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蛇床子素对大鼠成骨细胞中OPG和RANKL基因mRNA表达的影响 被引量：32
1
作者 胡彬 吴翠环 陈璐璐 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第4期415-419,共5页
目的 观察蛇床子素(OST)对体外培养的大鼠成骨细胞中OPG中RANKL基因表达的影响。方法 新生SD大鼠颅骨成骨细胞培养,设空白对照组和用不同浓度蛇床子素培养液(10-7,10-6,10-5mol／L)培养处理的大鼠成骨细胞为实验组,未经处理的细胞为空... 目的 观察蛇床子素(OST)对体外培养的大鼠成骨细胞中OPG中RANKL基因表达的影响。方法 新生SD大鼠颅骨成骨细胞培养,设空白对照组和用不同浓度蛇床子素培养液(10-7,10-6,10-5mol／L)培养处理的大鼠成骨细胞为实验组,未经处理的细胞为空白对照组,分别提取48 h和7 d的细胞总mRNA,用RT-PCR技术分析OPG／RANKL的mRNA表达情况进行半定量比较。结果48h两基因都已有表达,相对空白对照组,OST上调OPG mRNA的表达(P<0.05),但对RANKL的表达无显著影响,OPG／RANKL比值变大;7 d时OPG和RANKL表达都有增加,OST上调OPG的表达(P<0.01),OST在10-5mol／L下调RANKL的表达(P<0.05),OPG／RANKL比值增大。结论OST可以增加大鼠成骨细胞OPG的表达,同时轻微抑制RANKL的表达,早期对RANKL的表达影响不大。 展开更多
关键词 RANKL OPG 基因mrna表达 OST 成骨细胞 大鼠 蛇床子素 空白对照 影响 上调
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莱芜猪和杜洛克猪肌肉H-FABP基因表达量与肌内脂肪和脂肪酸含量关联分析 被引量：17
2
作者 呼红梅 王继英 +3 位作者 郭建凤 张印 沈彦锋 武英 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期64-68,共5页
旨在研究莱芜猪和杜洛克猪间肌肉H-FABP基因mRNA表达差异,同时分析H-FABP基因mRNA表达量与肌内脂肪和脂肪酸含量的相关性,探索莱芜猪肌内脂肪沉积的分子机理。试验选择100kg体重莱芜猪10头、杜洛克7头,采用荧光定量RT-PCR法测定H-FABP基... 旨在研究莱芜猪和杜洛克猪间肌肉H-FABP基因mRNA表达差异,同时分析H-FABP基因mRNA表达量与肌内脂肪和脂肪酸含量的相关性,探索莱芜猪肌内脂肪沉积的分子机理。试验选择100kg体重莱芜猪10头、杜洛克7头,采用荧光定量RT-PCR法测定H-FABP基因mRNA表达丰度,并测定肌内脂肪和脂肪酸含量。结果表明,莱芜猪背最长肌H-FABP基因mRNA的表达量比杜洛克猪高36.16%。莱芜猪和杜洛克猪肌肉H-FABP基因mRNA的表达量与肌内脂肪含量相关显著,H-FABP基因mRNA的表达量和肌内脂肪含量与饱和脂肪酸、饱和+单不饱和脂肪酸含量相关显著,莱芜猪H-FABP基因mRNA的表达量和肌内脂肪含量与多不饱和脂肪酸含量相关显著,与脂肪酸总量相关不显著,但是杜洛克猪则与此相反。莱芜猪和杜洛克猪肌肉H-FABP基因mRNA表达量与肌内脂肪和脂肪酸组成相关显著,该基因可作为莱芜猪肌内脂肪选育的候选基因。 展开更多
关键词 莱芜猪 荧光定量RT-PCR H-FABP基因mrna表达量 肌内脂肪 脂肪酸
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快速老化小鼠胸腺细胞分化与Notch信号相关基因表达关系的研究 被引量：3
3
作者 毕明刚 周文霞 +1 位作者 齐春会 张永祥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期905-909,共5页
