaved caspase-1蛋白表达水平和NF-κB信号通路中NF-κB p-p65的水平(NF-κB p-p65/NF-κB p65)。结果:与对照组相比,PCOS患者卵泡液中TNF-α、IL-1β和IL-18的表达和颗粒细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、NLRP3的mRNA与NLRP3、ASC和cleaved caspase-1的蛋白表达和细胞的凋亡水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),而p62的蛋白表达显著降低(P<0.01);与Ctrl组相比,TNF-α组、TNF-α+si-NC组和TNF-α+si-NLRP3组细胞上清液中DHEA、睾酮和IL-1β与IL-18水平和细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、ASC与cleaved caspase-1蛋白表达及NF-κB p-p65的水平和细胞凋亡率均明显升高(P<0.05或P<0.01),而p62蛋白却显著降低(P<0.01),NLRP3除在TNF-α+si-NLRP3组明显降低外(P<0.01),在TNF-α组、TNF-α+si-NC组中的表达均明显升高(P<0.01);但与TNF-α组相比,TNF-α+si-NLRP3组的上述检测指标变化趋势均明显降低(P<0.05),TNF-α+si-NC组无显著变化(P>0.05)。结论:颗粒细胞中过度激活的NLRP3炎症小体可能通过NF-κB途径参与促进PCOS患者的细胞炎症损伤与自噬性凋亡。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体 颗粒细胞 自噬 凋亡
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白藜芦醇调节Akt/mTOR通路对大鼠多囊卵巢综合征颗粒细胞自噬的影响机制研究 被引量:22
9
作者 马智 胡俊 +2 位作者 邓煜 幸贵邦 王炼炼 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期388-393,共6页
目的:探讨白藜芦醇对多囊卵巢综合征大鼠模型颗粒细胞自噬的影响,并探讨其机制。方法:40只雌性SD大鼠幼鼠随机分为2组,即多囊卵巢综合征模型组(n=30)和模型对照组(n=10)。将经免疫细胞化学法鉴定证实的多囊卵巢综合征(polycystic ovaria... 目的:探讨白藜芦醇对多囊卵巢综合征大鼠模型颗粒细胞自噬的影响,并探讨其机制。方法:40只雌性SD大鼠幼鼠随机分为2组,即多囊卵巢综合征模型组(n=30)和模型对照组(n=10)。将经免疫细胞化学法鉴定证实的多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)颗粒细胞进行体外培养。用不同浓度的白藜芦醇处理,CCK-8观察细胞的增殖率变化情况;电镜观察颗粒细胞内自噬水平的变化;Western blot检测细胞内自噬相关蛋白轻链3Ⅰ(light chain 3Ⅰ,LC3Ⅰ)、自噬相关蛋白轻链3Ⅱ(light chain 3Ⅱ,LC3Ⅱ)、Beclin1的表达,以及总(磷酸化)蛋白激酶B[total(phosphorated)protein kinase B,T(p)-Akt]、总(磷酸化)雷帕霉素靶蛋白[total(phosphorated)mammalian target of rapamyoin,T(p)-mTOR]的变化,并检测Akt抑制剂LY294002作用后,细胞内上述蛋白的表达情况。结果:免疫细胞化学结果显示,与模型对照组比较,模型组卵巢颗粒细胞中卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)表达明显增强。这提示模型构建成功且分离成功。CCK-8结果表明,白藜芦醇能够提高颗粒细胞的增殖率,有浓度-时间依赖性;并降低细胞内的自噬水平;而Western blot结果显示,白藜芦醇可以减低细胞内LC3Ⅰ、LC3Ⅱ和Beclin1的表达,提高p-Akt和p-mTOR的蛋白表达;LY249002作用后,细胞内的LC3Ⅰ、LC3Ⅱ和Beclin1表达明显增加,同时p-Akt和p-mTOR的表达则明显降低。结论:白藜芦醇能够明显降低多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞内自噬水平并影响细胞的增殖率,其机制可能与白藜芦醇上调Akt/mTOR通路密切相关。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 颗粒细胞 自噬 Akt/mTOR通路
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桂枝茯苓丸含药血清对多囊卵巢综合征小鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响 被引量:15
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作者 陈海燕 朱鸿秋 +3 位作者 朱影 胡小丹 吴沛娟 吴晗雪 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3137-3144,共8页
