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木犀草素对哮喘患儿外周血单核细胞TNF-α和IL-6分泌的影响及机制研究 被引量:34
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作者 余洁 彭哲 +1 位作者 谢婷 莫运波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期1580-1583,1589,共5页
目的:本研究旨在分析木犀草素对哮喘患儿外周血单核细胞(PBMCs)促炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6分泌的影响及其可能的作用机制。方法:采集、分离24例缓解期过敏性哮喘患儿PBMCs,分别采用MTT法检测不同浓度(0.1、0.5、2 μmol/L... 目的:本研究旨在分析木犀草素对哮喘患儿外周血单核细胞(PBMCs)促炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6分泌的影响及其可能的作用机制。方法:采集、分离24例缓解期过敏性哮喘患儿PBMCs,分别采用MTT法检测不同浓度(0.1、0.5、2 μmol/L)木犀草素对其活性的影响,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测培养48 h后各组PBMCs培养上清液中TNF-α、IL-6的浓度,免疫印迹法检测PBMCs 细胞中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)和髓样分化因子88 (MyD88)蛋白表达水平的变化。结果:不同浓度的木犀草素对PBMCs细胞活性无明显影响,不同浓度木犀草素刺激PBMCs细胞后,PBMCs上清液中TNF-α、IL-6的浓度明显降低,其抑制作用呈线性相关;此外,TLR4、NF-κB和MyD88蛋白表达水平均较空白对照组明显降低( P <0.05)。结论:木犀草素可抑制哮喘患儿PBMCs促炎性细胞因子TNF-α、IL-6的分泌,其可能通过作用于TLR4/NF-κB信号通路发挥抗炎效应,对哮喘具有潜在的治疗作用。 展开更多
关键词 哮喘 外周血单核细胞 木犀草素 细胞因子
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钙离子载体对外周血单核细胞来源的树突状细胞的影响 被引量:8
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作者 吴军 王捷 +3 位作者 杨太成 赖晃文 郑文岭 王晓怀 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期52-53,89,共3页
目的:探讨钙离子载体(calcium ionophore,CI)对外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC)的影响。方法:分离健康献血者外周血单核细胞,分别加入重组人粒/单集落刺激因子(rhGM-CSF)100μg/L、rhGM-CSF 100μg/L+CI 10μg/L及rhGM-CSF+CI各100... 目的:探讨钙离子载体(calcium ionophore,CI)对外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC)的影响。方法:分离健康献血者外周血单核细胞,分别加入重组人粒/单集落刺激因子(rhGM-CSF)100μg/L、rhGM-CSF 100μg/L+CI 10μg/L及rhGM-CSF+CI各100μg/L。体外培养40 h后,于光镜及电镜下观察细胞的形态、流式细胞仪检测细胞的表面标志,MTT比色法检测上述分子对自体T细胞的刺激增殖作用。结果:外周血单核细胞在GM-CSF+CI各100μg/L的条件下培养40 h,就可看到典型的DC形态,其表面CD14分子表达减少,HLA- DR、CD40、CD83及CD86分子的表达明显增高,且具有明显 刺激自体T细胞增殖的能力。结论:CI有显著加速GM-CSF 诱导的外周血单核细胞向DC转化的作用。 展开更多
关键词 钙离子载体 外周血 单核细胞 树突状细胞
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明胶法分离外周血单核细胞 被引量:9
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作者 雷著斌 秦永文 +1 位作者 沈茜 荆清 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期1039-1040,共2页
