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体细胞多位点基因打靶技术的研究
1
作者
唐冬生
田允波
+1 位作者
顾万军
施家琦
《广东畜牧兽医科技》
2002年第4期32-35,共4页
利用多拷贝序列作为靶位点进行多位点基因打靶技术的研究。通过显微切割、菌落杂交、Southern杂交等方法获得人类D、G组染色体短臂多拷贝序列(DGMS),然后利用DGMS构建含Neo/TK基因正负选择系统的基因打靶载体。采用电穿孔、G418和GCV筛...
利用多拷贝序列作为靶位点进行多位点基因打靶技术的研究。通过显微切割、菌落杂交、Southern杂交等方法获得人类D、G组染色体短臂多拷贝序列(DGMS),然后利用DGMS构建含Neo/TK基因正负选择系统的基因打靶载体。采用电穿孔、G418和GCV筛选进行Neo基因的基因打靶,并经PCR、FISH定位、Neo基因表达等证实Neo基因定点整合到D、G组染色体短臂且表达,最终建立了一种有效的、多个安全位点的基因打靶技术。该技术可应用于体外细胞和动植物的转基因,甚至人类的基因治疗。
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关键词
体细胞
多位点基因打靶技术
多拷贝序列
基因
定点整合
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职称材料
题名
体细胞多位点基因打靶技术的研究
1
作者
唐冬生
田允波
顾万军
施家琦
机构
佛山科学技术学院农牧学院动物科学系
University of Arizona
出处
《广东畜牧兽医科技》
2002年第4期32-35,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30170737)
文摘
利用多拷贝序列作为靶位点进行多位点基因打靶技术的研究。通过显微切割、菌落杂交、Southern杂交等方法获得人类D、G组染色体短臂多拷贝序列(DGMS),然后利用DGMS构建含Neo/TK基因正负选择系统的基因打靶载体。采用电穿孔、G418和GCV筛选进行Neo基因的基因打靶,并经PCR、FISH定位、Neo基因表达等证实Neo基因定点整合到D、G组染色体短臂且表达,最终建立了一种有效的、多个安全位点的基因打靶技术。该技术可应用于体外细胞和动植物的转基因,甚至人类的基因治疗。
关键词
体细胞
多位点基因打靶技术
多拷贝序列
基因
定点整合
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
体细胞多位点基因打靶技术的研究
唐冬生
田允波
顾万军
施家琦
《广东畜牧兽医科技》
2002
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