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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对分枝杆菌液体培养系统菌种鉴定的临床研究 被引量:7
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作者 杜岩青 秦中华 张丽霞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期871-877,共7页
目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为... 目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为临床早期、精准治疗提供病原学依据。方法选取我院Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960分枝杆菌快速液体培养的阳性培养物为研究对象,通过不同的孵育时间、不同大小的研磨珠处理、不同的破壁方式摸索出MALDI-TOF MS对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960阳性培养物鉴定的"最优处理方法",并将所有结果与基因芯片法菌种鉴定做参照进行比对,鉴定不一致的结果通过基因测序确认。结果Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养报阳性后增加孵育时间可提高检出率及鉴定分值,同时使用0.5 mm的氧化锆珠研磨,使用超声震荡混匀处理,鉴定效果最佳。鉴定结果方面,液体系统报阳的420份阳性标本,基因芯片法鉴定结果为结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核菌占28.81%(121/420),9例未鉴定出,未鉴定占2.14%(9/420),错误鉴定占0.95%(4/420),总鉴定率为97.86%(411/420);采用MALDI-TOF MS质谱鉴定420份阳性标本中鉴定出419例,其中结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核占30.00%(126/420),星型奴卡菌0.48%(2/420),巴西奴卡菌占0.24%(1/420),1例未鉴定出,总鉴定率为99.76%。质谱鉴定分值≥2.0的400例占95.24%,分值在1.7~2.0的19例占4.52%,分值<1.7的1例占0.24%。结论本实验实现了Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养阳性培养物的直接质谱鉴定,缩短了培养鉴定的时间,将分枝杆菌鉴定到种水平,能区分出结核菌与非结核菌,同时也能将与分枝杆菌相似的奴卡菌鉴定出来,对临床疾病的鉴别诊断起到了积极的作用。 展开更多
关键词 Bactec^(TM)MGIT^(TM)960液体培养 辅助激光吸附电离飞行时间质谱技术 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌
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沙门菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱方法研究 被引量:14
2
作者 赵剑虹 高艳 +6 位作者 李书明 张士尧 王恒伟 顾琳 韩庆华 焦洋 陈倩 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期705-709,共5页
目的优化基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法对沙门菌鉴定的条件,研究不同前处理方法对MALDI靶板污染情况,建立安全高效的检测沙门菌的方法。方法应用MALDI-TOF-MS法对4株沙门菌标准菌株进行不同培养条件、样品前处理方... 目的优化基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法对沙门菌鉴定的条件,研究不同前处理方法对MALDI靶板污染情况,建立安全高效的检测沙门菌的方法。方法应用MALDI-TOF-MS法对4株沙门菌标准菌株进行不同培养条件、样品前处理方式检验,确立优化的鉴定程序,对不同处理方式下MALDI靶板进行检测,采用优化的前处理方法对33株腹泻病人粪便标本中分离的沙门菌进行数据采集和图谱比对,所得鉴定结果与常规血清学分型结果比较。结果不同前处理方法、不同的培养基上沙门菌标准菌株均准确鉴定为沙门菌。33株沙门菌用MALDI-TOF-MS方法全部准确鉴定为沙门菌属,19株沙门菌在种的鉴定水平上与血清分型结果完全一致,14株沙门菌在种的鉴定水平上与血清分型结果不一致。不同前处理方法的MALDI靶板上均未发现细菌生长。结论 MALDI-TOF-MS方法能快速、简便、安全、准确鉴定属水平沙门菌,是一种有效的沙门菌检测鉴定的手段。 展开更多
关键词 辅助激光电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 沙门菌 鉴定
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测支气管肺泡灌洗液对非结核分枝杆菌肺病的诊断价值 被引量:3
3
