基于真核表达塞内卡病毒A VP2蛋白的间接ELISA检测方法

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作者 裴宗飞 于凯蓝 +2 位作者 安欣娜 陈俊雯 张永宁 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2025年第1期65-74,共10页

为建立检测塞内卡病毒A(SVA)抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),本试验利用昆虫杆状病毒表达系统表达SVA的主要结构蛋白和保护性抗原VP2,通过间接免疫荧光试验(IFA)验证VP2的免疫反应性,并使用氨基三乙酸镍(NiNTA)树脂亲和纯化重组VP2... 为建立检测塞内卡病毒A(SVA)抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),本试验利用昆虫杆状病毒表达系统表达SVA的主要结构蛋白和保护性抗原VP2,通过间接免疫荧光试验(IFA)验证VP2的免疫反应性,并使用氨基三乙酸镍(NiNTA)树脂亲和纯化重组VP2蛋白。以纯化的VP2蛋白为包被抗原,利用棋盘滴定法确定最优的抗原包被浓度和待检血清稀释度,通过优化反应条件和确定临界值,建立了检测SVA抗体的间接ELISA检测方法,并评估了其特异性、敏感性、重复性及与IFA的检测符合率。结果显示,重组VP2蛋白在杆状病毒感染的Sf9细胞内呈现可溶性表达,能够被SVA VP2特异性单克隆抗体2F5识别;经Ni-NTA纯化后,获得了分子量约31 kDa的重组VP2蛋白;间接ELISA的最佳抗原包被浓度为2μg/mL,最佳血清稀释度为1∶100,最佳酶标二抗稀释度为1∶10000;阴阳性临界值为0.287;与口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型抗血清无交叉反应;批内与批间变异系数均低于10%。利用建立的间接ELISA检测了实验室保存的52份猪血清样本,与IFA的检测符合率为96.15%(50/52)。综上,本试验间接ELISA的成功建立为SVA抗体检测和流行病学调查提供了有力工具。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a(SVA) VP2蛋白 昆虫杆状病毒表达系统 间接ELISA 抗体

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塞内卡病毒A完整病毒和空衣壳的分离及抗体应答分析

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作者 李梅 穆素雨 +4 位作者 董虎 李硕 潘颂佳 郭慧琛 孙世琪 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4562-4570,共9页

塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)在复制过程中可形成完整病毒和空衣壳,它们的分离条件和抗体应答差异目前还是未知的。本研究利用盐酸胍形成SVA空衣壳,通过优化不同的密度梯度、介质、转速、时间条件进行超速离心,获得分离SVA完整病毒... 塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)在复制过程中可形成完整病毒和空衣壳,它们的分离条件和抗体应答差异目前还是未知的。本研究利用盐酸胍形成SVA空衣壳,通过优化不同的密度梯度、介质、转速、时间条件进行超速离心,获得分离SVA完整病毒和空衣壳的最佳条件,并按SVA完整病毒12.5μg·只-1,空衣壳12.5μg·只^(-1)肌肉注射免疫BALB/c小鼠,免疫后1~7周检测特异性抗体和中和抗体。结果显示,SVA的MOI=1时感染细胞2 h加入100 mmol·L^(-1)盐酸胍可以使SVA完整病毒全部形成空衣壳;在10%~50%氯化铯,36000 r·min^(-1),离心2.5 h是区分SVA完整病毒和空衣壳的最佳条件;而且SVA完整病毒与空衣壳诱导小鼠的特异性抗体和中和抗体水平无显著差异(P=ns)。本研究为塞内卡病毒A完整病毒和空衣壳的分离纯化、重组SVA病毒样颗粒疫苗的开发提供参考。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a 完整病毒 空衣壳 分离条件优化 免疫原性

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猪塞内卡病毒A研究进展 被引量：2

3

作者 何宇乾 李静 +3 位作者 刘枢清 朱丽杰 刘拂晓 王奇 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4616-4625,共10页

塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)是近年来引起感染猪发生水疱样病变的一种小RNA病毒,属于小RNA病毒科(Picornaviridae)、塞内卡病毒属(Senecavirus)。至今,围绕SVA的遗传进化、基因组结构与功能、致病机制及流行病学等领域的研究已取得... 塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)是近年来引起感染猪发生水疱样病变的一种小RNA病毒,属于小RNA病毒科(Picornaviridae)、塞内卡病毒属(Senecavirus)。至今,围绕SVA的遗传进化、基因组结构与功能、致病机制及流行病学等领域的研究已取得一定成果,并建立了多种实验室诊断方法。在中国,SVA感染范围较为广泛,大多以表现为无明显症状的隐性感染形式为主,并且与其他病原体混合感染的情况较为常见。目前,中国在SVA检测领域已实现了显著的技术提升,应用了逆转录恒温热隔绝式PCR(RT-iiPCR)、重组酶聚合酶等温扩增技术(RPA)、实时荧光逆转录重组酶辅助扩增技术(rRT-RAA)、逆转录微滴式数字PCR(RT-ddPCR)和实时逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)等新型检测手段。然而,SVA是一种易变异和重组的新发RNA病毒,目前尚无针对其的有效商品化疫苗或药物,有效防控SVA仍是一项艰巨的任务。现有SVA疫苗的研究仍以灭活疫苗为主,同时包括亚单位疫苗、减毒活疫苗、核酸疫苗、病毒颗粒疫苗和重组活载体疫苗等。针对SVA引起感染的抗病毒药物治疗方面,目前可采用利巴韦林、甲磺酸瑞波西汀等进行治疗。此外,中草药提取物或其他天然产物也被发现为潜在的抗病毒制剂。笔者旨在对SVA的流行分布、病原学、流行病学、鉴别诊断及防控的最新研究进展进行归纳和总结,以期为SVA的预防和控制策略提供新的视角和思路。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a(SVA) 病原学 流行病学 鉴别诊断 疫病防控

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塞内卡病毒A间接ELISA检测方法的建立及应用 被引量：2

4

作者 王彩霞 张舟 +3 位作者 范燕茹 冯春燕 吴绍强 林祥梅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期19-23,I0001,共6页

为了建立塞内卡病毒A(SVA)血清学诊断方法,本研究体外融合表达结构蛋白VP2和VP3全长,并建立了间接ELISA方法,并利用建立的方法,进一步研究了多次感染SVA后VP2/3抗体的消长规律。本研究首先从塞内卡GD01/2017株中扩增出VP2和VP 3基因,将... 为了建立塞内卡病毒A(SVA)血清学诊断方法,本研究体外融合表达结构蛋白VP2和VP3全长,并建立了间接ELISA方法,并利用建立的方法,进一步研究了多次感染SVA后VP2/3抗体的消长规律。本研究首先从塞内卡GD01/2017株中扩增出VP2和VP 3基因,将其克隆至表达载体pET-30a,IPTG诱导表达目的蛋白,经检测蛋白以包涵体形式存在。大量诱导表达后收集纯化包涵体蛋白,用6 mol/L盐酸胍溶解包涵体并测定其浓度为5.3 mg/mL,利用该蛋白建立了SVA结构蛋白VP2/3的间接ELISA检测方法。本研究进一步利用该ELISA方法检测SVA GD01/2017株多次感染SPF猪后的血清样品,绘制了VP2/3抗体的消长规律图,为后续疫苗免疫程序的制定奠定基础。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a 结构蛋白 原核表达 酶联免疫吸附试验 检测

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塞内卡病毒A的RT-PCR检测方法的建立和应用 被引量：15

5

作者 范慧 李亮 +3 位作者 姜平 王先炜 李玉峰 白娟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1312-1318,共7页

塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,可引起成年母猪水疱性病变,并导致新生仔猪死亡。为建立SVA的快速检测方法,本研究对NCBI发表的40株SVA的基因序列进行同源比较,选择保守区域设计了3对引物P1、P2和P3,从... 塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,可引起成年母猪水疱性病变,并导致新生仔猪死亡。为建立SVA的快速检测方法,本研究对NCBI发表的40株SVA的基因序列进行同源比较,选择保守区域设计了3对引物P1、P2和P3,从中筛选出最佳扩增引物,通过对引物浓度、退火温度、延长时间、循环次数进行优化,成功建立了SVA的RT-PCR检测方法。用该方法检测SVA、脑心肌炎病毒(EMCV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)无交叉反应,具有良好的特异性。敏感性试验结果显示,病毒检测限可达1TCID50,比国外文献报道的检测方法灵敏性更高。用该方法检测山东省的100份猪组织样品,阳性率为2%。本研究所建立的方法特异性强、敏感性高、可靠性好,为SVA的快速检测及流行病学调查提供了有效的技术手段。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a RT-PCR 检测