外周血单核细胞在动脉粥样硬化(AS)形成中起着重要的作用,但人们对AS中单核细胞作用的机制仍不完全清楚,甚至有相矛盾的文献报道,这可能是由于单核细胞提纯困难的缘故。单核细胞大约占外周血单个核细胞的10%~20%[1]。以往单核细胞的提... 外周血单核细胞在动脉粥样硬化(AS)形成中起着重要的作用,但人们对AS中单核细胞作用的机制仍不完全清楚,甚至有相矛盾的文献报道,这可能是由于单核细胞提纯困难的缘故。单核细胞大约占外周血单个核细胞的10%~20%[1]。以往单核细胞的提纯方法经常会造成高比例的淋巴细胞污... 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 外周血 单核细胞 明胶法
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人外周血单核细胞3种不同转染方法的比较 被引量:6
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作者 叶双梅 阚淳一 +5 位作者 杨丽兰 杨洁 马全富 吴明富 卢运萍 王世宣 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期196-199,共4页
目的采用3种不同方法转染原代人外周血单核细胞,以寻找一种简便、高效的单核细胞转染方法。方法采用人淋巴细胞分离液从健康人外周血中分离出单个核细胞,锥虫蓝拒染法检测细胞存活率。单个核细胞在孔板内培养2 h后吸弃悬浮的淋巴细胞,... 目的采用3种不同方法转染原代人外周血单核细胞,以寻找一种简便、高效的单核细胞转染方法。方法采用人淋巴细胞分离液从健康人外周血中分离出单个核细胞,锥虫蓝拒染法检测细胞存活率。单个核细胞在孔板内培养2 h后吸弃悬浮的淋巴细胞,获得贴壁的单核细胞。分别采用Lipofectamine 2000介导载体质粒(PEGF-N1),慢病毒(NC-GFP-LV)及腺病毒(Adv-GFP)3种方法转染单核细胞,48 h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,并收集细胞上流式细胞仪检测GFP阳性细胞的比例。结果通过人淋巴细胞分离液分离的单个核细胞的活细胞率>95%,获得的单核细胞数量多,贴壁牢,形态均一。转染48 h后,Lipofectamine 2000介导载体质粒及慢病毒转染的单核细胞无绿色荧光,流式细胞仪检测GFP阳性细胞均<1%,腺病毒转染的单核细胞可见较强绿色荧光,GFP阳性细胞约占10%。结论腺病毒,而不是Lipofectamine 2000或慢病毒,能有效地将外源基因导入单核细胞内表达。 展开更多
关键词 外周血 单核细胞 腺病毒 慢病毒 基因转染
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白细胞介素21及白细胞介素12单用或联合应用对子宫内膜癌患者外周血单核细胞抗肿瘤活性的影响 被引量:5
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作者 田永菊 崔保霞 +3 位作者 马道新 张妍 侯菲 张文静 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期292-298,共7页
目的观察白细胞介素(IL)21及IL12单用或联合应用对子宫内膜癌患者外周血单核细胞(PBMCs)抗肿瘤活性的影响。方法体外分离子宫内膜癌患者外周血中的PBMCs,用低浓度IL2维持培养,经不同的刺激条件(对照组、抗IL21组、IL21组、IL12组和IL21+... 目的观察白细胞介素(IL)21及IL12单用或联合应用对子宫内膜癌患者外周血单核细胞(PBMCs)抗肿瘤活性的影响。方法体外分离子宫内膜癌患者外周血中的PBMCs,用低浓度IL2维持培养,经不同的刺激条件(对照组、抗IL21组、IL21组、IL12组和IL21+IL12联合组)诱导培养72 h后,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测PBMCs的细胞毒活性,流式细胞术检测CD4+CD25+FOXP3+T调节性细胞(Treg细胞)和CD4+IL17A+T辅助17细胞(Th17细胞)的含量,细胞活性检测试剂-8(CCK-8)法检测PBMCs的增殖能力,流式细胞术检测PBMCs的凋亡情况。结果与对照组相比,IL21及IL12可显著增强PBMCs细胞毒活性,IL21+IL12联合组的效果优于单用IL21组和IL12组。IL21及IL12可显著降低Treg细胞含量,抑制PBMCs凋亡。不同细胞因子处理组对Th17细胞的含量和PBMCs的增殖能力均无显著影响。结论 IL21及IL12可增强子宫内膜癌患者PBMCs的细胞毒活性,联合应用效果更明显。抑制Treg细胞的分化和PBMCs的凋亡可能为其机制之一,而与Th17细胞的分化无关。 展开更多
关键词 细胞因子 外周血单核细胞 细胞毒活性 TREG细胞 TH17细胞
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外周血单核细胞hFgl2蛋白表达与不同临床类型肝病的关系 被引量:5