作者 张新宝 张妍蓓 +2 位作者 姚超 王华 刘盛盛 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期729-733,共5页
目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)对非结核分枝杆菌(NTM)肺病的诊断价值。方法 收集2020年1月—2021年12月安徽省胸科医院收治的112例疑似NTM肺病患者。对患者BALF行MALDI-TOF MS检... 目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)对非结核分枝杆菌(NTM)肺病的诊断价值。方法 收集2020年1月—2021年12月安徽省胸科医院收治的112例疑似NTM肺病患者。对患者BALF行MALDI-TOF MS检测、PCR荧光探针检测、BACTEC MGIT 960分枝杆菌全自动快速液体培养(BD960法)检测,并对三种检测技术诊断效能进行比较。结果 依据NTM的诊断标准,112例患者最终诊断为NTM肺病78例,MALDI-TOF MS、PCR荧光探针法、BD960法检测NTM的灵敏度分别为:85.9%(67/78)、56.4%(44/78)、28.2%(22/78),MALDI-TOF MS分别与PCR荧光探针、BD960比较,χ^(2)分别为:16.52、52.98,P均<0.05,差异有统计学意义。三种检测技术阳性预计值分别为:98.5%、93.6%、100%,阴性预计值为:75.0%、47.7%、37.8%。MALDI-TOF MS检测诊断NTM肺病时间明显短于液体培养法,差异有统计学意义(Z=8.168,P<0.001)。结论 MALDI-TOF MS检测技术对NTM肺病的诊断具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 辅助激光电离飞行时间质谱 非结核分枝杆菌 支气管肺泡灌洗液 诊断技术
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基质辅助激光解吸附飞行时间串联质谱法测定rhEPO唾液酸含量及鉴定糖基化位点
4
作者 卢臣 蔡耘 +3 位作者 代景泉 王京兰 张养军 钱小红 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2004年第B10期139-140,共2页
Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein with three N-glycosylation sites and one O-glycosylation sites. According to the reference, all of the N-glyco-chains were acid complex type. The amount of sialic acid in rhEPO w... Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein with three N-glycosylation sites and one O-glycosylation sites. According to the reference, all of the N-glyco-chains were acid complex type. The amount of sialic acid in rhEPO was determined and two N-glycosylation sites on it were confirmed by matrix-assisted laser desorption time of flight-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-TOFMS) in this paper. The total amount of sialic acid in rhEPO accounts for 12.97%. Two N-glycosylation sites (Asn38,Asn83) were identified successfully. 展开更多
关键词 辅助激光吸附飞行时间串联质谱 唾液酸 含量测定 化位点鉴定 重组促红细胞生成素 糖蛋白
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MALDI-TOF-MS测定溶菌酶的相对分子质量中在线纯化技术的应用 被引量:1
5
作者 孙淑清 杜萍 +2 位作者 陈代梅 季怡萍 刘淑莹 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期87-88,91,共3页
用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOF -MS)测定溶菌酶的相对分子质量 ,采用硝酸纤维素膜作为溶菌酶的固相载体 ,在质谱仪上进行在线纯化溶菌酶样品 ,在测试前尽可能除去样品中的添加剂 ,以消除一些盐和蛋白质变性剂抑制样品... 用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOF -MS)测定溶菌酶的相对分子质量 ,采用硝酸纤维素膜作为溶菌酶的固相载体 ,在质谱仪上进行在线纯化溶菌酶样品 ,在测试前尽可能除去样品中的添加剂 ,以消除一些盐和蛋白质变性剂抑制样品峰的情形 ;此法简单、快速 ,并可明显增强离子峰的强度 ,提高测试的灵敏度。 展开更多