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塞内卡病毒A结构蛋白VP1诱导PK-15细胞凋亡 被引量：10

6

作者 王咏 毛箬青 +2 位作者 张克山 郑海学 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期811-820,共10页

塞内卡病毒A(SVA)作为一种新发病病原,致病机制仍不清楚。通过显微镜观察发现,SVA感染PK-15细胞后能使细胞产生明显的细胞病变(CPE),同时伴随着严重的细胞凋亡。为了深入研究SVA诱导凋亡的情况,在验证SVA各蛋白真核质粒正常表达后,通过A... 塞内卡病毒A(SVA)作为一种新发病病原,致病机制仍不清楚。通过显微镜观察发现,SVA感染PK-15细胞后能使细胞产生明显的细胞病变(CPE),同时伴随着严重的细胞凋亡。为了深入研究SVA诱导凋亡的情况,在验证SVA各蛋白真核质粒正常表达后,通过Annexin V-FITC/PI双染流式方法检测SVA各蛋白诱导凋亡的情况,Annexin V-FITC/PI和Hoechst染色后显微镜观察磷脂酰丝氨酸和核凝聚程度,通过Western blotting和RT-PCR技术分析SVA-VP1对凋亡通路中主要调控分子Caspase3、Caspase8和Bax蛋白质和mRNA水平的影响,发现SVA-VP1能够显著诱导细胞发生早期和晚期凋亡,并且能够促进凋亡蛋白Caspase3、Caspase8及Bax蛋白和mRNA水平的上调。本研究结果为深入研究SVA调控宿主细胞凋亡的分子机制和致病机制奠定了理论基础。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a PK-15细胞 细胞凋亡 流式细胞术

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猪塞内卡病毒A、猪水疱病毒和口蹄疫病毒三重荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量：3

7

作者 苏博 吴志敏 +8 位作者 张馨月 赵涵 鲍迪 张添琪 张嘉钰 梁湘雨 孟凡茹 王开 胡桂学 《动物医学进展》 北大核心 2023年第9期12-18,共7页

为建立一种鉴别猪塞内卡病毒A(SVA)、猪水疱病毒(SVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)的方法,针对3种病毒的基因保守区域设计引物和探针,建立了可同时检测上述3种病毒的Taq Man三重荧光定量PCR方法。该方法仅能特异性扩增SVA和FMDV病毒基因以及SVD... 为建立一种鉴别猪塞内卡病毒A(SVA)、猪水疱病毒(SVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)的方法,针对3种病毒的基因保守区域设计引物和探针,建立了可同时检测上述3种病毒的Taq Man三重荧光定量PCR方法。该方法仅能特异性扩增SVA和FMDV病毒基因以及SVDV阳性质粒,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、经典猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪圆环病毒2型、伪狂犬病病毒的阳性样品cDNA或DNA无交叉反应,对3种病毒核酸的最低检出限均为10 copies/μL,组内和组间变异系数均小于4%。应用该方法对2019-2022年采集的吉林省部分地区267份病料和本实验室留存的30份猪血清样品进行检测,未检出SVA、FMDV以及SVDV。建立的三重荧光PCR方法有利于对3种病毒进行有效的流行病学调查,可给快速准确鉴别致猪水疱症状病毒性疾病提供诊断方法。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a 猪水疱病毒 口蹄疫病毒 三重荧光定量PCR

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1株塞内卡病毒A型的基因组序列与演化分析 被引量：2

8

作者 李宁 郭慧芳 +5 位作者 王白玉 乔麒龙 黄庆 李永涛 王增 赵军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期553-559,共7页

