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多交叉置换扩增结合纳米生物传感器检测伊氏李斯特菌的方法建立
1
作者
李慧
王毅
+1 位作者
王艳
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期605-612,共8页
目的应用多交叉置换扩增技术结合纳米生物传感器(multiple cross displacement amplification coupled with gold nanoparticle-based lateral flow biosensor,MCDA-LFB)建立一种快速、特异和灵敏的伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii,L.iv...
目的应用多交叉置换扩增技术结合纳米生物传感器(multiple cross displacement amplification coupled with gold nanoparticle-based lateral flow biosensor,MCDA-LFB)建立一种快速、特异和灵敏的伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii,L.ivanovii)检测方法,并对该方法进行评价。方法以L.ivanovii种特异性基因smcl为靶标设计引物,对引物进行最佳反应温度、灵敏度和特异性测试,并用模拟样本和实际样本进行评估。结果L.ivanovii-MCDA-LFB的最佳反应温度为64℃。在L.ivanovii和non-L.ivanovii菌种鉴定中,该方法特异性为100%。此外,L.ivanovii-MCDA-LFB在纯培养物和模拟污染粪便样本的灵敏度分别为10 fg/反应和6.8×10^(2) CFU/g。在195份野鼠粪便样本增菌培养物检测中,L.ivanovii-MCDA-LFB检测结果和传统培养法(ISO 11290-1)结果相同,且只需二次增菌液水煮模板即可检出。结论L.ivanovii-MCDA-LFB方法作为一种快速、灵敏和特异的诊断方法可应用于食品、医疗和科研领域。
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关键词
伊氏李斯特菌
多交叉置换扩增
纳米生物传感器
smcl基因
最低检测限
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职称材料
多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价
被引量：
2
2
作者
李慧
王毅
+3 位作者
王艳
李华
陈峥宏
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期99-104,共6页
目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼...
目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行最佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测。结果单增李斯特菌MCDA检测方法的最佳反应温度为61℃。单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍。对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法。结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测。
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关键词
单
增
李斯特菌
多交叉置换扩增
lmo
0733基因
最低检测限
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职称材料
四种单增李斯特菌常用核酸检测方法的评价与应用
被引量：
4
3
作者
纪顺师
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第12期1085-1091,1099,共8页
目的应用聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光PCR(Real-time PCR)、环介导等温扩增(LAMP)和多交叉置换扩增(MCDA)4种核酸检测方法,对单增李斯特菌进行检测,探索特异、灵敏、高效,且适用于肉类样本中单增李斯特菌检测的核酸检测方法。方法比...
目的应用聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光PCR(Real-time PCR)、环介导等温扩增(LAMP)和多交叉置换扩增(MCDA)4种核酸检测方法,对单增李斯特菌进行检测,探索特异、灵敏、高效,且适用于肉类样本中单增李斯特菌检测的核酸检测方法。方法比较文献报道的以单增李斯特菌特异性基因lmo0733作为靶标的4种核酸检测方法,评价这4种方法在特异性、灵敏度、检出速率方面的差异,并应用于单增李斯特菌模拟样本和猪肉样本中单增李斯特菌的检测。结果传统PCR、Real-time PCR、LAMP和MCDA方法都能准确检测单增李斯特菌,其中MCDA方法检测下限为10 fg/反应,且能在30 min内完成对样本核酸的检测,灵敏度和检出速率优于其它3种核酸诊断方法;MCDA方法对于模拟样本和实际样本的检测效率优于其它3种核酸检测方法和传统分离培养方法,能够提高样本检测的阳性率。结论MCDA方法作为一种特异、灵敏和高效的核酸检测方法,可用于肉制品中单增李斯特菌检测时的快速筛查,并能提高传统分离培养方法对标本中单增李斯特菌的阳性检出率。
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关键词
单
增
李斯特菌
聚合酶链式反应
实时荧光PCR
环介导等温
扩
增
多交叉置换扩增
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职称材料
题名
多交叉置换扩增结合纳米生物传感器检测伊氏李斯特菌的方法建立
1
作者
李慧
王毅
王艳
叶长芸
机构
山西医科大学汾阳学院病原生物学与检验教研室
首都儿科研究所实验中心
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期605-612,共8页
基金
国家重大传染病防治科技重大专项(No.2013ZX10004-101)
传染病预防控制国家重点实验室(No.2015SKLID507)