关键词 溶菌酶 相对分子 在线纯化技术 辅助激光电离飞行时间质谱 硝酸纤维素膜
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应用激光捕获显微切割和蛋白质组学技术筛选鼻咽癌的差异表达蛋白质 被引量:5
6
作者 易红 程爱兰 +7 位作者 黄卫国 张鹏飞 李茂玉 彭芳 李峰 李萃 陈主初 肖志强 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期375-383,共9页
目的:筛选鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的差异表达蛋白质,为寻找NPC的分子标志物提供科学依据。方法:采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织(normal nasopharyngeal ep... 目的:筛选鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的差异表达蛋白质,为寻找NPC的分子标志物提供科学依据。方法:采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织(normal nasopharyngeal epithelial tissue,NNET)中纯化NPC细胞和正常鼻咽上皮细胞(normal nasopharyngeal epithelial cells,NNEC),应用二维凝胶电泳(2-DE)分离LCM纯化细胞的蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾电离串联质谱(ESI-Q-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点,Western印迹和组织芯片(tissue microarray,TMA)免疫组织化学验证差异蛋白鳞状细胞癌抗原1(SCCA1)在两种组织中的表达水平。结果:建立了LCM纯化的NPC细胞和NNEC的2-DE图谱,质谱鉴定了36个差异蛋白质,其中20个蛋白只在NPC表达或表达上调,16个蛋白在NPC中表达下调或缺失。Western印迹和组织芯片免疫组织化学结果显示:SCCA1在NPC中的表达水平较NNET明显下调,与比较蛋白质组学结果一致。结论:36个差异蛋白可能与NPC的发病有关,为筛选NPC分子标志物奠定了基础。 展开更多
关键词 鼻咽癌 激光捕获显微切割技术 蛋白组学 二维凝胶电泳 辅助激光电离飞行时间质谱 电喷雾电离串联质谱 免疫印迹 组织芯片
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应用MALDI-TOF-MS技术分析转移和非转移黑色素瘤患者外周血清蛋白的差异表达
7
作者 王耀聪 刘林嶓 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期459-463,共5页
目的:应用蛋白质组学技术分析转移性和非转移性黑色素瘤患者外周血清中差异表达的蛋白质,初步探讨其对转移性黑色素瘤患者的诊断及治疗指导意义。方法:共收集101例患者外周血清,包括25例转移性黑色素瘤患者及76例对照者(31例非转移性患... 目的:应用蛋白质组学技术分析转移性和非转移性黑色素瘤患者外周血清中差异表达的蛋白质,初步探讨其对转移性黑色素瘤患者的诊断及治疗指导意义。方法:共收集101例患者外周血清,包括25例转移性黑色素瘤患者及76例对照者(31例非转移性患者和45例健康者)。从中随机抽取73例(18例转移患者,20例非转移患者和35例健康者)用于建立区分模型,其余28例(7例转移患者,11例非转移患者和10例健康者)用来对区分模型进行盲法验证。运用基质辅助激光解离飞行时间质谱技术,对外周血清蛋白质进行检测,应用Ciphergen蛋白质芯片软件对蛋白质谱进行分析。结果:黑色素瘤转移患者外周血清与对照组外周血清蛋白质谱相比,质荷比为2 598.33、3 646.79、4 605.48、8 603.10、7 756.64 m/z和9 598.82 m/z,共6个蛋白质峰呈表达有明显差异(P均=0.000),以此构建出转移性黑色素瘤的诊断模型,它的诊断敏感性为83.33%,特异性为74.55%。另外对该模型进行了盲法验证,其诊断转移性黑色素瘤的敏感性为71.43%,特异性为76.19%。结论:黑色素瘤转移患者外周血清蛋白质表达谱与对照组相比有明显变化,相对分子质量为2 598.33、3 646.79、4 605.48、8 603.10、7 756.64 m/z和9 598.82 m/z的蛋白质点可以作为黑色素瘤转移患者诊断的潜在生物学标志物。 展开更多
关键词 转移性黑色素瘤肿瘤标志物 蛋白组学 辅助激光电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms)
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单增李斯特氏菌MALDI-TOF-MS鉴定与分型研究 被引量:20
8
作者 王耀 曹际娟 +5 位作者 赵昕 郑秋月 王刚 田卓 史媛媛 曹远银 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期194-198,共5页
