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重组青霉素G酰化酶在枯草芽孢杆菌中的表达条件优化被引量：10: 1; 作者黄鹤杨晟 +2 位作者李仁宝黄晓冬袁中一《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期173-177,共5页; 为获得巨大芽孢杆菌青霉素 G酰化酶 (PGA)的高产菌株和条件 ,构建了分泌表达 PGA的基因工程枯草杆菌菌株 ,对表达条件进行了优化 .以 LB作为初始培养基 ,考察了温度、苯乙酸、装液量、碳源对于工程菌 PGA产量的影响 .实验发现重组细胞... 展开更多; 关键词青霉素G酰化酶巨大芽孢杆菌枯草芽孢杆菌基因表达条件优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

成骨细胞条件性视黄酸信号失活小鼠模型的构建与验证: 2; 作者孙思远刘媛琪 +4 位作者崔怡雯黄紫晗梅李代庆刚江凌勇《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期676-686,共11页; 目的·构建并验证可模拟维生素A缺乏症(vitamin A deficiency,VAD)导致的颅颌面骨畸形且出生后可存活的模型小鼠。方法·运用Cre-LoxP重组酶系统,通过将Osx^(Cre)与Rosa26dnRARα/dnRARα基因型的小鼠多代杂交,构建成骨细胞视... 展开更多; 关键词维生素A缺乏症颅颌面骨畸形成骨细胞显性负突变基因条件性表达小鼠视黄酸受体; 在线阅读下载PDF 职称材料

铁调素过表达对雌性去势小鼠铁代谢和骨代谢指标的影响被引量：7: 3; 作者张辉王爱飞 +5 位作者吴加东杨帆张晓王亮张鹏徐又佳《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期375-379,共5页; 目的探讨铁调素基因过表达对去势小鼠铁代谢和骨代谢指标的影响。方法假手术组(sham组)和双侧卵巢切除组(OVX组)均为8周C57/BL6雌性野生型小鼠,实验组(hamp组)为铁调素基因条件性过表达小鼠,每组8只。OVX组和hamp组切除双侧卵巢,sham组... 展开更多; 关键词铁调素基因条件性过表达去卵巢骨质疏松症; 在线阅读下载PDF 职称材料

拟南芥热激启动子(HSP18.2)在水稻中的启动效率探讨被引量：1: 4; 作者文春描徐正君 +6 位作者蔡平钟向跃武张志雄刘俊王闵霞蒲志刚张志勇《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期323-326,共4页; 从拟南芥中克隆热激蛋白基因HSP18.2的启动子区域,构建了由HSP18.2启动子引导的GUS融合基因,并经农杆菌介导导入籼稻愈伤组织中。对热激和常温条件下转基因籼稻愈伤组织中GUS活性的比较测定表明,HSP18.2启动子在热激条件下可驱动GUS报... 展开更多; 关键词水稻基因条件表达热激处理 Β-葡萄糖醛酸苷酶启动子; 在线阅读下载PDF 职称材料

脂肪细胞Npy4r促进高脂饮食诱导肥胖被引量：2: 5; 作者王澜曾帆 +3 位作者黄荣凤林树张志辉李旻典《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期144-155,共12页; 脂肪组织的神经支配与调节在能量代谢稳态的维持中发挥重要作用。神经肽Y(neuropeptide Y, NPY)及其脂肪细胞受体信号通路促进高脂饮食诱导的肥胖,其中NPY受体1(NPY receptor Y1,NPY1R)与受体2(NPY2R)是主要的NPY外周受体。NPY受体4(NPY... 展开更多; 关键词条件性基因回复表达 loxP-STOP-loxP 脂肪细胞脂肪组织肥胖; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组青霉素G酰化酶在枯草芽孢杆菌中的表达条件优化被引量：10: 1; 作者黄鹤杨晟李仁宝黄晓冬袁中一; 机构中国科学院上海生物化学研究所山东新华制药厂; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期173-177,共5页; 文摘为获得巨大芽孢杆菌青霉素 G酰化酶 (PGA)的高产菌株和条件 ,构建了分泌表达 PGA的基因工程枯草杆菌菌株 ,对表达条件进行了优化 .