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作者 玉艳红 原彤彤 +3 位作者 黄力毅 吴继周 李国坚 吴健林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期436-438,443,共4页
目的探讨人纤维介素蛋白-2凝血酶原酶(hFgl2)在慢性乙型肝炎及肝癌患者外周血单核细胞中的表达及其与慢性乙型肝炎病情严重程度之间的关系。方法测定慢性乙型肝炎轻、中、重度,慢性重型乙型肝炎,肝癌患者共78例外周血单核细胞hFgl2蛋白... 目的探讨人纤维介素蛋白-2凝血酶原酶(hFgl2)在慢性乙型肝炎及肝癌患者外周血单核细胞中的表达及其与慢性乙型肝炎病情严重程度之间的关系。方法测定慢性乙型肝炎轻、中、重度,慢性重型乙型肝炎,肝癌患者共78例外周血单核细胞hFgl2蛋白的表达进行比较,并将其与配对患者谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及总胆红素(TBiL)行相关分析。结果hFgl2蛋白可以表达于外周血单核细胞,在慢重肝组和肝癌组表达高于对照组和慢乙肝组,而慢重肝组表达高于肝癌组。慢乙肝重度组hFgl2蛋白的表达与其ALT、AST及TBiL成正相关。结论 hFgl2蛋白可以表达于外周血单核细胞并呈现随着肝病严重程度增加而表达升高的趋势。 展开更多
关键词 hFgl2 慢性乙型肝炎 肝癌 外周血单核细胞
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^(99)Tc-MDP对类风湿性关节炎患者外周血单核细胞产生细胞因子的影响 被引量:15
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作者 吴永刚 马琦琳 +3 位作者 刘国峰 何建军 苏见知 支科 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期173-175,共3页
目的 :探讨“云克”(99Tc MDP)治疗类风湿性关节炎 (RA)的免疫机制。方法 :采用ELISA双抗体夹心法 ,观察“云克”体外对RA患者外周血单核细胞 (PBMC)产生白介素 1(IL 1)和可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)的影响。结果 :“云克”有抑制RA患... 目的 :探讨“云克”(99Tc MDP)治疗类风湿性关节炎 (RA)的免疫机制。方法 :采用ELISA双抗体夹心法 ,观察“云克”体外对RA患者外周血单核细胞 (PBMC)产生白介素 1(IL 1)和可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)的影响。结果 :“云克”有抑制RA患者IL 1的分泌及细菌脂多糖 (LPS)的促分泌作用 ,并对可溶性白介素 2受体的自发分泌及植物血素 (PHA)诱导分泌均有抑制作用。结论 :“云克”对RA的治疗机制可能与其降低IL 1和sIL 展开更多
关键词 ^99TC-MDP 类风湿性关节炎 外周血 单核细胞 细胞因子 影响 细胞介素1 细胞介素-2 受体
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外周血单核细胞表达PEDF在2型糖尿病视网膜病变中的意义 被引量:8
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作者 吕秋菊 唐喜香 +4 位作者 文哲瑶 王曼曼 穆攀伟 舒囧 陈燕铭 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期114-119,共6页
【目的】色素上皮衍生因子(PEDF)通过抗血管增生、抗炎、抗氧化应激等影响糖尿病视网膜病变(DR)发生发展,而单核/巨噬细胞(CD14+)与慢性炎症关系密切。本研究拟通过观察外周血CD14+细胞中PEDF的表达水平,为进一步探讨DR发病机制提供线... 【目的】色素上皮衍生因子(PEDF)通过抗血管增生、抗炎、抗氧化应激等影响糖尿病视网膜病变(DR)发生发展,而单核/巨噬细胞(CD14+)与慢性炎症关系密切。本研究拟通过观察外周血CD14+细胞中PEDF的表达水平,为进一步探讨DR发病机制提供线索。【方法】选取2011年10月至2013年4月在我院内分泌科住院确诊为2型糖尿病患者(DM组)108例,分为无糖尿病视网膜病变组(NDR组)52例和糖尿病视网膜病变组(DR组)56例,同期健康体检者作为对照组(NC组)52例。收集患者外周血白细胞及其分类细胞计数相关指标;密度梯度离心法收集患者PBMC,免疫磁珠分离法提取CD14+细胞;剩余PBMC提取总蛋白,western blot比较总PBMC(t PBMC)与分离掉CD14+细胞的PBMC[PBMC(ex CD14+)]中PEDF蛋白表达水平。【结果】DR组和NDR组单核细胞绝对值较NC组升高(P<0.05),但DR组和NDR组间单核细胞绝对值的差异无统计学意义(P>0.05);DR组淋巴细胞绝对值较NDR组明显减低(P<0.05);与t PBMC相比,PBMC(ex CD14+)中PEDF蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。【结论】DR患者外周血单核细胞数量增加。单核细胞是PBMC中表达PEDF的主要细胞。 展开更多
