期刊文献+
共找到27篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
小麦及其近缘种中基因组特异性DNA重复序列的研究进展 被引量:7
1
作者 白建荣 贾旭 王道文 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期595-600,共6页
本文对小麦族植物中基因组特异性DNA重复序列的分类、基本特征、分离和鉴定方法、在小麦遗传改良中的应用以及未来研究的发展趋势进行了简述。综合已有的研究结果可以看出基因组特异性DNA重复序列是小麦族植物基因组特异性形成的重要构... 本文对小麦族植物中基因组特异性DNA重复序列的分类、基本特征、分离和鉴定方法、在小麦遗传改良中的应用以及未来研究的发展趋势进行了简述。综合已有的研究结果可以看出基因组特异性DNA重复序列是小麦族植物基因组特异性形成的重要构成部分。对基因组特异性DNA重复序列的研究是认识小麦族植物基因组的有效途径之一,基因组特异性DNA重复序列的应用将进一步促进小麦族植物分子细胞遗传学和普通小麦遗传改良研究的进展。 展开更多
关键词 小麦 近缘种 基因组异性dna重复序列 研究进展 染色体
在线阅读 下载PDF
簇毛麦基因组特异DNA序列标记的建立和应用 被引量:3
2
作者 迟世华 杨足君 +3 位作者 冯娟 周建平 刘成 任正隆 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期1-5,共5页
为建立簇毛麦基因组特异DNA序列的分子标记,以普通小麦中国春、绵阳11、川农17和R111以及多年生簇毛麦、硬粒小麦-多年生簇毛麦双二倍体TDB-3为材料,用120条随机引物进行RAPD分析,筛选出一个多年生簇毛麦的特异性RAPD片段,克隆测序表明... 为建立簇毛麦基因组特异DNA序列的分子标记,以普通小麦中国春、绵阳11、川农17和R111以及多年生簇毛麦、硬粒小麦-多年生簇毛麦双二倍体TDB-3为材料,用120条随机引物进行RAPD分析,筛选出一个多年生簇毛麦的特异性RAPD片段,克隆测序表明该片段全长为937 bp(记为OPM2937)。以OPM2937的DNA序列为基础设计了一对特异引物,并用该特异引物对多年生簇毛麦、二倍体簇毛麦以及中国春-二倍体簇毛麦附加系CSDA1V^CSDA7V与小麦-多年生簇毛麦衍生后代进行了扩增,结果表明,凡具有簇毛麦染色体的材料均可扩增出目标DNA片段,而不具簇毛麦染色体的材料均未能得到扩增。将OPM2937在NCBI中进行序列比对,发现它是一个新的序列,说明OPM2937为簇毛麦基因组的一个特异序列,该DNA序列标记可用于快速跟踪检测小麦背景中的簇毛麦染色体。 展开更多
关键词 簇毛麦属 RAPD 基因组特异性dna片段
在线阅读 下载PDF
基因组特异性引物扩增细菌转录产物标记后用于DNA芯片分析
3
作者 张亚菲 王秀荣 《预防兽医学进展》 2001年第3期9-11,共3页
DNA芯片能够在一个载体上同时分析至少两种实验条件下,上千个基因的表达.但是,DNA芯片分析时要求有足够的RNA来产生探针,尤其是在进行细菌RNA杂交时(50μg细菌总RNA约含2μg mRNA).我们研制出一种以计算机为基础推测最小引物数量的方法... DNA芯片能够在一个载体上同时分析至少两种实验条件下,上千个基因的表达.但是,DNA芯片分析时要求有足够的RNA来产生探针,尤其是在进行细菌RNA杂交时(50μg细菌总RNA约含2μg mRNA).我们研制出一种以计算机为基础推测最小引物数量的方法,这些引物与假定基因组的全部基因都能特异性配对.例如,通过这个推测方法获得37个寡核苷酸片段,能够扩增出结核分枝杆菌基因组的全部基因.我们检测了基因组特异性引物(Genome directed primers,GDPs)的有效性,并在DNA芯片上检测基因表达时与随机引物进行了比较性研究.我们用这两种引物制备荧光标记探针,并在芯片上与960个位点的细菌基因杂交.与随机引物比较,GDPs更敏感、特异,尤其是在从哺乳动物RNA样品中检测结核杆菌RNA的时候. 展开更多
关键词 dna芯片分析 基因组异性引物 细菌转录产物 细菌RNA 标记 病原菌 诊断
