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运用差异展示分离特异性表达的基因 被引量:3
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作者 孙涛 刘雪丰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第4期316-318,共3页
在高等生物中含有约100000个不同的基因,其中仅有15%的基因在任何个体细胞中均表达.因此分离特异的目的基因便显得十分重要差异展示是通过部分扩增mRNA的逆转录产物、经测序胶电泳,分离到差异性表达的基因它与消减杂交... 在高等生物中含有约100000个不同的基因,其中仅有15%的基因在任何个体细胞中均表达.因此分离特异的目的基因便显得十分重要差异展示是通过部分扩增mRNA的逆转录产物、经测序胶电泳,分离到差异性表达的基因它与消减杂交相比是分离特异表达基因的更有效的手段.虽然这种方法在实际运用中存在着这样或那样的困难,但随着对这种技术的不断改进,它将会有越来越广泛的用途. 展开更多
关键词 差异展示 基因分离 异性表达基因
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特异性表达基因克隆的策略 被引量:1
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作者 杨传平 魏志刚 杨文慧 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期1-4,共4页
将特性表达基因克隆技术按产生的时代与所利用的技术 ,划分成三个阶段 ,并对每个阶段有代表性的技术、原理和优缺点进行了介绍 。
关键词 异性表达基因 基因克隆 生物信息学
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杉木木材形成过程特异表达基因的鉴定与分析 被引量:8
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作者 王桂凤 高燕 +1 位作者 杨立伟 施季森 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期483-489,共7页
为了获得杉木木质化过程中特异表达的基因,本研究利用抑制差减杂交技术,以杉木突变体独干杉无性系为测试方(Tester),正常的句容0号无性系为驱动方(Driver),构建了正向差减文库,获得了618个克隆。利用通用引物T7和SP6进行PCR及EcoRⅠ酶... 为了获得杉木木质化过程中特异表达的基因,本研究利用抑制差减杂交技术,以杉木突变体独干杉无性系为测试方(Tester),正常的句容0号无性系为驱动方(Driver),构建了正向差减文库,获得了618个克隆。利用通用引物T7和SP6进行PCR及EcoRⅠ酶切鉴定文库重组子,同时,利用点杂交技术,以正向差减、反向差减及未差减的测试方和驱动方四种探针,进行了进一步的筛选阳性克隆。用定量PCR对结果进行了初步验证。260个单一ESTs中60%的与已知蛋白具有显著同源性,可分为4个主要类别:新陈代谢、细胞壁生成和结构重构、信号传导和胁迫。系统分析参与杉木木材形成的基因对了解木质部分化的分子机制具有重要意义,是了解木材形成遗传控制的直接信息来源,也是改良材形和纤维性质的潜在候选基因。 展开更多
关键词 杉木 木材形成 抑制差减杂交 异性表达基因 木质部分化
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鼻咽癌组织基因表达谱的研究 被引量:3
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作者 许亮国 谢鹭 +3 位作者 王磊 何志巍 杨玉文 姚开泰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期1055-1055,共1页
关键词 鼻咽癌 基因表达 基因特异性表达
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eQTL结合ASE分析显示帕金森病相关基因Lrrk2表达受顺式作用调控
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作者 黄嘉睿 殷冬梅 沈勤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1161-1166,共6页
富亮氨酸重复激酶2(Lrrk2)基因与家族性及散发性帕金森病(Parkinson's disease,PD)密切相关,但其作用机制仍不十分清楚.本文以单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)为切入点,对其调控机制进行研究.以近交系C57BL/6J(... 富亮氨酸重复激酶2(Lrrk2)基因与家族性及散发性帕金森病(Parkinson's disease,PD)密切相关,但其作用机制仍不十分清楚.本文以单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)为切入点,对其调控机制进行研究.以近交系C57BL/6J(B6)和DBA/2J(D2)小鼠杂交1代小鼠为实验动物,借助基因表达数量性状基因座(expression quantitative trait loci,eQTL)分析技术,结合等位基因特异性表达(allele specific expression difference,ASE)技术,验证帕金森病相关基因Lrrk2的顺式调控机制.eQTL分析显示,Lrrk2基因所在的位置有1个具有显著统计学意义(LRS值≥20)的顺式调节基因座.针对Lrrk2基因外显子区域错意突变SNP的ASE分析得出:rs50098646位点在cDNA水平上G∶A两碱基比值偏离1∶1,与gDNA水平中G∶A两碱基比值差异显著(P<0.01),表达受顺式作用调节.本研究结果表明,Lrrk2基因的表达受到顺式作用的调控. 展开更多
关键词 帕金森病 富亮氨酸重复激酶2(Lrrk2)基因 单核苷酸多态性 基因表达数量性状定位 等位基因特异性表达
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转人乳铁蛋白基因山羊乳腺上皮细胞的研究 被引量:7
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作者 郑月茂 刘凤军 +1 位作者 何小宁 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1282-1286,共5页