目的 探讨桂枝茯苓丸含药血清通过调控基因靶点H19/miR-29b-3p对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响。方法 分离及培养PCOS小鼠卵巢颗粒细胞,转染oe-H19或miR-29b-3p-inhibitor,使用桂枝茯苓丸含药血清进行干预,采用流式... 目的 探讨桂枝茯苓丸含药血清通过调控基因靶点H19/miR-29b-3p对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响。方法 分离及培养PCOS小鼠卵巢颗粒细胞,转染oe-H19或miR-29b-3p-inhibitor,使用桂枝茯苓丸含药血清进行干预,采用流式细胞仪和Western blot法分别检测卵巢颗粒细胞自噬率及LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达,RT-qPCR法检测卵巢颗粒细胞H19、miR-29b-3p mRNA表达。结果 与对照组比较,模型组小鼠卵巢颗粒细胞自噬率、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白和H19 mRNA表达升高(P<0.01),miR-29b-3p mRNA表达降低(P<0.01);与模型组比较,桂枝茯苓丸含药血清组卵巢颗粒细胞自噬率及LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达均降低(P<0.01),H19、miR-29b-3p mRNA表达均发生逆转(P<0.01);过表达H19或抑制miR-29b-3p表达可减弱桂枝茯苓丸含药血清对卵巢颗粒细胞过度自噬的抑制作用(P<0.01)。结论 桂枝茯苓丸含药血清可以通过H19/miR-29b-3p途径抑制PCOS小鼠卵巢颗粒细胞的自噬水平。 展开更多
关键词 桂枝茯苓丸 多囊卵巢综合征(PCOS) 卵巢颗粒细胞 自噬 H19/miR-29b-3p
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细胞自噬在多囊卵巢综合征中的作用及中药干预研究进展
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作者 李鹤 蔺文娟 +5 位作者 袁荣荣 黄灿灿 万文文 芮守月 张舒媛 张小花 《世界中医药》 北大核心 2025年第4期691-695,702,共6页
细胞自噬是一种独特的自我吞噬性细胞死亡方式,直接参与并影响了多囊卵巢综合征(PCOS)的发生、发展与转归,阻止颗粒细胞自噬、促进卵母细胞自噬、抑制卵泡膜细胞自噬可以有效地预防并改善PCOS患者的卵巢损伤。中药单体及中药复方可有效... 细胞自噬是一种独特的自我吞噬性细胞死亡方式,直接参与并影响了多囊卵巢综合征(PCOS)的发生、发展与转归,阻止颗粒细胞自噬、促进卵母细胞自噬、抑制卵泡膜细胞自噬可以有效地预防并改善PCOS患者的卵巢损伤。中药单体及中药复方可有效调控卵巢细胞自噬。 展开更多
关键词 细胞自 多囊卵巢综合征 PCOS 中药 研究进展 卵巢颗粒细胞 卵母细胞 卵泡膜细胞
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白藜芦醇调节SIRT1/AMPK通路抑制大鼠多囊卵巢综合征颗粒细胞内自噬的机制研究 被引量:13
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作者 邓煜 马智 +3 位作者 胡俊 文一迪 曲慧颖 桂文武 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期700-704,共5页
目的:探讨植物提取物白藜芦醇对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠模型颗粒细胞内自噬的影响,并探讨其对SIRT1/AMPK通路的调控作用。方法:体外培养PCOS的SD大鼠卵巢颗粒细胞,用不同浓度白藜芦醇(5、10、20、40μmol/L... 目的:探讨植物提取物白藜芦醇对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠模型颗粒细胞内自噬的影响,并探讨其对SIRT1/AMPK通路的调控作用。方法:体外培养PCOS的SD大鼠卵巢颗粒细胞,用不同浓度白藜芦醇(5、10、20、40μmol/L)处理不同时间(24、48、72 h),MTT法观察卵巢颗粒细胞增殖率的变化;电镜观察细胞内自噬水平的变化;Western blot检测细胞内沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator T1,SIRT1)、单磷酸腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)、磷酸化的AMPK(pAMPK)、Beclin1和p62的表达变化,并检测SIRT1特异性抑制剂EX527作用后,细胞内上述蛋白的表达情况。结果:MTT结果显示,白藜芦醇能明显促进颗粒细胞增殖(P<0.05),呈浓度-时间依赖性(P<0.05);电镜结果表明白藜芦醇能降低细胞内的自噬体数量(P<0.05)。Western blot结果显示白藜芦醇可以增强卵巢颗粒细胞内SIRT1和pAMPK的蛋白表达水平(P<0.05),抑制细胞内Beclin1的表达(P<0.05),增加p62的表达;联合SIRT1特异性抑制剂EX527作用后,颗粒细胞内的SIRT1和pAMPK蛋白表达水平明显降低,Beclin1表达明显增加(P<0.05),p62却明显降低(P<0.05)。结论:白藜芦醇能抑制PCOS卵巢颗粒细胞内自噬水平并促进其增殖,这与白藜芦醇激活SITR1/AMPK通路密切相关。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 颗粒细胞 自噬 沉默信息调节因子2相关酶1/单磷酸腺苷酸活化蛋白激酶通路
