期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
基因转染技术及其在肿瘤研究中应用的研究进展 被引量:1
1
作者 张敏 刘微 +4 位作者 李擎 郭春燕 何俊霞 斯日古楞 吉日木图 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期71-74,共4页
基因转染技术应用于肿瘤基因治疗和基因功能的研究已受到广泛的关注。基因转染的方法包括物理法、化学法和生物法,它们各有优缺点。文章主要概述基因转染的基本方法及其在肿瘤基因功能研究及基因治疗中的应用。
关键词 基因转染技术 肿瘤 基因治疗 基因功能
在线阅读 下载PDF
应用基因转染技术检测白血病患者骨髓细胞中DNA的转化活性
2
作者 王福生 吴祖泽 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1993年第2期187-188,共2页
急性髓系白血病(acute myeloid leuke-mia,AML)是高度恶性的造血系统的肿瘤,已发现ras等癌基因参与各系造血细胞的增殖与分化的调控过程,这些癌基因内部遗传信息的异常(即形成激活的癌基因或转化基因)与白血病的发生有密切的联系。通过D... 急性髓系白血病(acute myeloid leuke-mia,AML)是高度恶性的造血系统的肿瘤,已发现ras等癌基因参与各系造血细胞的增殖与分化的调控过程,这些癌基因内部遗传信息的异常(即形成激活的癌基因或转化基因)与白血病的发生有密切的联系。通过DNA-磷酸钙共沉淀基因转染NIH/3T3受体细胞,诱发转化灶的形成,是检测和鉴定转化基因的重要途径。基于这一原理。 展开更多
关键词 基因转染技术 DNA 细胞生长 基因 MYELOID 基因 化灶 造血细胞 受体细胞 幼稚细胞
在线阅读 下载PDF
nm23-H1基因逆转肺癌细胞转移表型的功能鉴定 被引量:2
3
作者 郑海霞 申东兰 +4 位作者 周清华 何艳玲 彭安 朱文 王艳萍 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期335-336,共2页
关键词 NM23-H1基因 移表型 肺癌细胞 功能鉴定 metastasis 肿瘤移抑制基因 侵袭和 基因转染技术 细胞癌变 功能异常 基因结构 细胞水平 移潜力 研究利用 基因
在线阅读 下载PDF
SmacsiRNA慢病毒载体的构建及其对Smac基因沉默效果的鉴定 被引量:1
4
作者 李云 郑广瑛 蒋瑜 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期199-204,共6页
背景研究证实半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂(Smac)蛋白是肿瘤细胞的促凋亡蛋白,我们先前的研究表明,Smac蛋白在白内障患者LECs中表达量明显高于正常人,因此推测沉默LECs中Smac的表达可抑制LECs的过度凋亡,但如何成功将Smacsi... 背景研究证实半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂(Smac)蛋白是肿瘤细胞的促凋亡蛋白,我们先前的研究表明,Smac蛋白在白内障患者LECs中表达量明显高于正常人,因此推测沉默LECs中Smac的表达可抑制LECs的过度凋亡,但如何成功将SmacsiRNA转染进入LECs是研究的关键。目的构建人SmacsiRNA慢病毒载体并对人LECs进行感染,研究慢病毒载体构建方法及其在人晶状体上皮细胞HLE—B3中的干扰效率,利用RNA干扰(RNAi)技术建立Smac低表达的HLE—B3株。方法根据我们前期的工作设计并合成针对Smac基因序列的siRNA序列,将合成的双链DNA以T4噬菌体DNA连接酶与GV118慢病毒载体相连接,转化DH5α感受态细胞,采用PCR筛选阳性克隆,经测序鉴定正确后,感染293T细胞,收集上清液并标定病毒滴度。用重组慢病毒感染HLE—B3细胞,荧光显微镜下观察转染后的阳性HLE—B3细胞数并计算病毒感染复数(MOI)。将常规培养的HLE—B3细胞分为阴性对照组、空质粒组和GV118-Smac—siRNA1组,阴性对照组为常规培养的细胞,空质粒组细胞仅转染不含慢病毒载体的siRNA质粒,GV118-Smac·siRNA1组细胞转染GV118-Smac—siRNA1质粒,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中SmacmRNA的相对表达量。