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基因枪介导bar基因表达盒转化甜玉米初步研究
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作者 祁喜涛 吴景 +3 位作者 杨婷 文天祥 郑锦荣 胡建广 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第S1期15-17,28+5,共5页
以超甜玉米优良自交系1132幼胚的愈伤组织为受体材料,采用基因枪介导法将bar基因表达盒(启动子+基因+终止子)导入胚性愈伤组织,经选择培养、胚状体诱导、再生等过程,获得38个株系共101株转基因玉米。对转基因植株的叶片涂抹除草剂basta... 以超甜玉米优良自交系1132幼胚的愈伤组织为受体材料,采用基因枪介导法将bar基因表达盒(启动子+基因+终止子)导入胚性愈伤组织,经选择培养、胚状体诱导、再生等过程,获得38个株系共101株转基因玉米。对转基因植株的叶片涂抹除草剂basta进行抗性鉴定,其中有8个株系共22株表现抗性;进一步进行PCR分析,结果表明,其中有6个株系共15株为阳性。试验结果初步证明bar基因已整合到1132的基因组中,转化效率为3%。转基因表达盒完整性分析表明,bar基因表达盒在受体基因组中的结构是完整的。 展开更多
关键词 基因枪介导 BAR基因 基因表达盒 玉米
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基因枪转化的bar基因表达盒在水稻中的重组结构 被引量:4
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作者 赵艳 钱前 +3 位作者 王慧中 高振宇 颜美仙 黄大年 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期469-474,共6页
用Southern杂交和引物组合PCR技术研究了基因枪转化的bar基因表达盒(包括启动子、编码区和终止子)在水稻(Oryza sntiva L.)中的重组结构。bar基因表达盒的多个拷贝通过重组连接形成l~3个转基因串联子,彼此邻近整合在受体基因组... 用Southern杂交和引物组合PCR技术研究了基因枪转化的bar基因表达盒(包括启动子、编码区和终止子)在水稻(Oryza sntiva L.)中的重组结构。bar基因表达盒的多个拷贝通过重组连接形成l~3个转基因串联子,彼此邻近整合在受体基因组内一个较大的染色体区域,不同转基因串联子之间由水稻基因组DNA间隔,形成转基因簇。bar基因表达盒形成转基因串联子时,存在头接头、头接尾、尾接尾3种连接方式,通常伴随着bar基因片段的截短。 展开更多
关键词 bar基因表达盒 基因枪法转化 基因串联子 重组结构 水稻
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含GFP-Lac Z基因的伪狂犬病病毒上海株缺失株的构建 被引量:3
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作者 姜焱 张常印 +1 位作者 黄伟坚 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期120-122,共3页
在伪狂犬病病毒 (PRV)上海株gI和gE基因克隆鉴定的基础上 ,用BamHⅠ +BstpⅠ去掉gE基因的 5′端 36 3bp ,在缺失位置插入绿色荧光蛋白 (GFP)和LacZ基因 ,构建含双报告基因的PRV SH转移载体pgEI GFPZ。将pgEI GFPZ转染PRV SH的BHK 2 1细... 在伪狂犬病病毒 (PRV)上海株gI和gE基因克隆鉴定的基础上 ,用BamHⅠ +BstpⅠ去掉gE基因的 5′端 36 3bp ,在缺失位置插入绿色荧光蛋白 (GFP)和LacZ基因 ,构建含双报告基因的PRV SH转移载体pgEI GFPZ。将pgEI GFPZ转染PRV SH的BHK 2 1细胞 ,待出现 80 %病变后收获病毒 。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 上海株 GFP-Lac Z基因缺失株 蚀斑法 绿色荧光蛋白 基因表达盒 疫苗
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人凝血因子IX在脆壁克鲁维酵母中的表达与分泌 被引量:1
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作者 姚笑迪 霍克克 +2 位作者 方季 戈万忠 李育阳 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第6期26-29,共4页
通过改造人凝血因子IX基因(h-FIX)使其与乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis)的分泌信号序列(Kss)融合,并置于脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)LAC4基因调控型启动子的控制之下,构建成h-FIX基因表达盒。将此表达盒插入克鲁维酵母的整合质粒... 通过改造人凝血因子IX基因(h-FIX)使其与乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis)的分泌信号序列(Kss)融合,并置于脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)LAC4基因调控型启动子的控制之下,构建成h-FIX基因表达盒。将此表达盒插入克鲁维酵母的整合质粒,得到了一个高稳定的h-FIX基因整合表达载体pHKB202-FP。经摇瓶培养并以半乳糖诱导此表达载体转化的酵母菌株,ELISA检测显示酵母上清液中的人凝血因子IX表达量可达到约200 ng/ml。此结果表明人凝血因子IX蛋白首次成功地在脆壁克鲁维酵母中得到了表达和分泌。这对于促进人凝血因子IX的基因工程产业化具有实际意义。 展开更多
关键词 凝血因子 脆壁克鲁维酵母 血友病 分泌信号序列 乳酸克鲁维酵母 基因调控型启动子 基因表达盒 IX蛋白
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