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微RNA-30b-5p通过靶向Atg5抑制多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞自噬 被引量:8
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作者 王雪敏 王亚楠 +2 位作者 牛爱琴 叶英 李飞 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期20-28,共9页
目的·探究microRNA-30b-5p(miR-30b-5p)在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠中的表达及miR-30b-5p过表达对卵巢颗粒细胞(granulosa cell,GC)自噬的影响。方法·采用脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA... 目的·探究microRNA-30b-5p(miR-30b-5p)在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠中的表达及miR-30b-5p过表达对卵巢颗粒细胞(granulosa cell,GC)自噬的影响。方法·采用脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)建立PCOS大鼠模型,实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)和Western blotting检测正常组和PCOS组大鼠卵巢组织中miR-30b-5p和自噬相关蛋白5同源物(autophagy-associated protein 5 homologue,Atg5)的表达。分离并培养原代PCOS大鼠卵巢GC,分为对照组、miR-NC组、miR-30b-5p过表达组、miR-30b-5p过表达+pcDNA3.1-NC组、miR-30b-5p过表达+pcDNA3.1-Atg5组,另取正常组大鼠卵巢GC为空白组;将miR-30b-5p mimic和pcDNA3.1-Atg5及相应的阴性对照转染到细胞中,转染48 h后,qRT-PCR检测各组细胞中miR-30b-5p和Atg5 mRNA表达,验证转染效果。CCK-8及流式细胞仪分别检测细胞活力和凋亡率;免疫荧光染色检测各组细胞微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)阳性表达;Western blotting检测自噬相关蛋白Atg5、p62、Beclin-1和LC3蛋白表达。结果·PCOS组大鼠卵巢组织中miR-30b-5p表达水平显著低于正常组,Atg5 mRNA和蛋白水平显著高于正常组(均P=0.000)。转染后,与空白组相比,对照组卵巢GC中miR-30b-5p水平、细胞凋亡率、p62蛋白水平显著降低,Atg5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、LC3阳性细胞百分比、Beclin-1蛋白水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著升高(均P=0.000);与对照组相比,miR-30b-5p过表达组卵巢GC中miR-30b-5p水平、细胞凋亡率、p62蛋白水平显著升高,Atg5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、LC3阳性细胞百分比、Beclin-1蛋白水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著降低(均P=0.000)。上调Atg5可明显减弱miR-30b-5p过表达对卵巢GC增殖和自噬的抑制作用(均P=0.000)。结论·MiR-30b-5p在PCOS中呈低表达;过表达miR-30b-5p可抑制PCOS大鼠卵巢GC增殖和自噬,促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制Atg5表达有关。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 microRNA-30b-5p 自噬 自噬相关蛋白5同源物 增殖 凋亡
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痰湿型多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞AMPK/UCP2途径与线粒体功能变化的研究 被引量:9
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作者 丛培玮 张丽娜 +3 位作者 郭隽馥 郭胜男 王蔚 张林 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第7期44-46,I0015,共4页