关键词 色素上皮衍生因子 糖尿病视网膜病变 外周血单个核细胞 单核/巨噬细胞
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rhG-CSF动员的骨髓和外周血干细胞混合移植物首次采集时供者外周血单核细胞计数反映混合采集物中CD34^+细胞含量 被引量:6
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作者 常英军 赵翔宇 +1 位作者 霍明瑞 黄晓军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期146-150,共5页
本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的骨髓和外周血干细胞混合移植健康供者首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量与骨髓/外周血混合采集物中CD34+细胞数量的关系。对70名亲缘健康供者均皮下注射rhG-CSF 5μg/(kg.d),连... 本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的骨髓和外周血干细胞混合移植健康供者首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量与骨髓/外周血混合采集物中CD34+细胞数量的关系。对70名亲缘健康供者均皮下注射rhG-CSF 5μg/(kg.d),连续5天。第4天和第5天分别采集骨髓和外周血干细胞。首次干细胞采集时用EX2100血细胞分析仪检测供者外周血细胞计数,同时应用流式细胞仪测定骨髓和外周血混合采集物中的CD34+细胞数量。结果表明:rhG-CSF动员的70例供者首次干细胞采集时外周血单核细胞的数量为(1.15±0.60)×109/L;骨髓和外周血采集物中的CD34+细胞总量分别是(5.85±2.93)×107和(1.33±0.77)×108;骨髓和外周血混合采集物的CD34+细胞总量是(1.92±0.86)×108。Pearson和Spearman分析显示首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数(×109/L)与骨髓采集物中CD34+细胞的总量(相关系数:r=0.265,p=0.027)、外周血采集物中CD34+细胞总量(r=0.340,p=0.004)以及混合移植物中CD34+细胞的总量(r=0.398,p=0.001)均存在显著的相关性;多因素分析表明,首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数与骨髓采集物、外周血采集物以及混合移植物中CD34+细胞的总量均呈正相关关系(p值分别为0.027、0.004和0.001)。首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量对混合移植物中CD34+细胞总量预测的敏感性是71%,特异性是70%(p=0.007)。结论:rhG-CSF动员的骨髓和外周血混合移植健康供者首次干细胞采集时外周血单核细胞计数可有效预测输注给受者的CD34+细胞总量即采集效果。 展开更多
关键词 细胞集落刺激因子 骨髓移植物 外周血采集物 CD34^+细胞 单核细胞
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外周血单核细胞绝对计数对慢性淋巴细胞白血病预后判断的价值 被引量:6
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作者 马小雯 董春霞 +4 位作者 陈剑芳 王梅芳 张睿娟 张建华 杨林花 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第4期581-585,共5页
目的通过分析慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)患者的临床、实验室及随访资料探讨外周血单核细胞绝对计数(absolute monocyte count,AMC)对CLL的预后价值。方法对2002年1月至2017年12月收住山西医科大学第二医院... 目的通过分析慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)患者的临床、实验室及随访资料探讨外周血单核细胞绝对计数(absolute monocyte count,AMC)对CLL的预后价值。方法对2002年1月至2017年12月收住山西医科大学第二医院的54例慢性淋巴细胞白血病患者的临床特点、实验室检查、治疗效果、预后进行分析,探讨影响CLL的预后因素。