在线阅读 下载PDF
东方田鼠特异DNA片段的克隆及核苷酸序列分析 被引量:14
4
作者 杨榕 胡维新 +1 位作者 朱敏 彭兴华 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第2期67-72,共6页
目的 获得东方田鼠的特异DNA序列。方法 Aβ基因使用PCR ,基因克隆 ,斑点杂交 ,DNA序列分析 ,生物信息学技术。结果 根据小鼠MHCⅡ外显子 2及其两侧序列 ,合成引物并扩增东方田鼠基因组DNA ,将PCR产物回收、测序后 ,分别设计内引物... 目的 获得东方田鼠的特异DNA序列。方法 Aβ基因使用PCR ,基因克隆 ,斑点杂交 ,DNA序列分析 ,生物信息学技术。结果 根据小鼠MHCⅡ外显子 2及其两侧序列 ,合成引物并扩增东方田鼠基因组DNA ,将PCR产物回收、测序后 ,分别设计内引物扩增东方田鼠基因组DNA ,其中一对引物可得到特异性扩增带 ,将得到的DNA片段插入PGEM Teasy载体 ,进行序列分析。用这对引物扩增人、昆明小鼠、BALB c小鼠及C57BL 6J小鼠基因组DNA ,均无扩增产物。以东方田鼠特异性扩增产物为探针进行斑点杂交 ,除东方田鼠基因组DNA外 ,其他几种动物基因组DNA均为阴性结果。进一步对该DNA片段进行了BLAST同源性搜索和外显子预测 ,在Genbank中没有发现高度同源序列 ,并且找到一个可能的外显子 ,该外显子由 69个氨基酸组成。结论 获得的DNA片段为东方田鼠的特异片段 ,这将为从分子水平深入研究东方田鼠的遗传背景、生物进化规律以及东方田鼠抗日本血吸虫的机理奠定基础。 展开更多
关键词 东方田鼠 扩增 外显子 dna片段 斑点杂交 引物 异性 基因组dna 动物基因组 生物进化
在线阅读 下载PDF
暗纹东方鲀基因组DNA提取及生长激素基因Exon4扩增 被引量:2
5
作者 黄军 陈国宏 +2 位作者 许盛海 朱金金 严美姣 《水利渔业》 北大核心 2007年第3期21-23,共3页
以暗纹东方鲀的肌肉、尾鳍为样品,对基因组DNA的提取进行了初步研究,从尾鳍中提取的DNA质量较好。新鲜组织、无水乙醇处理的尾鳍样品得到的DNA完全满足后续实验的开展;而从10%福尔马林溶液处理的尾鳍样品中提取的DNA得率太低,10μg/mL... 以暗纹东方鲀的肌肉、尾鳍为样品,对基因组DNA的提取进行了初步研究,从尾鳍中提取的DNA质量较好。新鲜组织、无水乙醇处理的尾鳍样品得到的DNA完全满足后续实验的开展;而从10%福尔马林溶液处理的尾鳍样品中提取的DNA得率太低,10μg/mL以下。运用巢式PCR成功扩增了暗纹东方鲀生长激素基因外显子4,为下一步的SNPs检测以及克隆测序创造了必要条件。 展开更多
关键词 暗纹东方鲀 基因组dna 异性扩增 巢式PCR
在线阅读 下载PDF
DNA指纹的个体特异性和细胞稳定性研究 被引量:1
6
作者 蓝翎 张小为 +1 位作者 段秉章 霍振义 《法医学杂志》 CAS CSCD 1990年第2期8-11,共4页
人类基因组的许多高度可变区域能够与小卫星探针杂交,而同时被检测出来,小卫星探针由串联重复的“核心”顺序构成。采用Southern印迹杂交获得的DNA指纹图包含多条高度可变的DNA片段杂交带,这些带在体细胞和生殖细胞中都表现出稳定性... 人类基因组的许多高度可变区域能够与小卫星探针杂交,而同时被检测出来,小卫星探针由串联重复的“核心”顺序构成。采用Southern印迹杂交获得的DNA指纹图包含多条高度可变的DNA片段杂交带,这些带在体细胞和生殖细胞中都表现出稳定性,而且安全具有个体特异性。本文用小卫星探针33.15,调查了北京地区的60名无关个体。 展开更多
关键词 异性 稳定性研究 个体 Southern印迹杂交 小卫星探针 dna指纹图 人类基因组 dna片段 探针杂交 生殖细胞 北京地区 可变区 体细胞 高度
在线阅读 下载PDF
基因组所联合揭示灵长类胚胎发育中DNA再甲基化过程
7
《中国畜牧业》 2017年第7期18-19,共2页