目的观察痰湿型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)(AMPK/UCP2)途径与线粒体功能的变化,探讨“痰湿不孕”的机制。方法选取动情周期规律S... 目的观察痰湿型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)(AMPK/UCP2)途径与线粒体功能的变化,探讨“痰湿不孕”的机制。方法选取动情周期规律SD大鼠22只。运用高脂+来曲唑灌胃法复制痰湿型PCOS大鼠,随机分为对照组和模型组,造模成功后,取卵巢组织提取原代颗粒细胞,比色法检测三磷酸腺苷(ATP)含量;化学发光法检测活性氧(ROS)水平;Western blot法检测AMPKα、p-AMPKα及UCP2蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠颗粒细胞线粒体数量减少,出现肿胀,嵴断裂及空泡化改变;ATP降低、ROS增高(P<0.01);p-AMPKα/AMPKα比值降低(P<0.05);UCP2蛋白表达升高(P>0.05)。结论“痰湿不孕”可能与AMPK/UCP2途径所致的线粒体受损相关。 展开更多
关键词 痰湿型 多囊卵巢综合征 颗粒细胞 AMPK/UCP2途径 线粒体
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多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞中DR5、DcR2的表达变化 被引量:3
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作者 张娟 王立群 +3 位作者 周月希 刁波 周蓉 解迪 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第9期33-39,共7页
目的观察DR5、DcR2在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞中的表达变化,探讨PCOS大鼠卵泡发育障碍的可能发生机制。方法大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠,以构建PCOS模型,分别用免疫组织化学法、RT-q PCR分析观... 目的观察DR5、DcR2在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞中的表达变化,探讨PCOS大鼠卵泡发育障碍的可能发生机制。方法大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠,以构建PCOS模型,分别用免疫组织化学法、RT-q PCR分析观察并比较DR5、DcR2在PCOS组和对照组大鼠卵巢颗粒细胞的表达情况。结果免疫组织化学结果显示,在PCOS组大鼠卵巢各级卵泡颗粒细胞中,DR5的表达较对照组均显著增强(P<0.05),在PCOS组大鼠卵巢窦前卵泡和窦状卵泡颗粒细胞中,DcR2的表达较对照组同级别卵泡显著增强(P<0.05),在始基卵泡颗粒细胞的表达差异无显著性(P>0.05)。RT-q PCR分析显示,DR5 mRNA和DcR2 mRNA在两组中都有表达,且二者在PCOS组大鼠卵巢颗粒细胞中的表达较正常对照组均明显增强(P<0.05)。结论DR5和DcR2在颗粒细胞中的异常表达可能对PCOS大鼠卵泡的异常发育起到了一定作用,它们可能是通过参与颗粒细胞凋亡过程而对卵泡的发育造成了一定影响。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 大鼠 颗粒细胞 DR5 DcR2
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多囊卵巢综合征中线粒体自噬与铁死亡之间串联关系
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作者 赵琦 陈萍 +1 位作者 杨丽萍(综述) 孙建华(审校) 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1149-1154,共6页
多囊卵巢综合征(PCOS)是一种非常普遍的内分泌和生殖疾病,其病因和发病机制复杂且尚未完全明了,目前临床治疗多以对症处理为主。有研究揭示铁死亡作为一种新型的细胞死亡形式,可能在PCOS的发生和发展中起着关键的调控作用。此外,PCOS患... 多囊卵巢综合征(PCOS)是一种非常普遍的内分泌和生殖疾病,其病因和发病机制复杂且尚未完全明了,目前临床治疗多以对症处理为主。有研究揭示铁死亡作为一种新型的细胞死亡形式,可能在PCOS的发生和发展中起着关键的调控作用。此外,PCOS患者中存在自噬/线粒体自噬的增加,这些变化可能与铁死亡的发生密切相关。本研究综述线粒体自噬、铁死亡在PCOS发病机制中的作用,并分析了颗粒细胞线粒体自噬与铁死亡之间的串联关系,以期为PCOS临床治疗提供新思路和新靶点。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 线粒体自噬 铁死亡 串联机制 颗粒细胞
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甘草黄酮A调控多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育的作用机制研究