结果 54例患者中,男女比例为2∶1,中位年龄为64岁;其中Binet A期8例,B期25例,C期21例;以疾病进展作为终点得到外周血AMC的受试者工作特征(receiver operating characteristics,ROC)曲线,AMC的截点值为0.67×109/L,曲线的最佳灵敏度为0.710,特异度为0.783,曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.771(95%CI:0.644~0.899)。以0.67×109/L为界限,分为高AMC组和低AMC组,低AMC组的患者无进展生存期优于高AMC组(P<0.05),但高AMC组与低AMC组之间总生存期差异无统计学意义(P=0.170)。Cox回归结果表明疾病分期为C期(P=0.038)是总生存期的独立影响因素,AMC>0.67×109/L(P=0.004)及疾病分期为C期(P=0.049)是无进展生存期的独立影响因素。结论初诊时较高的AMC与CLL较快的疾病进展有关,可能为CLL的预后判断提供新依据。 展开更多
关键词 慢性淋巴细胞白血病 临床特征 外周血单核细胞绝对计数 预后
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聚肌胞免疫刺激下仔猪外周血单核细胞的基因表达分析 被引量:3
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作者 王彦平 王怀中 +3 位作者 郭建凤 王海飞 刘剑锋 王继英 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期63-69,共7页
聚肌胞(Poly I:C)是一种天然双链RNA(Double strand RNA,dsRNA)的拟似物,能够模拟病毒感染后所形成的dsRNA及刺激机体产生抗病毒免疫反应。文章以抗病力存在差异的大蒲莲和长白仔猪为研究对象,分离外周血单核细胞(Peripheral blood mono... 聚肌胞(Poly I:C)是一种天然双链RNA(Double strand RNA,dsRNA)的拟似物,能够模拟病毒感染后所形成的dsRNA及刺激机体产生抗病毒免疫反应。文章以抗病力存在差异的大蒲莲和长白仔猪为研究对象,分离外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),在20μg/m L的Poly I:C的免疫刺激下体外培养24 h,对影响免疫应答过程中的7个细胞因子(IRF3、IL6、IL8、IL10、TNFα、IFNγ和IFNα)和3个模式识别受体(TLR3、TLR4和RIG1)利用实时荧光定量PCR检测Poly I:C免疫刺激组相对于对照组的基因表达变化倍数。结果表明:检测的大部分细胞因子和受体(6个)表达量变化倍数很大,其中3种白细胞介素IL6、IL8和IL10免疫刺激变化倍数最大,平均变化倍数分别为20.71、10.87和5.18倍。对不同个体和品种间的比较发现,不仅大蒲莲和长白两品种间(大蒲莲猪的变化倍数平均高于长白猪)而且同品种的3头全同胞仔猪间对Poly I:C免疫刺激的应答也存在较大的变化。文章利用Poly I:C体外模拟dsRNA对PBMC的感染,为下一步筛选仔猪对Poly I:C刺激的免疫应答基因及鉴定大蒲莲猪特殊的抗性基因奠定了基础。 展开更多
关键词 聚肌胞 外周血单核细胞 细胞因子 模式识别受体
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糖尿病肾病尿毒症患者外周血单核细胞TLR4的表达及其与血浆MCP-1浓度的关系 被引量:7
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作者 李曼丽 甘华 谯林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期848-850,共3页
目的:探讨外周血单核细胞TLR4的表达及其与糖尿病肾病的关系。方法:分别用RT-PCR和流式细胞术测定外周血单核细胞TLR4 mRNA和蛋白的表达;用ELISA测定血浆MCP-1的浓度。结果:糖尿病肾病尿毒症患者外周血单核细胞TLR4的表达较健康对照增加... 目的:探讨外周血单核细胞TLR4的表达及其与糖尿病肾病的关系。方法:分别用RT-PCR和流式细胞术测定外周血单核细胞TLR4 mRNA和蛋白的表达;用ELISA测定血浆MCP-1的浓度。结果:糖尿病肾病尿毒症患者外周血单核细胞TLR4的表达较健康对照增加,外周血单核细胞TLR4蛋白的表达与血浆MCP-1浓度呈正相关。结论:糖尿病肾病尿毒症患者外周血单核细胞TLR4的表达上调,并且与糖尿病肾病的发病有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 TOLL样受体4 外周血单核细胞 MCP-1
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来源于人外周血单核细胞的树突状细胞感染rAAV-HBsAg后的功能改变 被引量:6