2月24H,从中国农业科学院深圳农业基因组研究所获悉,该所科研团队与昆明理工大学、同济大学开展联合研究,揭示了灵长类动物早期着床前胚胎发育中的DNA再甲基化过程,并表明DNA甲基化酶和去甲基化酶的时空特异性表达是造成这一现象的... 2月24H,从中国农业科学院深圳农业基因组研究所获悉,该所科研团队与昆明理工大学、同济大学开展联合研究,揭示了灵长类动物早期着床前胚胎发育中的DNA再甲基化过程,并表明DNA甲基化酶和去甲基化酶的时空特异性表达是造成这一现象的潜在机制,为重新认识灵长类早期胚胎发育的DNA甲基化重编程事件提供了新的思路。 展开更多
关键词 dna甲基化酶 早期胚胎发育 灵长类动物 基因组 中国农业科学院 昆明理工大学 异性表达 科研团队
在线阅读 下载PDF
靶标替换消减SELEX技术筛选小鼠IgG Fc片段的DNA配基及其活性鉴定 被引量:4
8
作者 陈桦 葛廷 +8 位作者 王小琦 廖世奇 马瑾 王黎 庞鑫 张宁 张丽琼 张洁瑜 王晓清 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期66-72,共7页
建立高特异性和亲和力的小鼠IgGFc片段DNA配基筛选方法.采用几种小鼠IgG亚类(鼠抗HBV-IgG、小鼠IgG的Fc,IgG1,IgG2a)作为靶分子,利用靶标替换消减SELEX筛选方法进行16轮筛选.利用dot-blot,高压液相色谱以及凝胶阻滞(EMSA)方法对所得配... 建立高特异性和亲和力的小鼠IgGFc片段DNA配基筛选方法.采用几种小鼠IgG亚类(鼠抗HBV-IgG、小鼠IgG的Fc,IgG1,IgG2a)作为靶分子,利用靶标替换消减SELEX筛选方法进行16轮筛选.利用dot-blot,高压液相色谱以及凝胶阻滞(EMSA)方法对所得配基进行活性鉴定.经过16轮筛选,得到了与小鼠IgG不同亚类相同Fc片段特异性结合的寡核苷酸配基(IgG的Fc配基).特异性分析显示,此配基只与小鼠IgG特异性结合,与胰蛋白酶、小牛血清白蛋白、人血清均无明显结合.高压液相色谱和凝胶阻滞结果均说明了配基和靶蛋白具有特异结合.通过使用靶标替换消减SELEX技术可以有效得到小鼠IgG不同亚型相同部分Fc片段的特异性结合配基,为不同分子相同部位的分子作用机制,以及应用于小鼠抗体亲和层析的研究奠定基础. 展开更多
关键词 靶标替换 SELEX dna配基 小鼠IgG Fc片段 异性
在线阅读 下载PDF
猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建及免疫原基因的筛选与克隆 被引量:6
9
作者 景志忠 郭爱疆 +2 位作者 海岗 宗瑞谦 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期391-396,共6页
研究避开庞大的猪带绦虫基因组DNA,以构建六钩蚴发育阶段的cDNA表达文库为策略,利用pSPORT1质粒表达载体首次成功构建了表达文库。经库容量、重组率和代表性测定,库容量达5.0×106,重组率100%,用特异性引物能扩增出六钩蚴发育阶段1... 研究避开庞大的猪带绦虫基因组DNA,以构建六钩蚴发育阶段的cDNA表达文库为策略,利用pSPORT1质粒表达载体首次成功构建了表达文库。经库容量、重组率和代表性测定,库容量达5.0×106,重组率100%,用特异性引物能扩增出六钩蚴发育阶段10ku基因、18ku基因和45W基因家族的A型、B型、C型转录本,说明文库质量高,代表性强。应用快速筛选质粒表达文库和克隆免疫原基因的技术,成功地筛选和克隆到TsO1基因,其完整阅读框架(ORF)为393bp。将其登录到GenBank(AY327451),经BLAST分析,证实是猪带绦虫六钩蚴发育阶段的1个新免疫原基因。 展开更多
关键词 猪带绦虫 六钩蚴 免疫原 cdna文库 克隆 构建 Cdna表达文库 基因组dna 发育阶段 质粒表达载体 异性引物 BLAST 基因家族 快速筛选 库容量 代表性 重组率 转录本
在线阅读 下载PDF
马铃薯品种和组织对基因组测序深度分布模式的影响 被引量:2
10
作者 张国栋 刘柏林 +2 位作者 李修宝 司怀军 李修庆 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期43-48,共6页
