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拟南芥AtIDD4基因过表达植株构建及其对生长发育的影响
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作者 于德嘉 张国斌 +5 位作者 陈健鑫 徐晓东 李林倩 董萍萍 郭丽红 杨红玉 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期2583-2590,共8页
【目的】构建拟南芥AtIDD4基因过量表达植物,以期探究拟南芥IDD基因家族中AtIDD4基因在调控植物生长发育与抗逆反应应答中的作用。【方法】提取拟南芥叶片总RNA反转成cDNA,利用特异性引物PCR法扩增出CDS片段。将目的片段与花椰菜花叶病... 【目的】构建拟南芥AtIDD4基因过量表达植物,以期探究拟南芥IDD基因家族中AtIDD4基因在调控植物生长发育与抗逆反应应答中的作用。【方法】提取拟南芥叶片总RNA反转成cDNA,利用特异性引物PCR法扩增出CDS片段。将目的片段与花椰菜花叶病毒的35S启动子连接得到重组质粒,将质粒转化到农杆菌中,构建35S-AtIDD4CDS农杆菌表达载体,利用花序浸染方法将其导入拟南芥野生型植株(WT)中。将收取的T0代种子播种于含有潮霉素的MS培养基上进行抗性筛选直到获得T3代植株,得到AtIDD4基因的超表达植株AtIDD4-OE。【结果】半定量和定量RT-PCR结果表明,相较于拟南芥野生型植株,AtIDD4-OE植株中AtIDD4基因的表达量显著提高,约为野生型植株的2倍。表型观察结果表明,在MS培养基中垂直培养14 d的AtIDD4-OE幼苗根长和鲜重等指标显著低于WT幼苗。土壤中生长14 d的AtIDD4-OE植株与WT植株比较,生长状态弱,植株矮小,莲座叶面积较小。【结论】拟南芥AtIDD4基因的过量表达会抑制拟南芥植株的生长,其在拟南芥生长发育过程中以负调控因子发挥作用。 展开更多
关键词 拟南芥 AtIDD4 基因过表达植株构建 生长
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