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作者 胡贵方 吴小兵 +2 位作者 俞守义 康禹 侯云德 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第7期696-698,701,共4页
目的观察人外周血单核细胞来源树突状细胞(DCs)经重组腺相关病毒(rAAV)载体介导乙肝表面抗原(HBsAg)基因感染后的功能改变。方法采用ELISA试剂盒检测感染rAAV-HBsAg后的DCs (rAAV-HBsAg-DC)分泌IL-12水平以及rAAV-HBsAg-DCs与淋巴细胞... 目的观察人外周血单核细胞来源树突状细胞(DCs)经重组腺相关病毒(rAAV)载体介导乙肝表面抗原(HBsAg)基因感染后的功能改变。方法采用ELISA试剂盒检测感染rAAV-HBsAg后的DCs (rAAV-HBsAg-DC)分泌IL-12水平以及rAAV-HBsAg-DCs与淋巴细胞共孵育后上清中γ-干扰素(IFN-γ)的含量;采用混合白细胞反应(MLR)检测rAAV- HBsAg感染前后DCs刺激同种异体淋巴细胞的增殖能力;用FACSort流式细胞仪检测rAAV-HBsAg-DCs表面分子CD80、CD83、CD86和HLA-DR的变化。结果rAAV-HBsAg感染可促进DCs分泌IL-12(P<0.05),感染后的DCs刺激淋巴细胞分泌IFN-γ的水平显著提高(P<0.01),感染前后的DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖能力及其特征性表面分子无明显改变。结论rAAV介导HBsAg基因感染的DCs能诱发淋巴细胞朝Th1型细胞分化,且不明显改变DCs的表型和刺激淋巴细胞增值的功能,rAAV载体介导HBsAg基因体外遗传修饰的DCs可以进一步用于乙型肝炎的免疫治疗研究。 展开更多
关键词 外周血单核细胞 树突状细胞 感染 重组腺相关病毒 乙肝表面抗原
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人髓样细胞触发性受体-1在急性梗阻性化脓性胆管炎外周血单核细胞中的表达 被引量:6
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作者 廖锐 刘作金 +3 位作者 龚建平 魏思东 徐发良 陈蓁臻 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2179-2181,共3页
目的研究髓样细胞触发性受体(TREM)-1在急性梗阻性化脓性胆管炎(AOSC)患者外周血单核细胞(PBMC)中表达的规律及其临床意义。方法分别收集36例AOSC患者(实验组)和40例正常人(对照组)外周血单核细胞,以半定量RT-PCR检测单核细胞中TREM-1 m... 目的研究髓样细胞触发性受体(TREM)-1在急性梗阻性化脓性胆管炎(AOSC)患者外周血单核细胞(PBMC)中表达的规律及其临床意义。方法分别收集36例AOSC患者(实验组)和40例正常人(对照组)外周血单核细胞,以半定量RT-PCR检测单核细胞中TREM-1 mRNA表达;免疫细胞化学检测单核细胞中TREM-1蛋白表达;ELISA检测患者外周血中TNF-表达水平,免疫透射比浊法测C反应蛋白。结果对照组和实验组TREM-1 mRNA半定量比值分别为0.457±0.053和1.007±0.252(P<0.05)。免疫细胞化学观察结果示实验组TREM-1蛋白阳性表达率与对照组之间差异显著(P<0.01)。实验组TNF-和C反应蛋白水平均高于对照组(P<0.01)。结论人TREM-1在急性梗阻性化脓性胆管炎发病初表达明显升高,提示TREM-1在急性梗阻性化脓性胆管炎的发生中可能起重要作用。 展开更多
关键词 髓样细胞触发性受体-1 急性梗阻性化脓性胆管炎 外周血单核细胞 基因表达
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人外周血CD68^+单核细胞体外的分选及诱导分化为破骨细胞 被引量:8
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作者 曾润铭 金大地 张忠民 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第5期585-588,共4页
目的建立高纯度人活性破骨细胞方法,用于对破骨细胞生物化学和分子生物学的研究。方法用免疫磁珠法在人类外周血单核细胞中分选出CD68+细胞,用流式细胞仪分析分选效能,体外在10-8 mol/L地塞米松及25 μg/L巨噬细胞集落刺激因子的培养条... 目的建立高纯度人活性破骨细胞方法,用于对破骨细胞生物化学和分子生物学的研究。方法用免疫磁珠法在人类外周血单核细胞中分选出CD68+细胞,用流式细胞仪分析分选效能,体外在10-8 mol/L地塞米松及25 μg/L巨噬细胞集落刺激因子的培养条件下用16 μg/L可溶性核因子κB受体活化子配体诱导(s-RANKL)分化,用降钙素受体抗体免疫组化染色及抗酒石酸磷酸酶染色鉴定,扫描电镜观察骨片贴壁细胞及骨吸收陷窝。结果分选获得CD68+单核细胞纯度为(93.06±0.61)%(n=4),经核因子κB受体活化子配体诱导后降钙素受体抗体免疫组化染色阳性,抗酒石酸磷酸酶染色,扫描电镜观察有骨吸收陷窝形成。结论人外周血单核细胞中CD68+细胞是破骨前体细胞,在RANKL在诱导下分化为成熟破骨细胞。 展开更多