旨在分析塞内卡病毒A型(Senecavirus A,SVA)CH-HNCY-2019株的基因组特性和演化,参考SVA毒株SVV-001(GenBank No.NC011349)全基因组序列设计8对引物,通过RT-PCR扩增和测序获得SVA CH-HNCY-2019株全基因序列并进行序列分析。结果显示,SVA... 旨在分析塞内卡病毒A型(Senecavirus A,SVA)CH-HNCY-2019株的基因组特性和演化,参考SVA毒株SVV-001(GenBank No.NC011349)全基因组序列设计8对引物,通过RT-PCR扩增和测序获得SVA CH-HNCY-2019株全基因序列并进行序列分析。结果显示,SVA分离株CH-HNCY-2019基因组全长为7294个核苷酸,与中国分离株核苷酸相似性为95.9%~99%,与美国经典株SVV-001核苷酸相似性最低。CH-HNCY-2019与大多数中国2017—2018年分离毒株亲缘关系较近,处于同一分支,而与中国2015—2016年分离株亲缘关系较远。与包括2019年中国广东4个SVA分离株在内的其他国内外分离株相比,CH-HNCY-2019的VP1蛋白的722位氨基酸由L突变为Q;VP3蛋白的499位氨基酸由A突变为V,528位氨基酸由P突变为S,582位氨基酸由E突变为K。本研究成功获得1株SVA CH-HNCY-2019全基因组序列,研究结果提示,SVA中国流行株具有多样性,而且在不断地演变,应加强SVA的分子流行病学调查、生物安全措施和疫苗研发以防止SVA在我国猪群中的广泛传播。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a RT-PCR扩增 SVA CH-HNCY-2019 基因组序列分析 遗传进化

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一株塞内卡病毒A全基因组序列测定与致病性分析 被引量：3

9

作者 赖隆永 刘小龙 +5 位作者 谭礼宁 叶盛聪 邱灵姗 陈盛勇 刘楚楚 徐磊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期820-826,共7页

本研究旨在明确塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)FJLY株的基因组特性及其与其他毒株的同源性关系,并了解SVA-FJLY株的致病性。以分离自福建省某养殖场中的一株SVA-FJLY株为研究对象,参照其原型毒株SVV-001(GenBank No.DQ641257.1)全基因... 本研究旨在明确塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)FJLY株的基因组特性及其与其他毒株的同源性关系,并了解SVA-FJLY株的致病性。以分离自福建省某养殖场中的一株SVA-FJLY株为研究对象,参照其原型毒株SVV-001(GenBank No.DQ641257.1)全基因组序列设计5对引物,通过RT-PCR扩增、测序、拼接,获得SVA-FJLY株全基因组序列并进行序列分析;并通过滴鼻攻毒3~4周龄仔猪。结果表明,SVA-FJLY株基因组全长7275 bp(不包括PolyA),SVA-FJLY株基因组存在一个多聚蛋白、VP1蛋白和VP2蛋白。SVA-FJLY株与参考毒株之间的基因组一级结构有较高的相似性,与HeB01-2017株(MF967574.1)相似性最高,达98.5%;而与SVA原型毒株SVV-001株(DQ641257.1)的相似性较低,为93.9%。SVA-FJLY株与国内几个毒株属于同一个分支,与国内的HeB01-2017株亲缘关系最近,同时与国外Colombia-2016株(KX857728.1)的亲缘关系最近。通过动物试验发现试验组猪攻毒10 d后,试验组2/3发病,对照组3/3正常,未出现仔猪死亡。通过全基因组序列测定获得了SVA-FJLY株全基因组序列并进行序列分析,明确SVA-FJLY株的基因组特性及其与其他毒株的相似性关系,了解了SVA-FJLY株的致病性,为SVA的反向遗传学和疫苗的研制提供参考依据,同时也丰富了SVA的基因组信息数据库。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a RT-PCR扩增 序列分析 遗传进化树 同源性 SVA-FJLY株 致病性

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塞内卡病毒A反向遗传技术及其应用

10

作者 王奇 李紫薇 +2 位作者 沙洲 尼博 刘拂晓 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第6期102-106,共5页