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作者 车霏 谢翔雨 +3 位作者 卢琴 杨惠霏 刘珊 唐洪梅 《世界中医药》 北大核心 2025年第8期1288-1293,1301,共7页
目的:探究甘草黄酮A调控微小RNA-137(miR-137)/吻素1(KISS-1)对颗粒细胞糖酵解途径介导的多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育的影响及作用机制。方法:将60只雌性5周龄斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为对照组、模型组、甘草黄酮A组、甘草黄酮... 目的:探究甘草黄酮A调控微小RNA-137(miR-137)/吻素1(KISS-1)对颗粒细胞糖酵解途径介导的多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育的影响及作用机制。方法:将60只雌性5周龄斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为对照组、模型组、甘草黄酮A组、甘草黄酮A+miR-137激动剂组和甘草黄酮A+miR-137激动剂+si-KISS-1组,每组12只。除对照组外均使用来曲唑联合高糖高脂饮食构建胰岛素抵抗大鼠稳态模型。自动生化分析仪和酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、空腹胰岛素(FINS)、乳酸、丙酮酸、三磷酸腺苷(ATP)水平;实时定量反转录PCR(qRT-PCR)检测miR-137及KISS-1mRNA相对表达量;免疫组织化学检测乳酸脱氢酶A(LDHA)、丙酮酸激酶-M2(PKM2)、己糖激酶2(HK2)表达。结果:与模型组比较,甘草黄酮A组FSH、LH、T、FINS、丙酮酸、KISS-1 mRNA水平均明显降低,乳酸、ATP、miR-137水平明显增加(均P<0.01)。与甘草黄酮A组比较,甘草黄酮A+miR-137激动剂组LDHA、PKM2、HK2表达均明显减少(均P<0.05)。与甘草黄酮A+miR-137激动剂组比较,甘草黄酮A+miR-137激动剂+si-KISS-1组LDHA、PKM2、HK2表达显著增加(均P<0.01)。结论:甘草黄酮A能够改善颗粒细胞糖酵解途径介导的多囊卵巢综合征大鼠卵泡的发育情况,该作用可能与上调miR-137水平进而抑制KISS-1的表达有关。 展开更多
关键词 甘草黄酮A 颗粒细胞 多囊卵巢综合征 糖酵解 卵泡发育 胰岛素抵抗 吻素1 微小RNA-137
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miRNA-135a-5p对蛋白激酶Cα的调控作用及对人卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响
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作者 李珊 刘文鑫 赵琪 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第5期478-483,共6页
目的探讨miRNA-135a-5p对蛋白激酶Cα(PRKCA)的调控作用及对人卵巢颗粒细胞生物学行为的影响。方法收集2023年8月至2023年12月于邢台市人民医院收治的30例多囊卵巢综合征患者以及同期于妇科检查的30例健康者的外周血标本。实时定量PCR检... 目的探讨miRNA-135a-5p对蛋白激酶Cα(PRKCA)的调控作用及对人卵巢颗粒细胞生物学行为的影响。方法收集2023年8月至2023年12月于邢台市人民医院收治的30例多囊卵巢综合征患者以及同期于妇科检查的30例健康者的外周血标本。实时定量PCR检测miRNA-135a-5p、PRKCA mRNA表达水平,Pearson相关分析患者miRNA-135a-5p及PRKCA mRNA表达水平相关性。采用荧光素酶报告系统确定miRNA-135a-5p对PRKCA的调控作用。将人卵巢颗粒细胞KGN分为对照组(未做任何处理)、miR-NC组(转染空白质粒)、miRNA-135a-5p低表达组(转染miRNA-135a-5p inhibitor)、miRNA-135a-5p过表达组(转染miRNA-135a-5p mimic)。分析miRNA-135a-5p对细胞增殖能力、凋亡情况的影响,并检测PRKCA以及NF-κB信号通路蛋白表达情况。结果与健康者比较,多囊卵巢综合征患者外周血中miRNA-135a-5p表达水平升高,PRKCA mRNA表达水平降低(P<0.05)。患者外周血中PRKCA mRNA与miRNA-135a-5p表达水平呈负相关性(r=-0.655,P<0.05)。荧光素酶实验表明miRNA-135a-5p可靶向PRKCA。与对照组、miR-NC组比较,miRNA-135a-5p过表达组2~4 d的细胞增殖倍数降低,细胞凋亡率升高,PRKCA mRNA及蛋白表达降低,NF-κB信号通路蛋白(NF-κB、P-p38/p38、TNF-α、IL-6)表达升高,而miRNA-135a-5p低表达组增殖倍数增加,细胞凋亡率降低,PRKCA mRNA及蛋白表达升高,NF-κB信号通路蛋白表达降低(P<0.05)。结论多囊卵巢综合征患者血清miRNA-135a-5p处于高表达状态,miRNA-135a-5p通过靶向调控PRKCA,激活NF-κB信号通路,从而诱导人卵巢颗粒细胞炎性介质释放,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 miRNA-135a-5p 卵巢颗粒细胞 NF-ΚB信号通路 蛋白激酶CΑ