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所(No.2016ZZKTB09)联合资助。
文摘
目的应用多交叉置换扩增技术结合纳米生物传感器(multiple cross displacement amplification coupled with gold nanoparticle-based lateral flow biosensor,MCDA-LFB)建立一种快速、特异和灵敏的伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii,L.ivanovii)检测方法,并对该方法进行评价。方法以L.ivanovii种特异性基因smcl为靶标设计引物,对引物进行最佳反应温度、灵敏度和特异性测试,并用模拟样本和实际样本进行评估。结果L.ivanovii-MCDA-LFB的最佳反应温度为64℃。在L.ivanovii和non-L.ivanovii菌种鉴定中,该方法特异性为100%。此外,L.ivanovii-MCDA-LFB在纯培养物和模拟污染粪便样本的灵敏度分别为10 fg/反应和6.8×10^(2) CFU/g。在195份野鼠粪便样本增菌培养物检测中,L.ivanovii-MCDA-LFB检测结果和传统培养法(ISO 11290-1)结果相同,且只需二次增菌液水煮模板即可检出。结论L.ivanovii-MCDA-LFB方法作为一种快速、灵敏和特异的诊断方法可应用于食品、医疗和科研领域。
关键词
伊氏李斯特菌
多交叉置换扩增
纳米生物传感器
smcl基因
最低检测限
Keywords
Listeria ivanovii
multiple cross displace-ment amplification
lateral flow biosensor
smcl gene
limit of detection
分类号
R378.99 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价
被引量：
2
2
作者
李慧
王毅
王艳
李华
陈峥宏
叶长芸
机构
贵州医科大学基础医学院病原生物学微生物教研室
传染病预防控制国家重点实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期99-104,共6页
基金
国家重大传染病防治科技重大专项(No.2013ZX10004-101)、传染病预防控制国家重点实验室(No.2015SKLID507)和中国疾病预防控制中心传染病预防控制所(No.2016ZZKTB09)联合资助
文摘
目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行最佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测。结果单增李斯特菌MCDA检测方法的最佳反应温度为61℃。单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍。对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法。结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测。
关键词
单
增
李斯特菌
多交叉置换扩增
lmo
0733基因
最低检测限
Keywords
Listeria monocytogenes
multiple cross displacement amplification
lmo 0733 gene
limit of detection
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
四种单增李斯特菌常用核酸检测方法的评价与应用
被引量：
4
3
作者
纪顺师
叶长芸
机构
传染病预防控制国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第12期1085-1091,1099,共8页
基金
国家自然科学基金（No.31800004）
传染病预防国家重点实验室项目（No.2015SKLID507）
中国疾病预防控制中心传染病所自主课题(No.2016ZZKTB09)~~
文摘
目的应用聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光PCR(Real-time PCR)、环介导等温扩增(LAMP)和多交叉置换扩增(MCDA)4种核酸检测方法,对单增李斯特菌进行检测,探索特异、灵敏、高效,且适用于肉类样本中单增李斯特菌检测的核酸检测方法。方法比较文献报道的以单增李斯特菌特异性基因lmo0733作为靶标的4种核酸检测方法,评价这4种方法在特异性、灵敏度、检出速率方面的差异,并应用于单增李斯特菌模拟样本和猪肉样本中单增李斯特菌的检测。结果传统PCR、Real-time PCR、LAMP和MCDA方法都能准确检测单增李斯特菌,其中MCDA方法检测下限为10 fg/反应,且能在30 min内完成对样本核酸的检测,灵敏度和检出速率优于其它3种核酸诊断方法;MCDA方法对于模拟样本和实际样本的检测效率优于其它3种核酸检测方法和传统分离培养方法,能够提高样本检测的阳性率。结论MCDA方法作为一种特异、灵敏和高效的核酸检测方法,可用于肉制品中单增李斯特菌检测时的快速筛查,并能提高传统分离培养方法对标本中单增李斯特菌的阳性检出率。
关键词
单
增
李斯特菌
聚合酶链式反应
实时荧光PCR
环介导等温
扩
增
多交叉置换扩增
Keywords
Listeria monocytogenes
polymerase chain reaction
real-time fluorescence polymerase chain reaction
loop-mediated isothermal amplification
multiple cross displacement amplification
分类号
R378.99 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多交叉置换扩增结合纳米生物传感器检测伊氏李斯特菌的方法建立
李慧
王毅
王艳
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价
李慧
王毅
王艳
李华
陈峥宏
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
四种单增李斯特菌常用核酸检测方法的评价与应用
纪顺师
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
4
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