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伪狂犬病病毒鄂A株TK^-/LacZ^+突变株的构建
被引量：
9
1
作者
方六荣
周复春
+2 位作者
陈焕春
吴斌
何启盖
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期244-248,共5页
本研究以地高辛标记的含TK基因的BamHI/KpnI片段为探针 ,通过Southern杂交确定伪狂犬病病毒鄂A株基因组中一大小约 5 9kb的KpnI片段中含有TK基因 ,回收该片段并克隆于pUC18的KpnI位点。然后进一步克隆其中含TK基因的PstI/KpnI片段 ,并将...
本研究以地高辛标记的含TK基因的BamHI/KpnI片段为探针 ,通过Southern杂交确定伪狂犬病病毒鄂A株基因组中一大小约 5 9kb的KpnI片段中含有TK基因 ,回收该片段并克隆于pUC18的KpnI位点。然后进一步克隆其中含TK基因的PstI/KpnI片段 ,并将LacZ表达盒插入到该片段中的BamHI位点 ,构建转移质粒 pUEKPZ。将该质粒与伪狂犬病病毒鄂A株基因组共转染PK 15细胞 ,待完全病变后在X gal存在下筛选蓝斑 ,蓝斑纯化 3次后 ,经PCR扩增、Southern杂交证实获得的病毒为伪狂犬病病毒鄂A株TK- /LacZ+ 突变株。
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关键词
伪狂犬病病毒
鄂A
株
TK-/LacZ突变
株
基因缺失标志疫苗株
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题名
伪狂犬病病毒鄂A株TK^-/LacZ^+突变株的构建
被引量：
9
1
作者
方六荣
周复春
陈焕春
吴斌
何启盖
机构
华中农业大学畜牧兽医学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期244-248,共5页
基金
"九五"国家科技攻关计划生物技术项目资助!(项目编号 96 -C0 1- 0 4- 0 3)
文摘
本研究以地高辛标记的含TK基因的BamHI/KpnI片段为探针 ,通过Southern杂交确定伪狂犬病病毒鄂A株基因组中一大小约 5 9kb的KpnI片段中含有TK基因 ,回收该片段并克隆于pUC18的KpnI位点。然后进一步克隆其中含TK基因的PstI/KpnI片段 ,并将LacZ表达盒插入到该片段中的BamHI位点 ,构建转移质粒 pUEKPZ。将该质粒与伪狂犬病病毒鄂A株基因组共转染PK 15细胞 ,待完全病变后在X gal存在下筛选蓝斑 ,蓝斑纯化 3次后 ,经PCR扩增、Southern杂交证实获得的病毒为伪狂犬病病毒鄂A株TK- /LacZ+ 突变株。
关键词
伪狂犬病病毒
鄂A
株
TK-/LacZ突变
株
基因缺失标志疫苗株
Keywords
Pseudorabies virus
Ea strain
TK -/LacZ + mutant
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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作者
出处
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被引量
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1
伪狂犬病病毒鄂A株TK^-/LacZ^+突变株的构建
方六荣
周复春
陈焕春
吴斌
何启盖
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
9
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