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N-糖基化改造碱性果胶酶的热稳定性 被引量:1
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作者 昂安娜 堵国成 +5 位作者 葛飞 朱龙宝 江志超 马琪森 朱龙龙 陶玉贵 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期22-28,共7页
在软件模拟分析的基础上,运用半理性设计转换传统去除N-糖基化的方式,同时在反向转角区引入具有增强芳香族序列(enhanced aromatic sequence,EAS)特征的新N-糖基化,提高了碱性果胶酶(alkaline polygalacturonate lyase,PGL)的热稳定性,... 在软件模拟分析的基础上,运用半理性设计转换传统去除N-糖基化的方式,同时在反向转角区引入具有增强芳香族序列(enhanced aromatic sequence,EAS)特征的新N-糖基化,提高了碱性果胶酶(alkaline polygalacturonate lyase,PGL)的热稳定性,获得了高品质的PGL工程菌。将355位点的苏氨酸突变成突变能低的色氨酸来去除353位点的N-糖基化,酶的半衰期提高了176%,但与目标值仍相距甚远;再将127和137位点同时引入新N-糖基化,使酶的半衰期达到1.35 h,与目标值接近。在酶的反向转角区引入具有EAS特征的新N-糖基化,对提高酶的热稳定性具有显著促进作用。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 N-糖基化 热稳定性 增强芳香序列(enhanced AROMATIC SEQUENCE EAS)
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