为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得...为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得的fiber-2蛋白制备疫苗,并以7日龄无特定病原(specific pathogen free,SPF)鸡为免疫对象,采用琼脂凝胶免疫扩散试验(agar gel precipitation,AGP)测定抗体效价,并开展攻毒保护试验。结果显示:重组表达载体pET-30a-fiber-2构建成功,fiber-2蛋白为部分可溶性表达;免疫后,SPF鸡体内产生的抗体效价为1∶2~1∶16,且保护效率达到100%。结果表明,该研究成功利用原核表达系统高效表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,为禽腺病毒相关亚单位疫苗的研发提供新的思路。展开更多
禽腺病毒血清4型(FAdV-4)引起的禽肝炎-心包积液综合征已严重危害我国养禽业的发展,迫切需要深入了解FAdV-4的致病机制并制定有效的防控方案。论文旨在利用高通量测序技术分析禽腺病毒血清4型感染鸡肝癌(Leghorn male hepatocellular,L...禽腺病毒血清4型(FAdV-4)引起的禽肝炎-心包积液综合征已严重危害我国养禽业的发展,迫切需要深入了解FAdV-4的致病机制并制定有效的防控方案。论文旨在利用高通量测序技术分析禽腺病毒血清4型感染鸡肝癌(Leghorn male hepatocellular,LMH)细胞后差异表达的mRNA,以探究mRNA在FAdV-4感染过程中的作用及其调控机制。结果显示,与对照组相比,FAdV-4感染48 h共筛选到2604个上调的差异表达基因,2883个下调的差异表达基因。其中,GNB3、NECTIN4、SFRP4、FABP2、PLPP3、GALR1L和MBL 2等基因之前并没有被报道过与FAdV-4感染相关。通过GO和KEGG分析得知,差异表达基因主要富集在从细胞表面位点和信号受体结合至细胞周期调节、MAPK信号通路、细胞黏附分子作用等;其中,显著下调的差异基因还富集到多种代谢途径中,提示病毒感染会影响宿主细胞的代谢水平。本研究为深入解析FAdV-4感染宿主细胞的致病机制提供了相关的理论基础及科学依据。展开更多
文摘为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得的fiber-2蛋白制备疫苗,并以7日龄无特定病原(specific pathogen free,SPF)鸡为免疫对象,采用琼脂凝胶免疫扩散试验(agar gel precipitation,AGP)测定抗体效价,并开展攻毒保护试验。结果显示:重组表达载体pET-30a-fiber-2构建成功,fiber-2蛋白为部分可溶性表达;免疫后,SPF鸡体内产生的抗体效价为1∶2~1∶16,且保护效率达到100%。结果表明,该研究成功利用原核表达系统高效表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,为禽腺病毒相关亚单位疫苗的研发提供新的思路。
文摘禽腺病毒血清4型(FAdV-4)引起的禽肝炎-心包积液综合征已严重危害我国养禽业的发展,迫切需要深入了解FAdV-4的致病机制并制定有效的防控方案。论文旨在利用高通量测序技术分析禽腺病毒血清4型感染鸡肝癌(Leghorn male hepatocellular,LMH)细胞后差异表达的mRNA,以探究mRNA在FAdV-4感染过程中的作用及其调控机制。结果显示,与对照组相比,FAdV-4感染48 h共筛选到2604个上调的差异表达基因,2883个下调的差异表达基因。其中,GNB3、NECTIN4、SFRP4、FABP2、PLPP3、GALR1L和MBL 2等基因之前并没有被报道过与FAdV-4感染相关。通过GO和KEGG分析得知,差异表达基因主要富集在从细胞表面位点和信号受体结合至细胞周期调节、MAPK信号通路、细胞黏附分子作用等;其中,显著下调的差异基因还富集到多种代谢途径中,提示病毒感染会影响宿主细胞的代谢水平。本研究为深入解析FAdV-4感染宿主细胞的致病机制提供了相关的理论基础及科学依据。
