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GATA-3基因表达质粒的构建及在大鼠脑细胞中的表达
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作者 俞琼 杨培增 +3 位作者 黄祥坤 李兵 纪淑兴 张锐 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期231-233,共3页
【目的】 构建GATA-3基因正义?反义重组质粒,为进一步研究GATA-3在T细胞发育分化中的作用提供基础?【方法】 采用PCR技术扩增GATA-3基因,通过酶切?连接?转化等分子生物学技术,将该全长基因亚克隆至表达载体pCDNA3,构建质粒后转染大肠杆... 【目的】 构建GATA-3基因正义?反义重组质粒,为进一步研究GATA-3在T细胞发育分化中的作用提供基础?【方法】 采用PCR技术扩增GATA-3基因,通过酶切?连接?转化等分子生物学技术,将该全长基因亚克隆至表达载体pCDNA3,构建质粒后转染大肠杆菌,并在大肠杆菌中扩增?同时用脂质体法感染大鼠脑细胞?【结果】 从大鼠脑细胞中成功地克隆出全长1335 bp的GATA-3基因,并经序列分析筛选证实GATA-3基因以正向?反向重组转染入载体,且在大肠杆菌中得到扩增,同时用RT-PCR方法检测到反义重组体对大鼠脑细胞表达该基因具有抑制作用?【结论】通过基因克隆方法成功构建了GATA-3基因正义?反义表达质粒,并初步证实反义GATA-3具有抑制细胞正常表达作用,为深入研究GATA-3对T细胞发育分化的影响奠定了基础? 展开更多
关键词 GATA-3基因 基因表达质粒 大鼠 脑细胞 PCR技术 分子生物学
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中国流行株HIV及其与细胞因子基因共表达核酸疫苗质粒的构建及表达
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作者 郭焱 郭巍 +4 位作者 顾红缨 李璐 于伟光 刘斌 罗晶 《动物医学进展》 CSCD 2003年第1期78-80,共3页
以表达中国流行株HIV-1gp120基因的核酸疫苗质粒pGP及共表达中国流行株HIV-1gp120基因与IFN基因的核酸疫苗质粒pG-PIFN转染BHK-21细胞,以间接免疫荧光鉴定其表达产物。将上述两种质粒经胫前肌注射BALB/c鼠,检测gp120抗体的产生情况及Con... 以表达中国流行株HIV-1gp120基因的核酸疫苗质粒pGP及共表达中国流行株HIV-1gp120基因与IFN基因的核酸疫苗质粒pG-PIFN转染BHK-21细胞,以间接免疫荧光鉴定其表达产物。将上述两种质粒经胫前肌注射BALB/c鼠,检测gp120抗体的产生情况及ConA和Lps诱导的T细胞增殖能力。结果显示,荧光显微镜下pGPIFN转染细胞可见绿色荧光而pGP转染细胞未见绿色荧光。pGPIFN与pGP均可刺激小鼠产生抗gp120抗体,协同注射gp120和IFN基因的小鼠产生的抗体滴度明显高于单独注射gp120的小鼠。pGPIFN免疫鼠对ConA和Lps诱导的T细胞增殖能力明显高于单独注射gp120的小鼠。实验结果表明,协同应用IFN基因可明显加强HIV-1gp120基收稿日期:2002-07-19基金项目:国家自然科学基金项目(3977066);国家杰出青年基金项目(39825119)作者简介:郭 焱(1963-),女,吉林省长春市人,长春中医学院基础医学部副教授,硕士,主要从事分子病毒学研究工作。因的免疫反应,为中国流行株HIV-1核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。 展开更多
关键词 中国流行株HIV 细胞因子 基因表达核酸疫苗质粒 人类免疫缺陷病毒 基因表达
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注射PGRF基因质粒于仔猪骨骼肌后促生长及代谢调控
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《生物技术通报》 CAS CSCD 2004年第5期57-57,共1页
关键词 仔猪 骨骼肌 下丘脑生长激素促性腺激素释放因子 基因表达质粒 PGRF 生长激素释放因子
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