为建立单增李斯特氏菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速鉴定与分型方法,实验收集37株单增李斯特氏菌分离株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立单增李斯特氏菌鉴定数据库。... 为建立单增李斯特氏菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速鉴定与分型方法,实验收集37株单增李斯特氏菌分离株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立单增李斯特氏菌鉴定数据库。采用单增李斯特氏菌标准菌株进行验证,表明鉴定结果的可信度很高。在数据库信息的基础上,对37株单增李斯特氏菌分离株进行聚类分型。分型结果表明,在蛋白质水平上,MALDI-TOF-MS可把37株单增李斯特氏菌分成9个型别。 展开更多
关键词 单增李斯特氏菌 辅助激光电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 鉴定 分型
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MALDI-TOF-MS在病原微生物鉴定中的研究进展 被引量:29
9
作者 陈信忠 龚艳清 郭书林 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期43-48,共6页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)是鉴定多种致病性细菌的快速、可靠的方法,具有较好的稳定性和可重复性,在快速和准确性方面的总体表现明显好于传统的细菌生化鉴定方法。适合于一些致病菌的快速、高通量的检测和鉴定。... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)是鉴定多种致病性细菌的快速、可靠的方法,具有较好的稳定性和可重复性,在快速和准确性方面的总体表现明显好于传统的细菌生化鉴定方法。适合于一些致病菌的快速、高通量的检测和鉴定。综述MALDI-TOF-MS技术在普通病原菌、多血清型病原菌、非发酵性细菌,以及植物病原菌等病原微生物鉴定方面的最新研究进展。 展开更多
关键词 辅助激光电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 微生物 鉴定 进展
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应用RP-HPLC/TOF-MS技术识别肝癌血浆差异蛋白质 被引量:3
10
作者 母昭德 尚京川 +2 位作者 彭咏波 黄开顺 邱宗荫 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期828-830,共3页
目的应用RP-HPLC/TOF-MS技术筛选肝癌血浆差异蛋白质。方法9例肝癌和8例正常组血浆采用Agilent高丰度蛋白质分离系统(multiple affinity removal system,MARS)洗脱白蛋白等高丰度蛋白质后,样品首先采用RP—HPLC法分离分析,然后采... 目的应用RP-HPLC/TOF-MS技术筛选肝癌血浆差异蛋白质。方法9例肝癌和8例正常组血浆采用Agilent高丰度蛋白质分离系统(multiple affinity removal system,MARS)洗脱白蛋白等高丰度蛋白质后,样品首先采用RP—HPLC法分离分析,然后采用基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定差异蛋白质相对分子质量。结果肝癌血浆和健康志愿者血浆的RP-HPLC图谱中存在3组差异蛋白质,相对分子质量为(15~50)×10^3的蛋白质在健康志愿者中有较高表达,而相对分子质量为(50~90)×10^3的蛋白质在肝癌患者中有较高表达。结论RP—HPLC/TOF-MS技术可以发现肝癌发生发展过程中血浆蛋白表达谱质或量的变化。 展开更多
关键词 肝癌血浆 蛋白 反相高效液相色谱 辅助激光吸附飞行时间质谱
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MALDI-TOF-MS在爱德华氏菌检测中的应用 被引量:4
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作者 龚艳清 郭书林 +2 位作者 陈信忠 杨俊萍 叶妍妍 《中国动物检疫》 CAS 2014年第6期89-93,共5页
为建立快速检测和鉴定鱼类常见的爱德华氏菌的方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法对来自淡水鱼的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)进行检测和鉴定。为测试该方法的重复性和稳... 为建立快速检测和鉴定鱼类常见的爱德华氏菌的方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法对来自淡水鱼的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)进行检测和鉴定。为测试该方法的重复性和稳定性,采用营养肉汤、BHI琼脂、DHL和TSA等4种不同培养基,以及用肉汤分别培养24 h、36 h、48 h和72 h的菌株进行检测,结果表明对该菌的蛋白质谱图影响很小;冷冻保存2年的菌株,用MALDI-TOF-MS进行检测,鉴定分值变化很小。对分离自不同水生动物的迟缓爱德华氏菌菌株进行检测,均可得到准确的结果。表明MALDI-TOF-MS技术可以快速、准确地检测和鉴定这两种爱德华氏菌。 展开更多