塞内卡病毒A(SVA)是引起猪口鼻部、蹄冠部水疱样病变,甚至引起新生仔猪急性死亡的新发病毒。SVA是无囊膜的单股、正链RNA病毒,由于其基因组不断发生重组和进化,因此给养猪业造成较大的经济损失。反向遗传作为一种从基因入手开展体外遗... 塞内卡病毒A(SVA)是引起猪口鼻部、蹄冠部水疱样病变,甚至引起新生仔猪急性死亡的新发病毒。SVA是无囊膜的单股、正链RNA病毒,由于其基因组不断发生重组和进化,因此给养猪业造成较大的经济损失。反向遗传作为一种从基因入手开展体外遗传学研究的技术,能够在病毒cDNA分子水平上进行基因定向改造,进而借助宿主细胞实现病毒复制、翻译、包装和拯救的目的,最终研究重组病毒的生物学特性。本文就SVA反向遗传技术的研究及其应用进行综合评述,以期为进一步探究SVA复制、表达、调控等分子机制提供思路。 展开更多

关键词 塞内卡病毒a 反向遗传 CDNA克隆 病毒拯救

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塞内卡病毒A对新生仔猪死亡率的影响

11

作者 孟含(译) 张配配(校) +1 位作者 马晓迪(制图) Daniel Linhares 《国外畜牧学（猪与禽）》 2019年第12期1-1,2,3,共3页

巴西和美国中西部地区的猪病例报告指出在新生仔猪死亡病例中鉴定出塞内卡病毒A(Seneca Virus A,SVA),本文总结有关SVA和最近介绍的新生仔猪死亡综合征的最新认识。

关键词 塞内卡病毒a 新生仔猪 水疱病

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提高猪的免疫力有助于净化塞内卡病毒A

12

作者 张文华(译) 张配配(校) +1 位作者 Matthew Sturos Fabio Vannucci 《国外畜牧学（猪与禽）》 2019年第12期5-5,6,共2页

一旦塞内卡病毒A在不同猪场之间的传播被阻断,就可以对环境中的塞内卡病毒A进行灭活。

关键词 塞内卡病毒a 生物安全 监测

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掌握塞内卡病毒A的流行病学

13

作者 孟霞(译) 夏俊花(校) Guilherme Preis 《国外畜牧学（猪与禽）》 2019年第12期4-4,5,共2页

进一步了解塞内卡病毒A的传播和发病规律能够揭示它的流行病学特征,这有助于猪场制定预防和控制猪感染塞内卡病毒A的措施。

关键词 塞内卡病毒a 水疱病 流行病学

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塞内卡病毒A VP1基因原核表达及蛋白纯化

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作者 贺大芳 邱文英 +2 位作者 陈奕帆 邹瑶 王德 《养猪》 2020年第1期98-101,共4页

试验以猪塞内卡病毒A(SVA)VP1基因为研究对象,利用基因重组技术构建原核表达载体pET-28a(+)-VP1。重组质粒转化E.coli BL21(DE3)后经1 mmol/L异丙基茁-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在37益条件下诱导6 h,后经15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-P... 试验以猪塞内卡病毒A(SVA)VP1基因为研究对象,利用基因重组技术构建原核表达载体pET-28a(+)-VP1。重组质粒转化E.coli BL21(DE3)后经1 mmol/L异丙基茁-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在37益条件下诱导6 h,后经15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳进行检测。结果:SVAVP1基因能在BL21(DE3)中成功表达,融合蛋白相对分子质量约36 kDa;表达的融合蛋白以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在,以包涵体为主要存在形式。以上研究结果为后续SVAVP1蛋白的免疫原性的研究及塞内卡病毒病抗体ELISA方法的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 塞内卡病毒 VP1基因 原核表达 蛋白纯化

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2021年浙江省猪群A型塞内卡病毒流行病学调查及分析

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作者 孙冰冰 董建斐 +5 位作者 王雅婷 陈伟良 张传亮 赵灵燕 徐辉 张红丽 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第3期202-206,共5页

为了解浙江省猪A型塞内卡病毒(SVA)流行情况,本研究采用ELISA和荧光定量RT-PCR方法对2021年全省采集的3840份血清样品和937份组织样品进行血清学与病原学检测,分析空间、群间及混合感染情况。结果显示,2021年SVA抗体个体阳性率、场群阳... 为了解浙江省猪A型塞内卡病毒(SVA)流行情况,本研究采用ELISA和荧光定量RT-PCR方法对2021年全省采集的3840份血清样品和937份组织样品进行血清学与病原学检测,分析空间、群间及混合感染情况。结果显示,2021年SVA抗体个体阳性率、场群阳性率分别为2.03%、19.35%,病原阳性率、场群阳性率分别为4.38%、11.45%。空间分布上,全省5个地区均有阳性检出,浙中、浙东地区的抗体个体阳性率显著高于其他地区,病原阳性率浙西显著高于浙东。群间分布上,屠宰场抗体个体阳性率高于养殖场,但场群阳性率低于养殖场,健康猪群的病原阳性率与非健康猪群差异明显(P<0.01)。混合感染情况,63.64%的阳性群体与PCV2混合感染,27.27%的阳性群体与PCV2、PRRSV混合感染。结果表明,SVA感染在我省分布较广,多为隐性感染,且混合感染比例较高,需加强监测,做好防控措施。 展开更多