目的研究快速老化小鼠(Senescence-accelerated mice,SAM)增龄过程中胸腺T细胞亚群的变化与Notch1、Prese-nilin1、2(PS1、2)、HES1等Notch信号转导通路相关基因mRNA表达变化及这两种变化的关系。方法选择出生后1～8周龄SAM,采用流式细... 目的研究快速老化小鼠(Senescence-accelerated mice,SAM)增龄过程中胸腺T细胞亚群的变化与Notch1、Prese-nilin1、2(PS1、2)、HES1等Notch信号转导通路相关基因mRNA表达变化及这两种变化的关系。方法选择出生后1～8周龄SAM,采用流式细胞技术检测胸腺细胞亚群变化、用荧光实时定量PCR的方法检测Notch1、PS1、PS2、HES1基因mRNA表达的动态变化。结果SAM出生1～2周,胸腺中CD4+CD8+细胞所占比例较高,4周龄后逐渐降低,各周龄SAMP8与SAMR1之间无显著性差异;在CD4+CD8-细胞比例上,SAM呈增龄性增加,1～6周龄的SAMP8与SAMR1之间无显著性差异,8周龄的SAMP8低于SAMR1;在CD4-CD8+细胞比例上,SAM呈增龄性增加,4周龄后的SAMP8均明显高于SAMR1;Notch1、PS2、HES1基因mR-NA表达量呈增龄性增加,各周龄SAMP8的Notch1基因表达水平高于SAMR1,4周龄后SAMP8的PS2、HES1基因表达水平高于SAMR1;PS1基因mRNA表达量呈增龄性降低,4周龄后的SAMP8低于SAMR1。结论Notch1、PS2、HES1的表达与胸腺CD4-CD8+细胞的分化呈正相关,PS1表达与胸腺CD4-CD8+细胞的分化呈负相关。 展开更多
关键词 胸腺细胞分化 NOTCH信号 快速老化小鼠 表达关系 相关基因 CD8^+细胞 基因mrna表达 Notch1 mrna表达量 SAMP8
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PTH作用于老年大鼠骨髓细胞骨代谢相关基因表达的实验方法 被引量：6
4
作者 丰盛梅 高建军 金慰芳 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期219-221,242,共4页
目的　从骨髓微环境角度研究甲状旁腺激素 (parathyroidhormone,PTH)对老年大鼠骨形成刺激作用的分子机制。方法　 8只 2 0月龄雄性大鼠随机平均分两组 ,每组 4只 ,分别给予人重组甲状旁腺激素和生理盐水 ,1次 /天 ,5次 /周 ,8周后处死 ... 目的　从骨髓微环境角度研究甲状旁腺激素 (parathyroidhormone,PTH)对老年大鼠骨形成刺激作用的分子机制。方法　 8只 2 0月龄雄性大鼠随机平均分两组 ,每组 4只 ,分别给予人重组甲状旁腺激素和生理盐水 ,1次 /天 ,5次 /周 ,8周后处死 ,无菌获取股骨和腰椎骨髓细胞 ,用RT PCR法检测成骨功能相关基因核结合因子α1(Cbfα1)、碱性磷酸酶 (ALP)和骨钙素 (BGP)及破骨细胞分化成熟调节基因NF κB受体激活因子配体(RANKL)、骨保护素 (OPG)、巨噬细胞克隆刺激因子 (M CSF)、肿瘤坏死因子受体相关因子 6 (TRAF6 )和白介素 - 6 (IL 6 )mRNA表达水平。结果　PTH显著增加骨髓细胞中成骨功能相关基因Cbfα1、ALP和BGPmRNA表达 (P <0 .0 5～ 0 .0 0 1) ;调整破骨细胞分化成熟调节基因mRNA表达 :下调RANKL、M CSF和TRAF6mRNA表达 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,上调OPGmRNA表达 (P <0 .0 1)和IL 6mRNA表达 (P <0 .0 5 )。股骨与腰椎呈类似变化。结论　PTH增加老年大鼠骨量可能与其强烈刺激骨髓微环境中成骨活性基因表达 ,同时调整破骨细胞分化和功能成熟状态有关。 展开更多
关键词 骨髓细胞 老年大鼠 相关基因表达 PTH 实验方法 肿瘤坏死因子受体相关因子 巨噬细胞克隆刺激因子 骨代谢 破骨细胞分化 基因mrna表达 甲状旁腺激素 骨髓微环境 PCR法检测 成骨功能 0.05 碱性磷酸酶 RANKL 分子机制 刺激作用 雄性大鼠 生理盐水 激活因子 调节基
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阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞护骨素及护骨素配体mRNA表达的影响 被引量：1
5
作者 沈霖 武嘉林 +5 位作者 李蕾 夏远军 高兰 谢晶 周丕琪 杨艳萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期251-254,共4页