以 LB作为初始培养基 ,考察了温度、苯乙酸、装液量、碳源对于工程菌 PGA产量的影响 .实验发现重组细胞产酶不再需要变温和苯乙酸诱导 .充足的通气量和适当浓度的淀粉可使细胞密度及 PGA表达量大为提高 .表达条件优化后 ,菌体 A60 0由 3提高到 2 0 ,PGA的表达量由 3～ 6U/ml提高到 35～ 40 U/ml,为目前生产用巨大芽孢杆菌表达量的 6倍 .; 关键词青霉素G酰化酶巨大芽孢杆菌枯草芽孢杆菌基因表达条件优化; Keywords penicillin G acylase, Bacillus megaterium Bacillus subtilis, optimization; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学] TQ460.38 [化学工程—制药化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名成骨细胞条件性视黄酸信号失活小鼠模型的构建与验证: 2; 作者孙思远刘媛琪崔怡雯黄紫晗梅李代庆刚江凌勇; 机构上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科上海-新西兰口腔医学联合实验室/口腔颅颌面基础与临床研究中心新西兰奥塔哥大学牙学院正畸科上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔第二门诊部; 出处《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期676-686,共11页; 基金上海交通大学医学院“双百人”项目(20221809) 中央高校基本科研业务费专项资金(YG2023ZD14) +6 种基金海南省自然科学基金(824MS152) 上海交通大学医学院附属第九人民医院原创项目(JYYC003)。; 文摘目的·构建并验证可模拟维生素A缺乏症(vitamin A deficiency,VAD)导致的颅颌面骨畸形且出生后可存活的模型小鼠。方法·运用Cre-LoxP重组酶系统,通过将Osx^(Cre)与Rosa26dnRARα/dnRARα基因型的小鼠多代杂交,构建成骨细胞视黄酸受体α显性负突变体(dominant-negative retinoid acid receptorαmutation,dnRARα)条件性过表达小鼠Osx^(Cre);Rosa26^(dn/dn),实现成骨细胞视黄酸信号条件性失活以模拟VAD状态。取Osx^(Cre);Rosa26^(dn/dn)小鼠及其同窝对照小鼠股骨骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)与颅顶骨细胞,成骨诱导后,采用蛋白质印迹法(Western blotting)验证成骨细胞中视黄酸受体α(retinoid acid receptorα,RARα)蛋白的表达水平。取Osx^(Cre);Rosa26^(dn/dn)小鼠及其同窝对照小鼠颅顶骨细胞经诱导形成的成骨细胞,采用双荧光素酶报告基因技术验证视黄酸信号通路抑制程度。同时分别应用表达Cre、eGFP的腺病毒(Ad-eGFP与Ad-Cre)感染Rosa26^(dn/dn)小鼠股骨BMSC与颅顶骨细胞,成骨诱导后运用相同方法评价显性负突变蛋白表达水平与视黄酸信号通路抑制程度。取6周龄小鼠颅骨,运用Micro-CT及三维重建技术验证Osx^(Cre);Rosa26^(dn/dn)模型小鼠颅颌面骨畸形表型。结果·Western blotting结果显示,Osx^(Cre);Rosa26^(dn/dn)小鼠股骨及颅顶骨成骨细胞相较同窝对照小鼠表现出RARα蛋白水平上调。双荧光素酶报告基因实验结果显示Osx^(Cre);Rosa26^(dn/dn)小鼠成骨细胞的视黄酸反应元件(retinoid acid response element,RARE)活性相较同窝对照小鼠下调(P<0.05)。同时,Ad-Cre感染后Rosa26^(dn/dn)小鼠股骨及颅顶骨成骨细胞相较Ad-eGFP感染后表现出RARα蛋白水平上调,成骨细胞的RARE活性下调(P<0.05)。Micro-CT及三维重建结果显示,6周龄Osx^(Cre);Rosa26^(dn/dn)小鼠颅骨呈现长度缩短、骨发育不全等VAD样颅颌面骨畸形。结论·成功构建了成骨细胞条件性视黄酸信号失活小鼠模拟VAD所致颅颌面骨畸形,为未来VAD所致颅颌面骨畸形出生后致病机制与潜在靶点的研究提供了新的模型与途径。