目的观察人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-induced ligand,sAPRIL)是否具有促进宫颈癌细胞株HeLa增殖的作用及其机制。方法用Brdu法检测sAPRIL蛋白对人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,进而用RT-PCR法检测HeLa细胞APRIL受体的...目的观察人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-induced ligand,sAPRIL)是否具有促进宫颈癌细胞株HeLa增殖的作用及其机制。方法用Brdu法检测sAPRIL蛋白对人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,进而用RT-PCR法检测HeLa细胞APRIL受体的表达情况。结果原核表达的sAPRIL蛋白能促进HeLa细胞增殖。HeLa细胞表达APRIL的受体HSPG1、HSPG2,而不表达BCMA、TACI及HSPG4。结论sAPRIL有明确的促HeLa细胞增殖作用。由于HeLa细胞有APRIL受体HSPG1、HSPG2的表达,我们初步推测该作用可能是通过HSPG1及HSPG2起作用的。展开更多
目的:构建稳定表达人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-inducing ligand,sAPRIL)的CHO细胞株。方法:利用RT-PCR方法克隆出sAPRIL基因,构建表达该基因的慢病毒表达载体,与辅助质粒共转染HEK-293T细胞,以包装病毒颗粒。将病毒...目的:构建稳定表达人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-inducing ligand,sAPRIL)的CHO细胞株。方法:利用RT-PCR方法克隆出sAPRIL基因,构建表达该基因的慢病毒表达载体,与辅助质粒共转染HEK-293T细胞,以包装病毒颗粒。将病毒上清感染CHO细胞,获得稳定表达sAPRIL的细胞株。利用RT-PCR、Western blot及FACS等方法鉴定其表达。结果:成功克隆出人sAPRIL基因,RT-PCR、Western blot及FACS结果显示成功构建了稳定表达sAPRIL的CHO细胞株。结论:结论:成功获得了稳定表达sAPRIL的细胞株,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。展开更多
文摘目的观察人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-induced ligand,sAPRIL)是否具有促进宫颈癌细胞株HeLa增殖的作用及其机制。方法用Brdu法检测sAPRIL蛋白对人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,进而用RT-PCR法检测HeLa细胞APRIL受体的表达情况。结果原核表达的sAPRIL蛋白能促进HeLa细胞增殖。HeLa细胞表达APRIL的受体HSPG1、HSPG2,而不表达BCMA、TACI及HSPG4。结论sAPRIL有明确的促HeLa细胞增殖作用。由于HeLa细胞有APRIL受体HSPG1、HSPG2的表达,我们初步推测该作用可能是通过HSPG1及HSPG2起作用的。