目的研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨口服液治疗骨质疏松的分子机制。方法 3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照... 目的研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨口服液治疗骨质疏松的分子机制。方法 3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照组的含药血清。将新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞,制成单细胞悬液,消化传代,取二代培养的成骨细胞,制成细胞悬液。培养细胞被分为5组,分别加同体积药液,对照组仅加培养液,继续培养。采用MTT比色分析、3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法测定成骨细胞增殖,用放免法测定细胞内BGP含量,RT-PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL mRNA的表达。结果阿胶强骨口服液含药血清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖,与对照组相比,差异显著(P<0．05)。成骨细胞OPG基因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清100ml／L时最强,与雌激素组比较无显著性差异(P>0 05),且明显高于对照组(P<0．05)。成骨细胞RANKL基因mRNA表达在1000ml／L阿胶强骨口服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异(P<0 05),且明显低于对照组(P<0．05)。结论阿胶强骨口服液可在细胞水平上促进骨的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂,分子水平上调节 OPG／RANKL表达而治疗骨质疏松。 展开更多
关键词 阿胶强骨口服液 含药血清 护骨素配体 胎鼠 基因mrna表达 RANKL Wistar大鼠 MTT比色分析 显著性差异 颅骨成骨细胞 新生SD大鼠 成骨细胞增殖 胸腺嘧啶核苷 骨质疏松 对照组 单细胞悬液 放免法测定 PCR测定 OPG 雌激素 分子机制
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苯并（a）芘对大鼠肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因表达的影响
6
作者 常福厚 白图雅 +2 位作者 吕晓丽 余婉佳 胡玉霞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期1-1,共1页
目的观察苯并（a）芘（Benzo（a）pyrene,B[a]P）对SD大鼠肺组织内细胞色素P4501A2（cytochromeP4501A2,CYP1A2）和细胞色素P4502E1（cytochromeP4502E1,CYP2E1）基因表达的影响.方法（1）动物及给药方法：40只健康SD大鼠,♀♂各半,清洁... 目的观察苯并（a）芘（Benzo（a）pyrene,B[a]P）对SD大鼠肺组织内细胞色素P4501A2（cytochromeP4501A2,CYP1A2）和细胞色素P4502E1（cytochromeP4502E1,CYP2E1）基因表达的影响.方法（1）动物及给药方法：40只健康SD大鼠,♀♂各半,清洁级,200～250g,随机分为B[a]P25mg·kg^-1、B[a]P50mg·kg^-1和B[a]P100mg·kg^-1染毒组和空白对照组,每组10只.各染毒组B[a]P溶于橄榄油成均匀的混悬液,空白对照组给等体积的橄榄油,每日1次,连续灌胃14d（染毒各组在d14一次性腹腔注射各个剂量的B[a]P后）,禁食不禁水24h后断头放尽血液,剖胸迅速取出肺组织放入液氮中速冻,后迅速转移至-80℃冰箱保存备用（用于总RNA提取和基因表达分析）.（2）大鼠肺组织RNA的提取：参照RNA提取试剂盒说明书方法提取大鼠肺总RNA,测定RNA溶液的吸光度（A260）和A260/A280以判断总RNA的浓度和纯度,甲醛变性琼脂糖凝胶电泳以判断RNA的完整性.（3）逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）：用RT-PCR反应试剂盒检测CYP1A2和CYP2E1基因mRNA的表达,以β-actin作为内对照,分析B[a]P对大鼠肺组织中CYP1A2和CYP2E1基因mRNA表达的影响.结果与空白对照组相比,高、中剂量的B[a]P组可显著影响肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因的表达,差异具有统计学意义（P〈0.05）,而低剂量的B[a]P组与空白对照组比较差异无显著性（P〉0.05）.结论一定剂量的B[a]P可显著影响肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因的表达,提示CYP1A2和CYP2E1基因可能参与B[a]P的代谢过程,催化B[a]P生成有毒的代谢产物,本研究对B[a]P相关的代谢酶的影响及B[a]P致癌机制的探讨具有-定的理论意义,为进一步探索B[a]P的致癌机理及与代谢酶相关基因的相互作用奠定一定的研究基础. 展开更多