; 关键词维生素A缺乏症颅颌面骨畸形成骨细胞显性负突变基因条件性表达小鼠视黄酸受体; Keywords vitamin A deficiency(VAD) craniofacial skeletal deformity osteoblast conditional dominant-negative mutant expressing mice retinoic acid receptor(RAR); 分类号 R78 [医药卫生—口腔医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名铁调素过表达对雌性去势小鼠铁代谢和骨代谢指标的影响被引量：7: 3; 作者张辉王爱飞吴加东杨帆张晓王亮张鹏徐又佳; 机构苏州大学附属第二医院骨科苏州大学骨质疏松诊疗技术研究所苏州大学附属第二医院中医骨伤科; 出处《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期375-379,共5页; 基金国家自然科学基金(81572179) 江苏省临床医学科技专项(BL2014044) +2 种基金苏州大学附属第二医院预研基金(SDFEYQN1608); 文摘目的探讨铁调素基因过表达对去势小鼠铁代谢和骨代谢指标的影响。方法假手术组(sham组)和双侧卵巢切除组(OVX组)均为8周C57/BL6雌性野生型小鼠,实验组(hamp组)为铁调素基因条件性过表达小鼠,每组8只。OVX组和hamp组切除双侧卵巢,sham组仅切除卵巢旁等量脂肪组织。三组小鼠均他莫昔芬诱导铁调素过表达。8周后检测小鼠血清铁调素、血清铁蛋白、骨形成指标血清骨钙素、骨吸收指标1型胶原羧基末端肽(carboxy terminal telopeptide of collagen type1,CTX)和骨组织相关基因表达。结果血清铁调素:sham组(629.30±109.43)pg/m L,OVX组(669.12±121.48)pg/m L,hamp组(1 094.34±156.43)pg/m L,hamp组高于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05);血清铁蛋白:sham组(411.09±67.74)ng/m L,OVX组(385.39±54.57)ng/m L,hamp组(242.43±39.73)ng/m L,hamp组低于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05);血清骨钙素:sham组(83.42±21.66)ng/m L,OVX组(124.01±28.81)ng/m L,hamp组(113.84±30.29)ng/m L,hamp组与OVX组间差异无统计学意义(P>0.05);血清CTX:sham组(62.45±12.92)ng/m L,OVX组(109.38±18.90)ng/m L,hamp组(75.13±13.32)ng/m L,hamp组较OVX组显著降低(P<0.05)。骨组织实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)结果显示,与OVX组比较,hamp组Run X2基因表达无明显变化,TRAP基因表达显著下降;骨密度:sham组(0.126±0.016)mg/mm3,OVX组(0.052±0.012)mg/mm3,hamp组(0.073±0.012)mg/mm3,hamp组高于OVX组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论铁调素基因过表达后可降低去势小鼠血清铁蛋白,抑制破骨指标,对成骨指标无明显影响。; 关键词铁调素基因条件性过表达去卵巢骨质疏松症; Keywords hepcidin gene conditional overexpression ovariectomy osteoporosis; 分类号 R681 [医药卫生—骨科学] R713.6 [医药卫生—妇产科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名拟南芥热激启动子(HSP18.2)在水稻中的启动效率探讨被引量：1: 4; 作者文春描徐正君蔡平钟向跃武张志雄刘俊王闵霞蒲志刚张志勇; 机构四川农业大学水稻研究所四川省农业科学院生物技术核技术研究所; 出处《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期323-326,共4页; 基金四川省应用基础研究计划资助项目(2006G13-124); 文摘从拟南芥中克隆热激蛋白基因HSP18.2的启动子区域,构建了由HSP18.2启动子引导的GUS融合基因,并经农杆菌介导导入籼稻愈伤组织中。