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以山羊BLG基因调控成分构建乳腺特异性表达载体的研究
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作者 张恩平 石玉强 +1 位作者 潘庆杰 刘林丽 《莱阳农学院学报》 2002年第3期168-170,182,共4页
为构建乳腺特异性表达载体 ,本研究利用PCR方法克隆了山羊BLG基因 5′调控成分 (2 .9Kb) ,包含 5′侧翼序列 (2 .1Kb) ,第一外显子及第一内含子 (80 0bp)。经序列分析后 ,用于构建表达载体。为验证此调控成分的活性 ,将人凝血因子ⅨcDN... 为构建乳腺特异性表达载体 ,本研究利用PCR方法克隆了山羊BLG基因 5′调控成分 (2 .9Kb) ,包含 5′侧翼序列 (2 .1Kb) ,第一外显子及第一内含子 (80 0bp)。经序列分析后 ,用于构建表达载体。为验证此调控成分的活性 ,将人凝血因子ⅨcDNA克隆在其下游构建表达载体 ,转化原代培养的山羊乳腺上皮细胞 ,提取细胞培养液经ELISA免疫法测定人凝血因子Ⅸ蛋白的含量高达 15ng/ml。基于此 ,可以初步断定此调控序列可以调节外源基因在乳腺细胞中特异性表达 。 展开更多
关键词 基因调控成分 山羊 BLG基因 人凝血因子ⅨcDNA 乳腺上皮细胞 表达载体 外源活性蛋白
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