关键词 塞内卡病毒 流行 隐性感染 混合感染

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2020-2022年甘肃地区猪塞内卡病毒血清学调查与分析

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作者 丁凯璐 马雪青 +9 位作者 韩庆彦 杨吉飞 兰喜 付元芳 李坤 李平花 卢曾军 刘在新 刘霞 孙普 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第4期206-212,共7页

塞内卡病毒(SVA)是一种引发猪水疱性疫病的新发病原体,已趋于全球性传播。为了解甘肃地区猪群中SVA的流行现状和分布情况,本研究收集了2020—2022年甘肃地区猪场血清样品,利用SVA中和抗体竞争ELISA方法检测SVA抗体水平,并对2022年血清... 塞内卡病毒(SVA)是一种引发猪水疱性疫病的新发病原体,已趋于全球性传播。为了解甘肃地区猪群中SVA的流行现状和分布情况,本研究收集了2020—2022年甘肃地区猪场血清样品,利用SVA中和抗体竞争ELISA方法检测SVA抗体水平,并对2022年血清样品进行了细胞中和试验验证。结果显示:共检测猪血清样品2324头份,其中2020年505头份、2021年1100头份、2022年719头份,SVA年抗体阳性率分别为69.3%、3.8%、22.2%,总阳性率和场阳性率分别为23.5%和42.8%;ELISA方法与细胞中和试验的符合率阳性血清为95.45%,阴性血清为97.22%。结果表明,尽管近3年来猪SVA疫情在国内未见报道,但甘肃地区猪群中仍存在SVA隐性传播或者潜伏感染。本研究首次连续监测了甘肃地区猪群中SVA的流行状况,这为本地区乃至全国的SVA病防控提供了重要的流行病学信息。 展开更多

关键词 塞内卡病毒 猪塞内卡病毒病 流行病学 中和抗体

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A型塞内卡病毒抗体检测胶体金免疫层析试纸条的制备及初步应用

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作者 李帅鹏 石正旺 +9 位作者 陈婕 罗俊聪 朱昱茜 石鑫泰 席韬 张帆 何印娣 郑海学 张小丽 田宏 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期4086-4094,共9页

本研究拟建立一种快速、准确、简便的A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)抗体胶体金检测方法,用于SVA的感染诊断。通过原核系统表达纯化获得SVA VP2重组蛋白,并制备VP2蛋白多克隆抗体;将VP2蛋白与胶体金偶联形成金标抗原。随后,将VP2蛋白... 本研究拟建立一种快速、准确、简便的A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)抗体胶体金检测方法,用于SVA的感染诊断。通过原核系统表达纯化获得SVA VP2重组蛋白,并制备VP2蛋白多克隆抗体;将VP2蛋白与胶体金偶联形成金标抗原。随后,将VP2蛋白和VP2多克隆抗体分别包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上作为检测线(T线)和质控线(C线),优化反应体系制备试纸条。结果表明,制备的试纸条检测口蹄疫病毒O型、口蹄疫病毒A型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、非洲猪瘟病毒阳性血清及健康猪(SPF)血清时,均无交叉反应,特异性良好;对SVA阳性血清的检测灵敏度达1∶64,通过对150份猪临床血清样品进行试纸条和病毒中和试验的平行检测,两者的Kappa值为0.88,表明两种方法高度一致。综上所述,本研究成功开发了SVA抗体检测试纸条,可在10~15 min内完成检测,具有快速、准确、简便等优点,为临床定性检测及现场快速诊断塞内卡病毒病提供了有效工具。 展开更多

