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马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究
被引量：
3
1
作者
乔军
才学鹏
+3 位作者
孟庆玲
景志忠
张艳
贾桂珍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期128-131,135,共5页
目的克隆马鹿布氏杆菌ML分离株25kDa外膜蛋白(Omp25)基因,并在大肠杆菌中表达。方法运用RT-PCR技术从马鹿布氏杆菌分离株中扩增出Omp25基因,将其克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定和遗传变异分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体...
目的克隆马鹿布氏杆菌ML分离株25kDa外膜蛋白(Omp25)基因,并在大肠杆菌中表达。方法运用RT-PCR技术从马鹿布氏杆菌分离株中扩增出Omp25基因,将其克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定和遗传变异分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中诱导表达。结果该基因全长642bp,编码213个氨基酸;其中前23个氨基酸残基构成信号肽。在推导的氨基酸序列中,存在两个跨膜区,但没有潜在的N-联糖基化位点。与GenBank中已经登录的布氏杆菌其他11个分离株相比,马鹿布氏杆菌分离株Omp25基因变异较小,以散在的点突变为主,Omp25基因核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99.1%-99.4%和99.2%-99.5%之间。转化重组质粒pETOMP25的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下,可表达出具有反应原性的目的蛋白,表达量占菌体蛋白的18.6%。结论马鹿布氏杆菌分离株与流产型布氏杆菌其它分离株Omp25基因同源性很高,可能是一个毒力较强的野毒株。
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关键词
马鹿布氏杆菌
25
kDa
外膜
蛋白
基因
克隆
序列分析
表达
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职称材料
布鲁菌OMP25基因重组山羊痘病毒的构建
被引量：
3
2
作者
魏凤
郭志儒
+1 位作者
陈创夫
乔军
《动物医学进展》
CSCD
2008年第4期6-9,共4页
将羊种布鲁菌外膜蛋白25(OMP25)基因插入到山羊痘病毒转移载体PGM-TK-I1L-GPT1启动子I1L的下游,构建重组山羊痘病毒转移载体。用脂质体转染法将重组转移载体与山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55共转染绵羊成纤维细胞,在细胞内同源重组。通...
将羊种布鲁菌外膜蛋白25(OMP25)基因插入到山羊痘病毒转移载体PGM-TK-I1L-GPT1启动子I1L的下游,构建重组山羊痘病毒转移载体。用脂质体转染法将重组转移载体与山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55共转染绵羊成纤维细胞,在细胞内同源重组。通过霉酚酸药物筛选、纯化,经PCR鉴定获得了重组山羊痘病毒。
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关键词
羊种布鲁菌
外膜蛋白25基因
重组山羊痘病毒
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职称材料
题名
马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究
被引量：
3
1
作者
乔军
才学鹏
孟庆玲
景志忠
张艳
贾桂珍
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室
塔里木农垦大学动物科技学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期128-131,135,共5页
文摘
目的克隆马鹿布氏杆菌ML分离株25kDa外膜蛋白(Omp25)基因,并在大肠杆菌中表达。方法运用RT-PCR技术从马鹿布氏杆菌分离株中扩增出Omp25基因,将其克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定和遗传变异分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中诱导表达。结果该基因全长642bp,编码213个氨基酸;其中前23个氨基酸残基构成信号肽。在推导的氨基酸序列中,存在两个跨膜区,但没有潜在的N-联糖基化位点。与GenBank中已经登录的布氏杆菌其他11个分离株相比,马鹿布氏杆菌分离株Omp25基因变异较小,以散在的点突变为主,Omp25基因核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99.1%-99.4%和99.2%-99.5%之间。转化重组质粒pETOMP25的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下,可表达出具有反应原性的目的蛋白,表达量占菌体蛋白的18.6%。结论马鹿布氏杆菌分离株与流产型布氏杆菌其它分离株Omp25基因同源性很高,可能是一个毒力较强的野毒株。
关键词
马鹿布氏杆菌
25
kDa
外膜
蛋白
基因
克隆
序列分析
表达
Keywords
wapiti＇s Brucella abortus
outer membrane protein
25
genes cloning
sequence analysis
expression
分类号
R378.5 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
布鲁菌OMP25基因重组山羊痘病毒的构建
被引量：
3
2
作者
魏凤
郭志儒
陈创夫
乔军
机构
石河子大学动物科技学院
出处
《动物医学进展》
CSCD
2008年第4期6-9,共4页
基金
新疆生产建设兵团博士基金(30560109)
文摘
将羊种布鲁菌外膜蛋白25(OMP25)基因插入到山羊痘病毒转移载体PGM-TK-I1L-GPT1启动子I1L的下游,构建重组山羊痘病毒转移载体。用脂质体转染法将重组转移载体与山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55共转染绵羊成纤维细胞,在细胞内同源重组。通过霉酚酸药物筛选、纯化,经PCR鉴定获得了重组山羊痘病毒。
关键词
羊种布鲁菌
外膜蛋白25基因
重组山羊痘病毒
Keywords
B. rnelitensis outside membrance protein
25
gene recombinant Goatpoxvirus
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
S852.614 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究
乔军
才学鹏
孟庆玲
景志忠
张艳
贾桂珍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
布鲁菌OMP25基因重组山羊痘病毒的构建
魏凤
郭志儒
陈创夫
乔军
《动物医学进展》
CSCD
2008
3
在线阅读
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职称材料
已选择
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