【目的】探讨品种和组织对马铃薯基因组测序深度分布的影响.【方法】对‘布尔班克’和‘云薯107’2个品种的薯块芽端和茎端进行了深测序,建立了在参照基因组上的测序深度分布图.【结果】发现这些分布在品种间有明显差别(例如在三号染色... 【目的】探讨品种和组织对马铃薯基因组测序深度分布的影响.【方法】对‘布尔班克’和‘云薯107’2个品种的薯块芽端和茎端进行了深测序,建立了在参照基因组上的测序深度分布图.【结果】发现这些分布在品种间有明显差别(例如在三号染色体中部和尾部),在同一品种的DNA样本间很类似,但芽端和茎端在二号染色体有明显差别.这些结果说明测序深度的分布主要受品种基因组本身所影响,也受薯块上部位影响,而且在很大程度上可以重复.【结论】这些结果能帮助设计试验和合适利用测序深度. 展开更多
关键词 马铃薯 dna测序 小序列片段 参考基因组 覆盖程度 品种差别 组织异性
在线阅读 下载PDF
基于竞争性杂交方法的猪-肠道微生物特异性互作靶点发掘 被引量:1
11
作者 樊丽华 莫虹斐 +2 位作者 张晓峰 帅江冰 陈青 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期163-172,共10页
动物肠道中存在着一些参与猪肠道微生物互作的基因,这些基因具有一定的宿主特异性,利用其设计分子标记能准确识别粪便污染来源。该文共采集6个物种(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅)的145个粪便样品,提取其DNA后利用竞争性杂交的基因片段富集方... 动物肠道中存在着一些参与猪肠道微生物互作的基因,这些基因具有一定的宿主特异性,利用其设计分子标记能准确识别粪便污染来源。该文共采集6个物种(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅)的145个粪便样品,提取其DNA后利用竞争性杂交的基因片段富集方法(genome fragment enrichment,GFE),靶向筛选参与猪肠道微生物互作的特异性基因。经BLASTX分析发现,82%的猪特异性非冗余DNA片段存在相似序列,以拟杆菌纲(Bacteroidetes)(43.2%)、梭菌纲(Clostridia)(19.5%)、芽孢杆菌纲(Bacilli)(8.6%)相似序列为主。从蛋白质功能方面分析,61.5%的非冗余序列功能明确,有7.6%的序列与信息贮存及加工有关,12.8%的序列与细胞加工及信息传导有关,22%的序列与代谢有关,其中,碳水化合物和氨基酸的转移代谢相关序列含量最为丰富,均占总特异性序列的6.3%。研究发现,能够编码拟杆菌纲(Bacteroidetes)和梭菌纲(Clostridials)等表面蛋白、膜分泌蛋白及碳水化合物代谢蛋白的相关基因可作为猪特异性分子标记筛选的靶点。 展开更多
关键词 非点源污染 竞争性杂交 异性基因组片段富集 功能注释 异性分子标记
在线阅读 下载PDF
两个地区东方田鼠基因组RAPD分析比较研究 被引量:7
12
作者 王胜昌 谢建云 +1 位作者 邵伟娟 高诚 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第1期26-32,共7页
目的 从DNA的水平分析比较两个地区东方田鼠的分子遗传特征 ,探讨以RAPD标记鉴别两个地区的东方田鼠。方法 筛选 6条 1 0bp的随机引物对洞庭湖和青铜峡地区的东方田鼠基因组进行了随机扩增多态DNA (RAPD)分析 ,并对这两个地区的东方... 目的 从DNA的水平分析比较两个地区东方田鼠的分子遗传特征 ,探讨以RAPD标记鉴别两个地区的东方田鼠。方法 筛选 6条 1 0bp的随机引物对洞庭湖和青铜峡地区的东方田鼠基因组进行了随机扩增多态DNA (RAPD)分析 ,并对这两个地区的东方田鼠的基因组DNA进行了比较。结果 ①两个地区东方田鼠的所有受试个体中共有的片段数为 2 0条 ,这是两个地区东方田鼠的共性所在 ;②两个地区东方田鼠各有其特异性扩增片段 ;③引物S1 7和S80可作为鉴别两个地区东方田鼠的特异性引物 ;④不同地区的东方田鼠其不同个体之间的共享度较低 ,且存在较大差异 ;两个地区东方田鼠的遗传背景均呈非均一性。 展开更多