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PPARγ mRNA在卵巢颗粒细胞的表达调节及与多囊卵巢综合征的相关性 被引量:15
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作者 胡卫红 陈琳 +3 位作者 同军 赵春艳 毛莎 乔杰 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期859-863,共5页
目的:研究PPARγmRNA在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者卵巢颗粒细胞的表达,以及不同浓度的睾酮、胰岛素及罗格列酮对卵巢颗粒细胞细胞核过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptor... 目的:研究PPARγmRNA在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者卵巢颗粒细胞的表达,以及不同浓度的睾酮、胰岛素及罗格列酮对卵巢颗粒细胞细胞核过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)mRNA的表达调节。方法:分别提取5例PCOS患者和30例正常人卵巢颗粒细胞,对PCOS患者及5例正常人(对照组)颗粒细胞应用Real-time PCR方法检测PPARγmRNA表达;剩余25例正常人卵巢颗粒细胞进行体外培养48 h后,分别用含不同浓度的睾酮、胰岛素及PPARγ激动剂(罗格列酮)的培养基培养颗粒细胞24 h后,应用Real-time PCR方法检测PPARγmRNA的表达。结果:PCOS患者卵巢颗粒细胞PPARγmRNA的表达明显低于对照组(P<0.05)。睾酮浓度为1 nmol/L时,PPARγmRNA的表达明显减少(P<0.05);睾酮浓度为10 nmol/L时,PPARγmRNA的表达升高,与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。胰岛素浓度为10 nmol/L时,PPARγmRNA的表达较对照组明显增加(P<0.05);当胰岛素浓度为100 nmol/L时,PPARγmRNA的表达与胰岛素浓度为10 nmol/L时差异无统计学意义(P>0.05)。罗格列酮浓度为1 nmol/L时,PPARγmRNA的表达较对照组明显增加(P<0.05);当罗格列酮浓度为10 nmol/L时,PPARγmRNA的表达较罗格列酮浓度为1 nmol/L时明显增加(P<0.05)。结论:卵巢颗粒细胞PPARγmRNA的表达与睾酮的浓度有关,胰岛素诱导颗粒细胞PPARγmRNA的表达,颗粒细胞PPARγmRNA的表达受PPARγ的正向调节,PCOS患者卵巢颗粒细胞PPARγmRNA的表达异常可能与PCOS的发生有关。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 PPARΓ 颗粒细胞
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Ghrelin基因在多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞中的表达 被引量:5
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作者 王炼炼 李聪 +2 位作者 杨曦 孟江萍 幸贵邦 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期239-242,共4页
目的:探讨Ghrelin基因在卵巢颗粒细胞中的表达及其与多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的关系。方法:选择47例在重庆医科大学辅助生育中心接受体外受精-胚胎移植治疗的不孕妇女,其中PCOS组11例,对照(Non-PCOS)组36例,采... 目的:探讨Ghrelin基因在卵巢颗粒细胞中的表达及其与多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的关系。方法:选择47例在重庆医科大学辅助生育中心接受体外受精-胚胎移植治疗的不孕妇女,其中PCOS组11例,对照(Non-PCOS)组36例,采用real-time PCR及免疫印迹法分别测定2组妇女卵巢颗粒细胞中Ghrelin m RNA和蛋白的表达水平。结果:PCOS妇女颗粒细胞中Ghrelin m RNA和蛋白的表达均低于Non-PCOS妇女(0.926±0.206 vs.1.137±0.105,t=2.73,P=0.015;0.647±0.052 vs.0.937±0.038,t=7.82,P=0.001)。结论:PCOS妇女卵巢颗粒细胞的Ghrelin m RNA和蛋白表达水平明显低于Non-PCOS妇女,可能与卵泡发育障碍相关。 展开更多
关键词 GHRELIN基因 卵巢颗粒细胞 多囊卵巢综合征
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