对热激和常温条件下转基因籼稻愈伤组织中GUS活性的比较测定表明,HSP18.2启动子在热激条件下可驱动GUS报告基因在转基因愈伤组织中高效表达,而常温条件下GUS活性在检测水平以下,证明HSP18.2启动子在籼稻中对基因的调控十分灵敏。; 关键词水稻基因条件表达热激处理 Β-葡萄糖醛酸苷酶启动子; Keywords Oryza sativa conditional gene expression heat shock β-glucuronidase promoter; 分类号 S511 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脂肪细胞Npy4r促进高脂饮食诱导肥胖被引量：2: 5; 作者王澜曾帆黄荣凤林树张志辉李旻典; 机构陆军军医大学第一附属医院心血管内科; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期144-155,共12页; 基金国家自然科学基金青年科学基金项目(编号:81900776)资助。; 文摘脂肪组织的神经支配与调节在能量代谢稳态的维持中发挥重要作用。神经肽Y(neuropeptide Y, NPY)及其脂肪细胞受体信号通路促进高脂饮食诱导的肥胖,其中NPY受体1(NPY receptor Y1,NPY1R)与受体2(NPY2R)是主要的NPY外周受体。NPY受体4(NPY4R)也在脂肪组织表达,然而尚不清楚其是否参与肥胖的发生发展机制。本研究建立了NPY及其受体的免疫荧光成像技术和脂肪细胞回复性表达Npy4r小鼠。根据对不同部位脂肪组织的荧光显微术观察,发现NPY在肩胛间棕色脂肪和皮下脂肪的围绕血管区域以点状形式表达,NPY系统的各受体在脂肪组织的空间分布上具有明显的组织特异性:NPY1R在棕色脂肪、主动脉周围脂肪和性腺脂肪较为富集,NPY2R在棕色脂肪和主动脉周围脂肪较为富集,NPY4R在棕色脂肪与性腺脂肪较为富集。继而通过比较脂肪细胞回复性表达Npy4r小鼠与全身Npy4r基因静默小鼠在高脂喂食下的体重与糖代谢,发现脂肪细胞Npy4r促进高脂饮食诱导的肥胖(P <0.0001)。本研究明确了NPY及其受体NPY1R、 NPY2R和NPY4R在不同部位脂肪组织的蛋白水平与分布,进而用脂肪细胞特异性地回复表达小鼠模型揭示脂肪细胞Npy4r具有促进高脂饮食诱导肥胖的作用。; 关键词条件性基因回复表达 loxP-STOP-loxP 脂肪细胞脂肪组织肥胖; Keywords Conditionally reconstituted gene knockout loxP-STOP-loxP adipocyte adipose tissue obesity; 分类号 R589.2 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	重组青霉素G酰化酶在枯草芽孢杆菌中的表达条件优化	黄鹤杨晟李仁宝黄晓冬袁中一	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	10	在线阅读下载PDF 职称材料
2	成骨细胞条件性视黄酸信号失活小鼠模型的构建与验证	孙思远刘媛琪崔怡雯黄紫晗梅李代庆刚江凌勇	《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	铁调素过表达对雌性去势小鼠铁代谢和骨代谢指标的影响	张辉王爱飞吴加东杨帆张晓王亮张鹏徐又佳	《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心	2018	7	在线阅读下载PDF 职称材料
4	拟南芥热激启动子(HSP18.2)在水稻中的启动效率探讨	文春描徐正君蔡平钟向跃武张志雄刘俊王闵霞蒲志刚张志勇	《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	脂肪细胞Npy4r促进高脂饮食诱导肥胖	王澜曾帆黄荣凤林树张志辉李旻典	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料