关键词 东方田鼠 鉴别 地区 基因多态性 基因组 异性引物 dna RAPD分析 扩增片段 RAPD标记
在线阅读 下载PDF
新方法突破复杂基因组装配瓶颈
13
作者 朱云芬 《中国家禽》 北大核心 2013年第23期1-1,共1页
尽管DNA测序技术取得了巨大进步,但复杂基因组的装配仍然面临巨大挑战,特别是在使用短片段测序的情况下,会产大量的短DNA片段。美国麻省大学医学院(UMMS)的研究人员利用DNA相互作用的频率数据,开发了更快更准确的基因组装配方法,并成功... 尽管DNA测序技术取得了巨大进步,但复杂基因组的装配仍然面临巨大挑战,特别是在使用短片段测序的情况下,会产大量的短DNA片段。美国麻省大学医学院(UMMS)的研究人员利用DNA相互作用的频率数据,开发了更快更准确的基因组装配方法,并成功将其应用于复杂基因组。研究者利用这一技术给人类基因组的未完成区域补上了65个DNA片段。相关研究成果2013年11月发表于《Nature Biotechnology》。 展开更多
关键词 基因组序列 装配过程 dna序列 染色体测序 相互作用 物种异性 dna片段 测序技术
在线阅读 下载PDF
CRISPR/Cas9的发展及在基因组编辑中的应用
14
作者 姜晓洁 姜晓 《山东畜牧兽医》 2019年第10期77-80,共4页
CRISPR/Cas9系统为研究基因的功能和疾病的发生提供了一种简单有效的基因操作工具。CRISPR/Cas9由一个非特异性的Cas9核酸酶和一组可编辑的序列特异性CRISPR-RNA(crRNA)组成,而crRNA能够指导Cas9蛋白在靶位点使DNA产生双键断裂从而线性... CRISPR/Cas9系统为研究基因的功能和疾病的发生提供了一种简单有效的基因操作工具。CRISPR/Cas9由一个非特异性的Cas9核酸酶和一组可编辑的序列特异性CRISPR-RNA(crRNA)组成,而crRNA能够指导Cas9蛋白在靶位点使DNA产生双键断裂从而线性化DNA。随后胞内的DNA修复过程导致了靶向位点DNA的插入,删除和替代。CRISPR/Cas9介导的DNA线性化的特异性受到crRNA序列配对和靶向位点上游PAM区的影响。本文将介绍CRISPR/Cas9在基因组编辑中的机制及未来在基因编辑和临床治疗中的应用。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 基因组编辑 应用 RRNA序列 序列异性 dna 操作工具 异性
在线阅读 下载PDF
深海沉积物中产淀粉酶细菌的rep-PCR基因指纹分析 被引量:5
15
作者 戴世鲲 郑天凌 +1 位作者 郑伟 王晓颖 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B06期171-174,共4页
利用淀粉酶筛选培养基平板从27个深海沉积物样品中筛选得到30个具有胞外淀粉酶活性的菌株.其中革兰氏阴性细菌有22株,阳性细菌有8株.对这些细菌的基因组DNA进行ERICPCR和BOXPCR扩增,指纹图谱显示大部分菌株均存在数目不等的各自独特的带... 利用淀粉酶筛选培养基平板从27个深海沉积物样品中筛选得到30个具有胞外淀粉酶活性的菌株.其中革兰氏阴性细菌有22株,阳性细菌有8株.对这些细菌的基因组DNA进行ERICPCR和BOXPCR扩增,指纹图谱显示大部分菌株均存在数目不等的各自独特的带型,各特异性扩增的主带型能重复稳定出现.比较两种引物的指纹图谱,显示ERICPCR比BOXPCR具有较丰富的图谱多态性.对产生的指纹图谱进行聚类学分析,30株细菌可分为10组,其中5株细菌分别独立成组,最多的第Ⅱ组包含有8株细菌,而在同一聚类组内的细菌可能是处于进化上亲缘关系较近的位置.研究显示,30株菌具有丰富的种属多样性,揭示了深海微生物资源的丰富和潜力.ERICPCR和BOXPCR技术可用于对深海微生物群落组成和多样性的研究. 展开更多
关键词 深海沉积物 指纹分析 R基因 rep 革兰氏阴性细菌 指纹图谱 ERIC 基因组dna 异性扩增 PCR扩增 淀粉酶活性 筛选培养基 深海微生物 PCR技术 微生物资源 BOX 亲缘关系 群落组成 多样性 显示 聚类组 多态性 丰富 带型 菌株