关键词 CYP2E1基因 CYP1A2 基因表达分析 大鼠肺组织 苯并(A)芘 总RNA提取 基因mrna表达 逆转录聚合酶链反应
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吉西他滨治疗RRM1阴性晚期难治非小细胞肺癌患者1例 被引量：1
7
作者 赵美玲 杨海虹 何建行 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第6期550-553,共4页
目前吉西他滨/铂类方案是晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的标准治疗方法之一。Anderson等[1]报告吉西他滨单药治疗NSCLC客观缓解率（objective response rate,ORR）为20%;国内管忠震等[2]报道吉西他滨联合顺铂... 目前吉西他滨/铂类方案是晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的标准治疗方法之一。Anderson等[1]报告吉西他滨单药治疗NSCLC客观缓解率（objective response rate,ORR）为20%;国内管忠震等[2]报道吉西他滨联合顺铂方案的疾病控制率为56.1%,部分缓解率为43.9%,中位缓解时间（174±18.5）天。核糖核苷酸还原酶1（ribonucleotide reductase M1,RRM1）是肿瘤抑制基因,也是吉西他滨的分子靶点。RRM1 mRNA高表达导致肿瘤细胞DNA损伤修复能力增强,从而对吉西他滨/铂类方案产生耐药,RRM1mRNA低表达提示对吉西他滨敏感[3]。基因mRNA表达和蛋白表达有一定的相关性,因此我们采用半定量免疫组化技术检测肿瘤组织RRM1的蛋白表达,现将1例吉西他滨（健择）反复治疗的难治性晚期NSCLC患者的治疗情况及对初诊获得的肿瘤组织进行RRM1等蛋白的免疫组化检测报告如下。 展开更多
关键词 晚期非小细胞肺癌 吉西他滨 RRM1 治疗方法 难治性 肺癌患者 基因mrna表达 ANDERSON
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海藻酸钠-HCG制剂对雌性金鱼(Carassius auratus)生殖激素水平的影响
8
作者 侯志帅 温海深 尹相菡 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2014年第5期33-39,共7页
采用海藻酸钠(Na Alg)-HCG缓释制剂进行激素埋植实验。实验开始时,雌性金鱼(Carassius auratus)卵母细胞处于Ⅲ期。实验期间记录雌性金鱼性腺发育、放免(RIA)法测定血清性激素含量并且通过RT-PCR检测激素相关基因表达。结果表明,埋植Na ... 采用海藻酸钠(Na Alg)-HCG缓释制剂进行激素埋植实验。实验开始时,雌性金鱼(Carassius auratus)卵母细胞处于Ⅲ期。实验期间记录雌性金鱼性腺发育、放免(RIA)法测定血清性激素含量并且通过RT-PCR检测激素相关基因表达。结果表明,埋植Na Alg-HCG缓释激素后,雌性金鱼性成熟系数(GSI)在6-21 d显著高于对照组,血清睾酮(T)和雌二醇(E2)水平在6-30 d显著高于对照组;性腺芳香化酶基因(CYP19A基因)和雌激素受体基因(ERα基因)m RNA相对表达量分别在2-21 d、14-30 d内显著高于对照组,其性腺GH基因m RNA相对表达量变化不显著。研究结果显示,一次性埋植Na Alg-HCG缓释制剂,与雌性金鱼繁殖相关的生物学指标、激素水平、基因表达量较对照组产生明显变化,同时这种缓释制剂可以作为埋植激素的载体。 展开更多
关键词 缓释制剂 海藻酸钠-HCG 性激素 基因mrna表达
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