关键词 外周血 CD68^ 单核细胞 分选 诱导分化 破骨细胞 免疫磁珠
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应用流式细胞分选技术分离人外周血原代单核细胞 被引量:5
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作者 陈媛 巩伟丽 +4 位作者 湛小燕 卓海龙 张飒 戴倩倩 李涛 《科学技术与工程》 北大核心 2012年第24期5985-5988,共4页
巨噬细胞是机体重要的免疫细胞,具有免疫调节、抗感染和抗肿瘤等重要功能。快速、有效地分离得到高纯度的人外周血单核细胞,是研究巨噬细胞功能的前提。利用细胞大小及胞内颗粒度属性对单核细胞与其他白细胞组分进行区分。通过流式细胞... 巨噬细胞是机体重要的免疫细胞,具有免疫调节、抗感染和抗肿瘤等重要功能。快速、有效地分离得到高纯度的人外周血单核细胞,是研究巨噬细胞功能的前提。利用细胞大小及胞内颗粒度属性对单核细胞与其他白细胞组分进行区分。通过流式细胞分选,获得了较高纯度单核细胞。单核细胞表面标志物CD14染色分析显示,该方法对单核细胞的分选效率达85%以上。进一步实验证明,分选得到的单核细胞能够在体外正常分化为巨噬细胞。 展开更多
关键词 外周血 原代单核细胞 流式分选
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猪外周血单核细胞来源的树突状细胞体外诱导培养 被引量:3
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作者 刘芳 乔艳艳 +4 位作者 薛洋 杜芳芳 张俊 张红英 王学兵 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第3期588-592,共5页
为建立猪外周血单核细胞来源的树突状细胞(Mo DC)体外培养模型,从猪外周新鲜血液中分离外周血单核细胞(PBMC),通过贴壁法获得树突状细胞前体细胞,采用重组猪的集落共刺激因子(rp GM-CSF)和白细胞介素4(rp IL-4)双因子诱导及脂多糖(LPS)... 为建立猪外周血单核细胞来源的树突状细胞(Mo DC)体外培养模型,从猪外周新鲜血液中分离外周血单核细胞(PBMC),通过贴壁法获得树突状细胞前体细胞,采用重组猪的集落共刺激因子(rp GM-CSF)和白细胞介素4(rp IL-4)双因子诱导及脂多糖(LPS)刺激成熟法,收集不同时间段的细胞,利用扫描电子显微镜观察其形态,流式细胞分析仪检测表面分子表达率及其对FITC-dextran的吞噬能力,混合淋巴细胞反应检测细胞对同种异体T细胞的刺激能力。结果表明,经体外诱导的细胞具有典型的树突状形态;经脂多糖刺激的树突状细胞表型分子CD1a、CD80、CD86、SLAII、CD172a与未经刺激的树突状细胞有明显增高,其吞噬能力有所下降,刺激同种异体T淋巴细胞的能力增强。本研究成功建立了猪Mo DC的体外诱导培养方法,为进一步研究其在机体免疫调节和抗病毒感染中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 外周血单核细胞 猪树突状细胞 表型分子 诱导培养
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CD1s在Graves病患者外周血淋巴细胞及单核细胞中的表达 被引量:3
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作者 陈吉海 王坚 +3 位作者 夏欣一 杨滨 顾萍 李洁 《医学研究生学报》 CAS 2009年第5期500-502,共3页
目的:CD1s是一种可以识别脂质抗原的特殊分子,在多种自身免疫病中发挥了重要作用。本实验研究Graves病(GD)患者外周血淋巴细胞及单核细胞中CD1s(CD1a、CD1b、CD1c、CD1d)的表达。方法:取33例GD患者作为试验组,另取17例正常人为对照组,... 目的:CD1s是一种可以识别脂质抗原的特殊分子,在多种自身免疫病中发挥了重要作用。本实验研究Graves病(GD)患者外周血淋巴细胞及单核细胞中CD1s(CD1a、CD1b、CD1c、CD1d)的表达。方法:取33例GD患者作为试验组,另取17例正常人为对照组,用流式细胞仪检测其外周血淋巴细胞和单核细胞中CD1s+表达细胞的百分数,并同时使用微量放射免疫法检测GD患者的甲状腺功能(FT3、FT4、TSH)。结果:GD患者外周血淋巴细胞及单核细胞中CD1a+表达的细胞百分数较对照组显著升高(P<0.05),而CD1b+、CD1c+及CD1d+表达的细胞百分数与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。CD1c+与FT3、FT4间呈显著正相关。结论:部分CD1s在GD患者中的表达较正常对照组升高,这将为我们探究GD的发病机制提供了一条新的途径。 展开更多
