期刊文献+
共找到7篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
柳枝稷基因枪转化法中国产裂解膜代替进口膜的可行性研究
1
作者 徐开杰 史丽丽 +1 位作者 奚亚军 朱建楚 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期673-676,共4页
利用国产和进口裂解膜转化柳枝稷(Panicum virgatum L.)愈伤组织,对裂解膜裂解时的压强、抗性愈伤率、分化再生苗及阳性转化率进行统计分析。结果表明:国产裂解膜在裂解时压强的稳定性略低于进口膜,但其平均值差异不显著;除抗性愈伤率... 利用国产和进口裂解膜转化柳枝稷(Panicum virgatum L.)愈伤组织,对裂解膜裂解时的压强、抗性愈伤率、分化再生苗及阳性转化率进行统计分析。结果表明:国产裂解膜在裂解时压强的稳定性略低于进口膜,但其平均值差异不显著;除抗性愈伤率国产裂解膜显著低于进口膜外(P<0.05),其余各指标差异均不显著。因此,在柳枝稷基因枪转化法中国产裂解膜完全可以代替进口膜,节约试验经费。 展开更多
关键词 柳枝稷 基因枪转化法 裂解膜 潮霉素抗性愈伤 再生植株
在线阅读 下载PDF
葡萄糖氧化酶基因转化小麦的研究 被引量:12
2
作者 康乐 叶兴国 +1 位作者 徐惠君 杜丽璞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期686-691,共6页
葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GO)在植物抵抗真菌和细菌感染时起重要作用,但将GO基因转入小麦的研究目前还未见报道。本研究利用基因枪介导法将来源于黑曲霉的GO基因转入优良小麦品种扬麦10号、鲁麦22和鲁麦23,从轰击的3300块幼胚愈伤... 葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GO)在植物抵抗真菌和细菌感染时起重要作用,但将GO基因转入小麦的研究目前还未见报道。本研究利用基因枪介导法将来源于黑曲霉的GO基因转入优良小麦品种扬麦10号、鲁麦22和鲁麦23,从轰击的3300块幼胚愈伤组织中,获得了246棵再生植株,经PCR鉴定,其中的31棵含有GO基因,PCR阳性植株比例为0.94%。T1代经Southernblotting分析,证明GO基因已整合到小麦基因组中。T2代植株淀粉碘化钾染色结果证实GO基因已在蛋白质水平表达。对T2代植株进行了白粉病抗性鉴定,结果在34个转基因株系中有23个株系的病情指数低于相应的非转基因对照。T1代转基因植株经PCR分析,筛选到48株含有GO基因而不带有筛选标记基因(bar)的植株。 展开更多
关键词 小麦 葡萄糖氧化酶基因 基因枪转化法
在线阅读 下载PDF
利用P5CS基因转化白三叶的研究 被引量:9
3
作者 李志亮 杨清 +3 位作者 叶嘉 邢浩春 黄丛林 吴忠义 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期61-65,共5页
为了培育抗旱白三叶,构建了植物表达载体pBPC-P5CS,利用基因枪法转化白三叶的愈伤组织,PCR检测和Southern blot鉴定证实白三叶中已导入P5CS基因。对转P5CS基因白三叶植株的不同抗旱指标进行了分析。结果表明,与对照相比,转P5CS基因株系... 为了培育抗旱白三叶,构建了植物表达载体pBPC-P5CS,利用基因枪法转化白三叶的愈伤组织,PCR检测和Southern blot鉴定证实白三叶中已导入P5CS基因。对转P5CS基因白三叶植株的不同抗旱指标进行了分析。结果表明,与对照相比,转P5CS基因株系的抗旱能力得到了较大的提高。干旱胁迫下,与对照相比,转P5CS基因植株的脯氨酸含量和相对含水量分别比对照高20.0%-21.2%和5.6%-8.5%。 展开更多
关键词 P5CS基因 白三叶 基因枪转化法 抗旱性
在线阅读 下载PDF
Ti^d基因对水稻的转化及转基因植株的抗虫性 被引量:4
4
作者 林春晶 林秀峰 +2 位作者 董英山 贺红霞 姜健 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第5期33-37,64,共6页
利用基因枪转化法将大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(SKTI)基因Tid转入北方推广的水稻(Oryza sativa L)品种丰优301和通887,所获得的潮霉素抗性植株通过GUS组织化学分析、PCR检测、Southern blot分子检测,证实Tid基因已经转入水稻基因组中,... 利用基因枪转化法将大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(SKTI)基因Tid转入北方推广的水稻(Oryza sativa L)品种丰优301和通887,所获得的潮霉素抗性植株通过GUS组织化学分析、PCR检测、Southern blot分子检测,证实Tid基因已经转入水稻基因组中,为转基因植株。用转基因水稻植株叶片进行了室内饲喂水稻二化螟(Chilo suppressalis)实验,抗虫性分析结果表明,与对照比较,部分转基因水稻植株明显地增强了对水稻二化螟虫的抗性。对转基因R1代植株进行PCR和PCR Sotlthern分析,表明外源基因在转基因植株后代中稳定遗传。 展开更多