在线阅读 下载PDF
Contracaecum rudolphii姊妹种特异PCR鉴定方法的建立
16
作者 何芳 翁亚彪 +4 位作者 曹湛 林瑞庆 陈红玲 宋慧群 朱兴全 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期918-922,共5页
参考已测得的C.rudolphii姊妹种(C.rudolphiiA和C.rudolphiiB)及C.septentrionale的核糖体DNA(rDNA)内转录间隔1、2(ITS-1及ITS-2)核苷酸序列,设计、合成了针对C.rudolphiiA、C.rudolphiiB及C.septentrionale的特异性引物HFA(F)、HFA(R)... 参考已测得的C.rudolphii姊妹种(C.rudolphiiA和C.rudolphiiB)及C.septentrionale的核糖体DNA(rDNA)内转录间隔1、2(ITS-1及ITS-2)核苷酸序列,设计、合成了针对C.rudolphiiA、C.rudolphiiB及C.septentrionale的特异性引物HFA(F)、HFA(R)、HFB(F)、HFS(F),通过PCR条件优化和扩增后,它们均能特异地扩增出目的DNA片段,分别是323、321、108 bp,而其它对照样品均未扩增出特异性片段,敏感性试验可检测到最低浓度分别为1.6、21.80、.27 ng/μL。从而初步建立了鉴定C.rudolphii姊妹种的特异PCR方法。该方法特异性强、敏感度较高、重复性好,不仅可用于C.rudolphii姊妹种的分类鉴定,也可用于它们所导致的寄生虫病的诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 Contracaecum rudolphii 异PCR 异性 敏感性 PCR方法 鉴定方法 姊妹种 异性引物 dna片段
在线阅读 下载PDF
BRCA1基因全长mRNA序列分析技术
17
作者 徐红先 周冬仙 +1 位作者 熊文 邵超鹏 《实用医学杂志》 CAS 2005年第12期1340-1341,共2页
目的:建立BRCA1基因全长mRNA序列测定方法。方法:根据文献和GenBank(U14680)报道的BRCA1基本序列设计6对特异性引物,建立6个特异性逆转录PCR(RT-PCR)技术,分段且扩增BRCA1全长mRNA,然后采用毛细管电泳进行cDNA测序,方法建立后用于3名健... 目的:建立BRCA1基因全长mRNA序列测定方法。方法:根据文献和GenBank(U14680)报道的BRCA1基本序列设计6对特异性引物,建立6个特异性逆转录PCR(RT-PCR)技术,分段且扩增BRCA1全长mRNA,然后采用毛细管电泳进行cDNA测序,方法建立后用于3名健康女性样本。结果:6个特异性RT-PCR反应扩增片段相互覆盖,使序列分析结果包括全长BRCA1mRNA,共5000多bp。3名经PCR技术检测确定携带正常BRCA1基因的样本的mRNA分析结果显示,其BRCA1mRNA序列均与过往报道的正常mRNA序列完全一致。结论:所建立的RT-PCR特异性结合BRCA1基因,能用于其mRNA全长序列分析。 展开更多
关键词 BRCA1基因 RNA序列 全长 分析技术 PCR技术检测 MRNA RT-PCR 分析结果 异性引物 dna测序 毛细管电泳 PCR反应 异性结合 测定方法 序列设计 PCR) 健康女性 方法建立 扩增片段 序列分析 逆转录 样本
在线阅读 下载PDF
cDNA文库的构建及在畜牧业中的应用
18
作者 左兆云 罗海玲 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第S1期9-11,共3页
cDNA文库是研究基因组学的基本工具之一,自从70年代中期获得第一个互补DNA克隆以来,己经用不同方法提高了cDNA的合成效率,并且对克隆载体也进行了多方改进。目前,将poly(A)+RNA反转录为cDNA,并插入载体构建cDNA文库已经成为真核分子生... cDNA文库是研究基因组学的基本工具之一,自从70年代中期获得第一个互补DNA克隆以来,己经用不同方法提高了cDNA的合成效率,并且对克隆载体也进行了多方改进。目前,将poly(A)+RNA反转录为cDNA,并插入载体构建cDNA文库已经成为真核分子生物学的基本手段。由于cDNA文库比基因组DNA文库小得多,能够较容易地从中筛选克隆得到细胞特异性表达的基因。 展开更多