关键词 辅助激光吸/电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 迟缓爱德华氏菌 鮰爱德华氏菌 检测 鉴定
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β-环糊精对TO、NTO分子识别的MALDI-TOF-MS研究 被引量:1
12
作者 张敏 史真 白银娟 《含能材料》 EI CAS CSCD 2005年第3期176-178,i003,共4页
用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDITOFMS)研究了β环糊精对1,2二氢化3H1,2,4三唑3酮(TO)、3硝基1,2,4三唑5酮(NTO)的分子识别行为,研究了不同基体、基体浓度对其质谱图的影响。研究表明β环糊精对TO、NTO有很强的分子识别能力,... 用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDITOFMS)研究了β环糊精对1,2二氢化3H1,2,4三唑3酮(TO)、3硝基1,2,4三唑5酮(NTO)的分子识别行为,研究了不同基体、基体浓度对其质谱图的影响。研究表明β环糊精对TO、NTO有很强的分子识别能力,以芥子酸为基体,基体复合物样品的摩尔比为10001时,这两种复合物的MALDITOFMS图均可得到基峰为复合物加氢峰,从而准确得出TO、NTO的分子量。 展开更多
关键词 maldi-tof-ms Β-环糊精 NTO 辅助激光电离 飞行时间质谱 分子识别能力 复合物 质谱 芥子酸 摩尔比 分子量 三唑 加氢 S图
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含二硫键的蛋白质/多肽的MALDI-TOF MS源内裂解研究 被引量:4
13
作者 姚文斌 汪亿晗 +4 位作者 苏蕊 连文慧 杨洪梅 陈长宝 刘淑莹 《质谱学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期302-307,共6页
应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)法研究含二硫键的人胰岛素与甘精胰岛素酶解液的源内裂解(ISD)。比较了不同基质种类及不同结晶状态对含二硫键的人胰岛素与甘精胰岛素酶解液的源内裂解的影响。结果表明,含二硫键的... 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)法研究含二硫键的人胰岛素与甘精胰岛素酶解液的源内裂解(ISD)。比较了不同基质种类及不同结晶状态对含二硫键的人胰岛素与甘精胰岛素酶解液的源内裂解的影响。结果表明,含二硫键的蛋白质的ISD发生受激光点照射位置的影响,在不同基质与结晶形态的条件下,含二硫键的蛋白质的ISD碎片信息不同。通过分析比较,含二硫键的蛋白质的ISD较容易控制,并且其基质的种类及结晶状态作用很关键。需要获得大量碎片时,使激光照射在样品和阿魏酸(FA)基质形成的大结晶处;不希望出现碎片时,可使用2,4,6-三羟基苯乙酮(THAP)为基质,或使激光照射在样品和其他基质形成的细小均匀结晶处。 展开更多
关键词 含二硫键的蛋白/多肽 辅助激光电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 源内裂(ISD) 结晶
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MALDI-TOF-MS以及FT-ICR-MS在席夫碱镍配合物的应用 被引量:3
14
作者 林志为 丁冬冬 +1 位作者 刘成勇 章慧 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2011年第5期288-292,300,共6页
本研究对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的原理和应用做了简要介绍,并概括了常用基质的应用特点和适用范围。通过基质的选择及测试条件的优化,分别对3种席夫碱镍配合物进行质谱分析,实验结果表明,[M+H]+峰的分子质量... 本研究对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的原理和应用做了简要介绍,并概括了常用基质的应用特点和适用范围。通过基质的选择及测试条件的优化,分别对3种席夫碱镍配合物进行质谱分析,实验结果表明,[M+H]+峰的分子质量以及同位素丰度都与理论计算值十分吻合。采用此法不仅能准确地测定席夫碱镍配合物的分子质量,为席夫碱镍配合物结构的鉴定奠定基础,也是金属有机化合物分子质量测定的有效方法,是快速分析金属有机化合物的工具之一。为了进一步说明质谱在金属配合物测定中的可靠性,辅以傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR-MS)进行确证。 展开更多
关键词 辅助激光电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 席夫碱 金属配合物 傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR-MS)
