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EV71与CB3病毒VP1融合蛋白的构建表达与抗原性初步评价
1
作者
房华丽
王琴
+6 位作者
罗森
高翔
屠伟
田仁茂
刘雄
李涛
王慧
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2013年第6期583-586,共4页
目的构建pET-22b-ECVP1表达载体,在大肠杆菌中诱导表达肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇B3型(CB3)病毒VP1融合蛋白(ECVP1),并鉴定其抗原性。方法利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分别从EV71与CB3病毒基因组中扩增得到外壳蛋白VP1基因,...
目的构建pET-22b-ECVP1表达载体,在大肠杆菌中诱导表达肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇B3型(CB3)病毒VP1融合蛋白(ECVP1),并鉴定其抗原性。方法利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分别从EV71与CB3病毒基因组中扩增得到外壳蛋白VP1基因,经重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法拼接构建重组融合蛋白基因(ecvp1),将该片段连接到pET-22b表达载体上,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白,经Western blot鉴定其抗原性。结果pET-22b-ECVP1表达载体构建成功,融合蛋白相对分子量约为65 ku,Western blot分析表明,该融合蛋白能被抗EV71及抗CB3抗体特异识别。结论成功构建pET-22b-ECVP1表达质粒并诱导ECVP1融合蛋白表达,且融合蛋白具有良好的抗原性。
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关键词
肠道病毒7
1
型
柯萨奇B3病毒
外壳蛋白vp1
融合
蛋白
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职称材料
题名
EV71与CB3病毒VP1融合蛋白的构建表达与抗原性初步评价
1
作者
房华丽
王琴
罗森
高翔
屠伟
田仁茂
刘雄
李涛
王慧
机构
安徽医科大学
军事医学科学院微生物流行病研究所
军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2013年第6期583-586,共4页
基金
北京市自然科学基金(编号:7112107)
文摘
目的构建pET-22b-ECVP1表达载体,在大肠杆菌中诱导表达肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇B3型(CB3)病毒VP1融合蛋白(ECVP1),并鉴定其抗原性。方法利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分别从EV71与CB3病毒基因组中扩增得到外壳蛋白VP1基因,经重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法拼接构建重组融合蛋白基因(ecvp1),将该片段连接到pET-22b表达载体上,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白,经Western blot鉴定其抗原性。结果pET-22b-ECVP1表达载体构建成功,融合蛋白相对分子量约为65 ku,Western blot分析表明,该融合蛋白能被抗EV71及抗CB3抗体特异识别。结论成功构建pET-22b-ECVP1表达质粒并诱导ECVP1融合蛋白表达,且融合蛋白具有良好的抗原性。
关键词
肠道病毒7
1
型
柯萨奇B3病毒
外壳蛋白vp1
融合
蛋白
Keywords
enterovirus 7
1
coxsackievirus B3
vp
1
protein
fusion protein
分类号
R373.2 [医药卫生—病原生物学]
Q939.9 [生物学—微生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
EV71与CB3病毒VP1融合蛋白的构建表达与抗原性初步评价
房华丽
王琴
罗森
高翔
屠伟
田仁茂
刘雄
李涛
王慧
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2013
0
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