结果构建的重组载体GV118-Smac—siRNAl转化DH5c感受态细胞后阳性克隆产物大小为340bp,空载的克隆产物为299bp,与预期结果相符,测序结果显示合成的Smac—siRNA1与预期目的序列一致。构建的GV118-Smac—siRNA1病毒滴度为3.0x10。TU/m1。感染HLE.B3细胞后荧光显微镜下可见MOI为100时,细胞毒性低且感染效率高,约为82%。阴性对照组、空载质粒组和GV118-Smac—siRNA1质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量分别为(101.290±8.349)%、(92.330±6.320)%和(32.540±4.221)%,3个组间总体比较差异有统计学意义(F=32.871,P〈0.01),其中GV118-Smac—siRNA1质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量较阴性对照组明显下降,差异有统计学意义(P=0.000),而空载质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量略低于阴性对照组,但组间差异无统计学意义(P=0.535)。结论本研究中成功构建了siRNA慢病毒载体GV118-Smac—siRNA1,其转染HLE—B3效率高,该siRNA载体能够有效地抑制人LECs中Smac基因的表达。 展开更多
关键词 线粒体蛋白 凋亡 小干扰RNA 基因载体 慢病毒载体/基因 基因转染技术 晶状体上皮细胞
在线阅读 下载PDF
pEGFP-N1-亚麻苦甙水解酶重组真核表达载体的构建及亚麻苦甙水解酶在SGC-7901细胞中的表达 被引量:1
5
作者 马俊 陈明浩 +5 位作者 窦科峰 李军 郑伟 霍斌亮 张福琴 李海民 《医学研究生学报》 CAS 2008年第7期678-681,I0004,共5页
目的:构建携带亚麻苦甙水解酶(lis)基因的重组真核表达载体,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,导入SGC-7901细胞中表达。方法:提取木薯总RNA,PCR扩增lis目的基因,将该基因全长定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒载体。用电穿... 目的:构建携带亚麻苦甙水解酶(lis)基因的重组真核表达载体,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,导入SGC-7901细胞中表达。方法:提取木薯总RNA,PCR扩增lis目的基因,将该基因全长定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒载体。用电穿孔法转染体外培养的SGC-7901细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察lis-EGFP融合蛋白在细胞中的表达。用PCR检测lis转录水平的表达,用Western blot法验证lis蛋白水平的表达。结果:酶切和测序证实pEGFP-N1-lis重组质粒构建正确,重组质粒载体在SGC-7901细胞中获得了表达,表达的融合蛋白具有lis和EGFP的双重活性。结论:通过基因克隆方法成功地构建了pEGFP-N1-lis重组质粒载体,并且在SGC-790细胞中稳定表达。 展开更多
关键词 木薯B-葡萄糖苷酸 聚合酶链反应 基因转染技术 自杀基因
在线阅读 下载PDF
本期导读
6
《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期I0001-I0001,共1页
本期主要刊出视网膜疾病及诱导多能干细胞的相关研究新进展。视网膜疾病是眼科的一大类疾病,本期对缺氧性视网膜疾病、黄斑病变等眼科研究热点的相关应用基础研究和临床研究进行了报道,还涉及到视网膜疾病相关的新型药物研究、光照节... 本期主要刊出视网膜疾病及诱导多能干细胞的相关研究新进展。视网膜疾病是眼科的一大类疾病,本期对缺氧性视网膜疾病、黄斑病变等眼科研究热点的相关应用基础研究和临床研究进行了报道,还涉及到视网膜疾病相关的新型药物研究、光照节律改变及光损伤等在视网膜疾病中的研究。诱导多能干细胞(iPSCs)是通过基因转染技术将转录因子导入动物或人的体细胞内,使体细胞直接重构成为胚胎干细胞样的多潜能细胞。 展开更多
关键词 视网膜疾病 多能干细胞 导读 基因转染技术 临床研究 黄斑病变 录因子 缺氧性
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部