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基于小分子化合物分析的MALDI-TOF MS新型基质研究进展 被引量:3
15
作者 杨迎晨 陈企发 夏炎 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1381-1387,共7页
基质辅助激光解吸附离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种新型的软电离生物质谱,近十年来得到了快速发展,在小分子化合物的分析检测中发挥了重要作用。其基质的选择一直是关注的重点,目前,研究者们已开发出多种新型MALDI-TOF MS基质... 基质辅助激光解吸附离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种新型的软电离生物质谱,近十年来得到了快速发展,在小分子化合物的分析检测中发挥了重要作用。其基质的选择一直是关注的重点,目前,研究者们已开发出多种新型MALDI-TOF MS基质,主要分为纳米材料和新型有机化合物两大类,基质性能的完善与提高使得MALDI-TOF MS的检测结果有了更高的准确度和灵敏度,更小的背景噪音,更干净的谱图,但目前尚处于研究阶段,现阶段仍无法替代传统有机基质。该文通过对新型基质的研究进展进行整理,总结出不同种类基质的优点、特性及适用对象,并对未来的MALDI-TOF MS基质研究作出了展望。 展开更多
关键词 辅助激光吸附离子化-飞行时间质谱 小分子化合物 新型 综述
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MALDI-TOF质谱准内标法及其用于rhTPO复杂糖一致性研究 被引量:2
16
作者 刘悦玫 侯利平 +2 位作者 杨梅 孟晓光 魏开华 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1458-1463,共6页
采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)准内标法准确测定重组人血小板生成素(rhTPO)仿制药和原研药中4类糖修饰的相对含量,并进行样本间和批间一致性比较。结合多种切糖酶逐步切除rhTPO的N-糖、唾液酸和O-糖;以牛血清白蛋... 采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)准内标法准确测定重组人血小板生成素(rhTPO)仿制药和原研药中4类糖修饰的相对含量,并进行样本间和批间一致性比较。结合多种切糖酶逐步切除rhTPO的N-糖、唾液酸和O-糖;以牛血清白蛋白(BSA)为标准品,与样本非混合点靶;采用MALDI-TOF质谱准内标法检测,分别获得各样本完整含糖分子量及不同层次切糖后分子量;通过分子量差值计算4类糖修饰的相对含量;最后比较仿制药与原研药样本间和批间一致性。以BSA多电荷峰对rhTPO切糖前后的MALDI-TOF质谱测定值进行准内标法校正,BSA多电荷峰之间相对标准偏差(RSD)均≤0.075%,批间RSD为0.001%~0.004%,方法误差均<0.01%。rhTPO仿制药N-糖、O-糖唾液酸、O-糖和糖化糖的相对含量分别约为24.6%、2.9%、9.0%和5.1%,批间一致性良好,且总糖含量与文献值一致;rhTPO原研药N-糖、O-糖唾液酸、O-糖和糖化糖的相对含量分别约为25.6%、2.9%、7.9%和3.5%,总糖含量较文献值偏低。与rhTPO原研药相比,仿制药糖基化糖相对含量基本一致,糖化糖含量有差异。rhTPO糖化糖研究未见文献报道,其差异是不同厂家rhTPO之间差异的重要因素,主要由发酵工艺差异导致。 展开更多
关键词 重组人血小板生成素(rhTPO) 辅助激光吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 准内标法 糖含量 糖化
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MALDI-TOF-MS在女性生殖道恶性肿瘤诊断中的应用 被引量:1
17
作者 滕志淳 傅芬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期468-472,共5页
近年来,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)作为一种新的质谱技术成功检测出许多与疾病相关的新型生物标志物,尤其在肿瘤的诊治方面,MALDI... 近年来,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)作为一种新的质谱技术成功检测出许多与疾病相关的新型生物标志物,尤其在肿瘤的诊治方面,MALDITOF-MS可以快速检测出癌症患者体内特异的蛋白表达、辅助制定患者特异性的疗法、预测患者的治疗效果以及是否有复发的可能等。近年来,国内外学者开展了多项MALDI-TOF-MS在宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌三大女性生殖道恶性肿瘤中的早期筛查诊断研究,其应用于宫颈癌的蛋白组学诊断已被证实具有实验可行性;其可以检测固态、液态等多种形态样本的特点,为寻求无创早期诊断的子宫内膜癌研究者提供了新的研究方法;其在卵巢癌差异蛋白检测、化疗耐药相关分子检测中发挥了重要作用。但仍存在如何提高MALDI-TOF-MS检测的灵敏度以及满足蛋白质组学研究高通量的需要等问题。 展开更多