关键词 细胞异性 畜牧业生产 基因组 插入载体 克隆载体 dna 基因表达谱 功能鉴定 RNA SMAR
在线阅读 下载PDF
云南黑山羊性别决定基因体外扩增研究
19
作者 兰蓉 杨红远 洪琼花 《云南畜牧兽医》 2004年第4期1-2,共2页
对云南黑山羊 (10♂ ,2♀ )的基因组DNA性别决定基因 (SRY)进行了体外PCR扩增的研究 ,结果表明适当引物可特异性扩增出雄性个体的性别决定基因片段 (大小约为 185bp) ,而对雌性个体则不能扩增出任何片段 ;研究还利用已筛选出的性别决定... 对云南黑山羊 (10♂ ,2♀ )的基因组DNA性别决定基因 (SRY)进行了体外PCR扩增的研究 ,结果表明适当引物可特异性扩增出雄性个体的性别决定基因片段 (大小约为 185bp) ,而对雌性个体则不能扩增出任何片段 ;研究还利用已筛选出的性别决定基因特异性引物对少量的胚胎细胞进行了特异性扩增 ,检测了 2 0枚云南黑山羊的胚胎 ,其中有 5枚胚胎可扩增出约为 185bp的特异性片段。以上结果为山羊胚胎早期性别鉴定奠定了技术基础。 展开更多
关键词 黑山羊 性别决定基因 胚胎 异性引物 性别鉴定 异性片段 基因组dna 体外扩增 早期 研究
在线阅读 下载PDF
具有5+12优质亚基节节麦的低分子量谷蛋白基因序列分析 被引量:7
20
作者 黄卓 龙海 +2 位作者 颜泽洪 魏育明 郑有良 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期67-72,共6页
根据低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)基因编码区保守序列设计引物,对具优质高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)5+12的节节麦材料AS63进行扩增,得到长度约为900bp和1000bp的DNA片段,克隆测序后获得3个LMW-GS基因序列LMWD-1(GenBank登录号AY841013)、... 根据低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)基因编码区保守序列设计引物,对具优质高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)5+12的节节麦材料AS63进行扩增,得到长度约为900bp和1000bp的DNA片段,克隆测序后获得3个LMW-GS基因序列LMWD-1(GenBank登录号AY841013)、LMWD-2(GenBank登录号AY841014)和LMWD-3(GenBank登录号AY841015).它们具有小麦低分子量谷蛋白基因的典型结构特征.其中,LMWD-1和LMWD-2具有完整编码区,长度分别为1065 bp和972 bp,可分别编码333和302个氨基酸残基的成熟蛋白,且第一个半胱氨酸残基均出现在重复区第13位.在重复区,LMWD-1的两个疏水单元为PIIIL和PVIIL,而LMWD-2的两个疏水单元为PIIIL和SVIIL.LMWD-1的重复区中还存在一个连续13个Q组成的短肽.LMWD-3由于编码区内存在提前终止密码子,为不表达的假基因.氨基酸序列比较发现,LMW-GS基因的N-末端区序列具有位点特异性,且LMWD-1和LMWD-2与普通小麦Glu-D3位点的LMW-GS基因有很高的一致性. 展开更多
关键词 低分子量 基因序列分析 节节麦 优质亚基 LMW-GS基因 高分子量谷蛋白亚基 基因编码区 dna片段 氨基酸残基 终止密码子 位点异性 序列设计 克隆测序 结构 蛋白基因 成熟蛋白 半胱氨酸 序列比较 普通小麦 登录 基因
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部