利用脂质体包裹含人乳铁蛋白基因的重组质粒,并导入到山羊乳腺上皮细胞,经G418及PCR筛选获得阳性细胞;转染细胞增殖后经激素诱导,培养液上清通过Western blot检测证明,转染细胞表达并分泌出人乳铁蛋白,其分子质量为58 ku。
关键词 人乳铁蛋白基因乳腺异性表达载体 绿色荧光蛋白 基因山羊乳腺上皮细胞
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MEST/PEG1对绒毛外滋养层细胞侵袭和迁移能力的影响及其在子痫前期中的意义 被引量:8
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作者 彭威 陈莹 +2 位作者 单楠 丁裕斌 漆洪波 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期653-657,共5页
目的:通过研究人中胚层特异性转录基因(mesoderm-specific transcript,MEST)对人绒毛滋养细胞迁移和侵袭等生物学功能的影响,探讨其在子痫前期(preeclampsia,PE)中发病的机制。方法:用免疫组化法和Western blot法检测正常和PE患者胎盘中... 目的:通过研究人中胚层特异性转录基因(mesoderm-specific transcript,MEST)对人绒毛滋养细胞迁移和侵袭等生物学功能的影响,探讨其在子痫前期(preeclampsia,PE)中发病的机制。方法:用免疫组化法和Western blot法检测正常和PE患者胎盘中MEST及DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)的表达。并检测2组胎盘中MEST甲基化水平。用Western blot法检测缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)和MEST si RNA处理人滋养细胞株HTR8/Svneo后缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 1α,HIF1α)及MEST表达水平;并检测si RNA转染后对各组细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:MEST在正常胎盘中的表达(4.524±0.586)明显高于PE胎盘(2.640±0.334)且在PE胎盘中处于高甲基化状态。H/R后HIF1α表达明显升高(3.692±0.441,7.091±0.698),而MEST表达明显降低(4.856±0.169,2.205±0.318),特异性敲低MEST后HTR-8细胞侵袭和迁移能力均明显下降(1.057±0.061,0.551±0.029)(1.113±0.087,0.477±0.034),差异均有统计学意义(P<0.05);而增殖能力无明显影响(0.170±0.010,0.158±0.010)(P>0.05)。结论:推测MEST DNA甲基化异常可能影响滋养细胞的迁移和侵袭,从而参与子痫前期的发病。 展开更多
关键词 中胚层异性转录基因/父源表达基因 DNA甲基化 滋养细胞侵袭 子痫前期
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凡纳滨对虾大量EST的生物信息学分析 被引量:1
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作者 孙政 柳承璋 +3 位作者 李富花 张晓军 张俊彬 相建海 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期128-136,共9页
凡纳滨对虾是我国乃至世界最重要的对虾养殖种。EST(expressed sequence tags)测序是对没有基因组背景的生物进行功能基因分析最为有效的方法之一。为了研究凡纳滨对虾重要功能基因、以及为筛选分子标记奠定基础,本文集成了一套快速高效... 凡纳滨对虾是我国乃至世界最重要的对虾养殖种。EST(expressed sequence tags)测序是对没有基因组背景的生物进行功能基因分析最为有效的方法之一。为了研究凡纳滨对虾重要功能基因、以及为筛选分子标记奠定基础,本文集成了一套快速高效的EST信息深度挖掘的方法,并对公共数据库中161 241条凡纳滨对虾EST序列进行分析,获得了20 410条unigenes,包括14 236条contigs和6 174条singlets。通过与NR数据库比对发现有注释的基因7 984条,并对其余12 426条未知基因中的4 702条进行了功能域注释。对有NR注释的基因的GO分类分析获得其中2 715条基因的生物学过程、细胞定位和分子功能分类信息。此外,通过与模式生物通路图进行比对和定位,将3738条基因定位到270个KEGG通路图中,发现凡纳滨对虾的9条unigenes与果蝇丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的5个关键基因对应,提示凡纳滨对虾很可能存在类似的重要信号转导通路。另外,通过对6种组织,包括肝胰腺、淋巴器官、血细胞、鳃、眼柄和神经的EST进行比较分析,筛选获得了组织特异性转录本共7 000余条,并对这些特异性转录本进行了功能分类。本研究不仅开发了公共基因资源发掘的方法,也为对虾功能基因的研究利用提供了重要参考数据。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 EST 基因组织异性表达
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美国《化学文摘》收录2005年《眼科新进展》论文目录(二)
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《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第4期348-348,共1页
16 王昕华,才娜,张开立,李宏.晶状体上皮细胞特异性表达基因LEP503检测及分析[J].眼科新进展,2005,25(4):312—314. 17 周炼红,邢怡桥,张云成.角膜碱烧伤后VEGF的表达与新生血管的关系[J].眼科新进展,2005,25(4):3... 16 王昕华,才娜,张开立,李宏.晶状体上皮细胞特异性表达基因LEP503检测及分析[J].眼科新进展,2005,25(4):312—314. 17 周炼红,邢怡桥,张云成.角膜碱烧伤后VEGF的表达与新生血管的关系[J].眼科新进展,2005,25(4):315-317. 展开更多
关键词 《眼科新进展》 《化学文摘》 异性表达基因 晶状体上皮细胞 目录 论文 美国 LEP503
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