关键词 CD1 甲状腺机能亢进 外周血 淋巴细胞 单核细胞
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血细胞分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞方法探讨 被引量:3
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作者 孙晓梅 曹春渝 +5 位作者 高家红 黄璋琼 陆彩霞 陈瑜 陈洁 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第6期424-427,共4页
目的使用COBE Spectra血液成分分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞(PBMCs),继而可从中分离得到外周血造血干细胞(PBSC),为进一步利用猕猴开展免疫学研究、基因治疗提供足够的目的细胞,探讨采集的关键技术,建立安全、有效的采集... 目的使用COBE Spectra血液成分分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞(PBMCs),继而可从中分离得到外周血造血干细胞(PBSC),为进一步利用猕猴开展免疫学研究、基因治疗提供足够的目的细胞,探讨采集的关键技术,建立安全、有效的采集方法。方法体重为4~5 kg的实验猕猴5只,采集前一个月内分3次进行自体或异体血液于4℃储备共120 mL,用于采集时填充管路。5只猴采集前接受rhGM-CSF 20μg/kg皮下注射动员4~5 d,麻醉动物后行股动脉穿刺,选择自动外周血干细胞收集程序(Auto-PBSC)进行采集。采集结束后管路中血液以10 mL/min回输给动物3~5 min。结果生长因子连续注射第4天外周血白细胞数增至最高,收获细胞数量随循环血量和采集次数增加而增多。经动员的所有猴能够采集到需要的PBMC,最多达9.9×108,采集次数1~3次,循环血量达750~1420 mL,实验结束后1只猕猴因心脏衰竭死亡。结论人用血细胞分离机可用于4~5 kg实验猕猴PBMC的大量采集。由于动物不同于人体,为保证采集成功需要选用适合于猕猴的程序,采集前做好储血和生长因子动员准备,稳定的麻醉保定,提高抗凝剂比例,积极处理并发症是关键。 展开更多
关键词 实验猕猴 外周血单核细胞 造血干细胞 采集
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民猪外周血单核细胞实时荧光定量PCR内参基因的筛选 被引量:3
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作者 马红 刘宇 +4 位作者 汪亮 王文涛 吴赛辉 何鑫淼 刘娣 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期3426-3433,共8页
民猪是能够适应东北地区寒冷环境的地方猪种,但目前对其环境适应性相关基因的研究较少,也没有确定适合此研究所需的实时荧光定量PCR的内参基因。因此,本试验通过研究常用的12个内参基因(B2M、ACTB、RPL11、RPL4、YWHAZ、GAPDH、HPRT1、S... 民猪是能够适应东北地区寒冷环境的地方猪种,但目前对其环境适应性相关基因的研究较少,也没有确定适合此研究所需的实时荧光定量PCR的内参基因。因此,本试验通过研究常用的12个内参基因(B2M、ACTB、RPL11、RPL4、YWHAZ、GAPDH、HPRT1、SDHA、HMBS、IDH3B、TUBB2B和TBP1)在不同环境温度下民猪外周血单核细胞中的表达稳定性,旨在确定合适的内参基因进行相关研究。分别在-25、5、10和30℃采集3头民猪耳静脉血分离出单核细胞,利用geNorm、NormFinder、BestKeeper 3种软件分析12个候选内参基因的Ct值,筛选出表达稳定的基因作为内参基因。经geNorm和NormFinder计算获得各候选基因的M值发现,12个候选基因的表达均相对稳定,而BestKeeper的分析则显示ACTB、GAPDH、SDHA、HPRT1、TBP1、YWHAZ基因的SD值均<1,可用作本研究条件下的内参基因,而另外6个基因SD值则>1,不符合作为内参基因的标准。综合3种分析的结果,在本研究条件下,TBP1基因的稳定性最高,ACTB、GAPDH、SDHA、HPRT1和YWHAZ基因也符合作为内参基因的标准,都可研究在不同环境温度下民猪外周血单核细胞中基因表达时作为内参基因。 展开更多
关键词 民猪 外周血单核细胞 环境温度 实时荧光定量PCR 内参基因
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