关键词 塞内卡病毒抗体 VP2蛋白 胶体金免疫层析试纸条

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猪塞内卡病毒病的诊断及防控措施 被引量：1

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作者 赵芳 《浙江畜牧兽医》 2025年第3期39-40,共2页

塞内卡病毒近年来在不同国家和地区发生多例、可引起猪水疱性疾病。作为猪水疱性疾病的新病原体之一,塞内卡病毒已经在国内迅速发展和广泛传播。它引起的疾病临床症状与口蹄疫相似,并造成了巨大的经济损失。巴西、美国和中国西南部报告... 塞内卡病毒近年来在不同国家和地区发生多例、可引起猪水疱性疾病。作为猪水疱性疾病的新病原体之一,塞内卡病毒已经在国内迅速发展和广泛传播。它引起的疾病临床症状与口蹄疫相似,并造成了巨大的经济损失。巴西、美国和中国西南部报告了越来越多的病例。然而,迄今为止,该病标准诊断方法不多,商业化低成本的诊断试剂盒极少,也没有商业疫苗。因此,需要更加关注塞内卡病毒病,并应加强日常监测以防止该疾病的传播。 展开更多

关键词 诊断方法 猪水疱性疾病 防控措施 塞内卡病毒

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A型塞内卡病毒研究进展

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作者 侯丽娜 齐志涛 +8 位作者 吉格木德 陈九连 刘玉梅 李晓艳 俎红丽 李超 刘东霞 王子涵 陈坚 《家畜生态学报》 北大核心 2025年第1期113-119,共7页

A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)作为一种新的猪水泡病病原体,具有较强的进化和传播能力,感染后可引起类似于口蹄疫的临床症状。SVA给养猪业带来重大的经济损失。近年来在巴西、美国和中国由SVA感染所致的疫情逐年增加。中国目前尚无... A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)作为一种新的猪水泡病病原体,具有较强的进化和传播能力,感染后可引起类似于口蹄疫的临床症状。SVA给养猪业带来重大的经济损失。近年来在巴西、美国和中国由SVA感染所致的疫情逐年增加。中国目前尚无可用的标准诊断方法和商业疫苗。因此,目前亟需提高对SVA的关注并加快相关研究,以防止该病毒在国内广泛扩散与传播。本文对目前有关SVA流行病学、诊断方法和疫苗研究的进展进行了详细叙述,为控制SVA的传播和采取有效预防措施提供参考。 展开更多

关键词 塞内卡病毒 流行病学 诊断 疫苗

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塞内卡病毒3C蛋白酶活性中心Q33/Y145位点功能鉴定及对病毒复制的影响

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作者 靳新顺 冉旭华 闻晓波 《饲料研究》 北大核心 2025年第13期111-116,共6页

试验旨在探究3C蛋白特定氨基酸位点突变对塞内卡病毒A(SVA)复制能力的影响。以野生毒株CHN/SVA/HB/2018(WT)为研究材料,结合3C蛋白结构信息,采用生物信息学分析方法筛选出关键位点,预测突变前后氢键网络和蛋白结构变化,并通过无污染的IB... 试验旨在探究3C蛋白特定氨基酸位点突变对塞内卡病毒A(SVA)复制能力的影响。以野生毒株CHN/SVA/HB/2018(WT)为研究材料,结合3C蛋白结构信息,采用生物信息学分析方法筛选出关键位点,预测突变前后氢键网络和蛋白结构变化,并通过无污染的IBRS-2细胞拯救出突变病毒,测定病毒滴度和生长曲线,使用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测突变毒株转录水平。结果显示,33位氨基酸(Q33)折叠自由能最高,而145位氨基酸(Y145)空间位置最远。Q33和Y145突变为赖氨酸后,等电点升高、不稳定指数下降并且氢键网络减少,3C结合槽的微结构域也发生改变。突变毒株生长趋势与WT相似,但病毒滴度和转录能力极显著低于WT(P<0.01)。研究表明,WT的3C蛋白中Q33和Y145可能是影响病毒复制的关键位点。利用反向遗传操作对3C蛋白进行替换突变,可降低蛋白结构稳定性,影响3C活性,降低病毒增殖能力和复制能力,使其具备成为SVA弱毒活疫苗候选毒株的潜力。 展开更多

关键词 生物信息学分析 塞内卡病毒(SVA) 3C蛋白 生长特性

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