关键词 辅助激光电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 女性生殖道恶性肿瘤 子宫内膜癌 卵巢癌 宫颈癌
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基于DNA池测序法筛选奶牛高信息量SNP标记的可行性 被引量:23
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作者 初芹 李东 +3 位作者 侯诗宇 石万海 刘林 王雅春 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期691-696,共6页
首先选择139个牛SNP标记,利用DNA池测序法,根据测序峰图中不同碱基信号峰高的比值确定了92个SNP为高信息量标记(比值>1/2);为了进一步验证筛选的准确性,对其中59个标记采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser d... 首先选择139个牛SNP标记,利用DNA池测序法,根据测序峰图中不同碱基信号峰高的比值确定了92个SNP为高信息量标记(比值>1/2);为了进一步验证筛选的准确性,对其中59个标记采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionisation time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术检测了122头荷斯坦牛的基因型。结果显示,检出率高于85%的标记有56个,其平均最小等位基因频率(Minor allele frequency,MAF)为0.41,最小值为0.27,最大值为0.5;MAF>0.3的标记有54个,占96.4%(54/56)。文章结果表明,采用DNA池测序法筛选高信息量SNP标记是可行和可信的。 展开更多
关键词 奶牛 DNA池 SNP标记 辅助激光电离飞行时间质谱技术 最小等位因频率
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毕赤酵母表达解淀粉芽孢杆菌壳聚糖酶及其水解制备可控结构壳寡糖 被引量:7
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作者 程功 焦思明 +3 位作者 冯翠 贾培媛 任立世 杜昱光 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第8期73-78,共6页
优化并全合成解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)壳聚糖酶编码基因并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中实现分泌表达,表达产物的蛋白质量浓度达到0.23 mg/mL。壳聚糖水解酶的最适pH值为5.0,最适温度为45℃,比活力达52.2 U/mL。该... 优化并全合成解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)壳聚糖酶编码基因并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中实现分泌表达,表达产物的蛋白质量浓度达到0.23 mg/mL。壳聚糖水解酶的最适pH值为5.0,最适温度为45℃,比活力达52.2 U/mL。该酶在50℃以下较稳定。利用该酶水解低脱乙酰度壳聚糖并对产物进行了组成及结构分析。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析结果显示,酶解产物中包含聚合度3~15、不同脱乙酰度的壳寡糖。核磁共振鉴定结果显示,壳寡糖组分的还原末端及非还原末端均主要由氨基葡萄糖组成。综上,本研究高效表达了来源于解淀粉芽孢杆菌的壳聚糖酶,并制备了确定末端结构的壳寡糖,为壳寡糖的结构与功能关系研究提供理论支持。 展开更多
关键词 毕赤酵母 淀粉芽孢杆菌 壳聚糖酶 壳寡糖 辅助激光电离飞行时间质谱 核磁共振
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临床微生物快速检测新技术发展现状与前景 被引量:12
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作者 宁雅婷 杨启文 +3 位作者 陈新飞 郁谨菡 李雪 徐英春 《协和医学杂志》 CSCD 2021年第4期427-432,共6页
感染性疾病起病急、进展快,早期精准识别和监测病原体耐药性对患者预后及遏制耐药至关重要。临床微生物常规技术已无法满足快速诊疗的需求,因此快速检测技术成为检验与临床关注的焦点。本文论述快速鉴定与药物敏感性检测的最新技术研究... 感染性疾病起病急、进展快,早期精准识别和监测病原体耐药性对患者预后及遏制耐药至关重要。临床微生物常规技术已无法满足快速诊疗的需求,因此快速检测技术成为检验与临床关注的焦点。本文论述快速鉴定与药物敏感性检测的最新技术研究现状、问题及未来发展要点,旨在为临床微生物实验室未来新技术的引入提供参考。 展开更多
关键词 临床微生物学 快速检测 鉴定 辅助激光电离飞行时间质谱 光谱技术 电化学生物传感器 因组测序 体外抗菌药物敏感性试验
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