关键词 水稻 基因枪转化法 基因植株 抗虫性 遗传转化 胰蛋白酶抑制剂 Ti^d基因
在线阅读 下载PDF
烟草叶绿体16S启动子的克隆改造及转基因植株的获得 被引量:6
5
作者 山松 张中林 +2 位作者 陈曦 刘春英 沈桂芳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期536-540,共5页
设计引物并克隆了烟草叶绿体16SrDNA基因的启动子,并在其下游加入了rbcL基因的SD序列,以使该启动子能有效翻译外源基因;进一步以aadA基因作为外源基因,以psbA基因的3’序列为终止子,构建成aadA基因表达盒;将此表达盒插入烟草叶绿体同源... 设计引物并克隆了烟草叶绿体16SrDNA基因的启动子,并在其下游加入了rbcL基因的SD序列,以使该启动子能有效翻译外源基因;进一步以aadA基因作为外源基因,以psbA基因的3’序列为终止子,构建成aadA基因表达盒;将此表达盒插入烟草叶绿体同源片段trnK-psbA-trnH中,构建成烟草叶绿体转化及表达载体P16T.用基因枪微弹轰击转化法,将该载体导人野生型大烟草叶绿体中,建立了烟草叶绿体遗传转化体系,转化频率为0.5株/枪.对转化植株进行PCR及遗传杂交实验分析,证明外源基因已在烟草叶绿体中稳定整合并遵循母系遗传规律. 展开更多
关键词 烟草 16S启动子 基因枪转化法 叶绿体 克隆
在线阅读 下载PDF
转抗虫基因三系优良保持系的获得 被引量:5
6
作者 马炳田 王玲霞 +2 位作者 李平 朱祯 周开达 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期60-65,共6页
以质粒pBUSCK HPT作抗虫基因供体 ,优良籼型保持系D6 2B为受体 ,采用基因枪转化法 ,获得了转抗虫基因sck的植株。将转基因保持系与不育系D6 2A回交 ,获得转抗虫基因不育系。分子证据表明 ,外源基因能稳定转移到不育系中。蛋白活性测定显... 以质粒pBUSCK HPT作抗虫基因供体 ,优良籼型保持系D6 2B为受体 ,采用基因枪转化法 ,获得了转抗虫基因sck的植株。将转基因保持系与不育系D6 2A回交 ,获得转抗虫基因不育系。分子证据表明 ,外源基因能稳定转移到不育系中。蛋白活性测定显示 ,转基因在不育系中得到表达。 展开更多
关键词 转抗虫基因 三系水稻 抗虫性 基因 籼型保持系 基因枪转化法
在线阅读 下载PDF
用核基质结合区(SAR)序列提高小麦最小表达框转基因表达的稳定性 被引量:1
7
作者 苏瑞波 陈明 +3 位作者 徐兆师 李连城 马庆 马有志 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期63-71,共9页
采用最小表达框技术转化植物可以规避由骨架序列引起的安全风险。核基质结合区序列SAR(scaffold attachment region)可作为边界元件与核基质结合阻挡转基因片段邻近染色质区的作用与影响,提高外源基因稳定性。本研究在最小表达框序列... 采用最小表达框技术转化植物可以规避由骨架序列引起的安全风险。核基质结合区序列SAR(scaffold attachment region)可作为边界元件与核基质结合阻挡转基因片段邻近染色质区的作用与影响,提高外源基因稳定性。本研究在最小表达框序列两端添加SAR序列,提高小麦最小表达框转基因表达的稳定性,提高转化基因的表达效率。首先,以GUS为目的基因构建带有SAR序列的最小表达框,以科农199为受体进行基因枪转化,同时以不加SAR序列的最小表达框片段为对照。带有SAR序列的最小表达框片段共轰击857个幼胚,T0代获得40株再生植株,PCR检测到16株阳性植株,转化效率为1.87%;对这16个阳性单株进行GUS染色,15株显色;从来自4个T0阳性植株的18个T1代植株中随机选取18株进行PCR和GUS染色检测,有15株表现为阳性。不带SAR序列的对照片段轰击1012个幼胚,获得31株再生植株,其中5株PCR阳性,转化效率0.49%,这5个阳性植株中仅2株为GUS染色阳性;来自于5个T0代PCR阳性株系的10个T1代单株中没有发现PCR和GUS染色阳性株。表明SAR序列可以提高基因枪转基因效率和目的基因表达稳定性。为了创制抗旱转基因小麦,以来自大豆的抗旱相关转录因子基因GmDREB3为目的基因,Bar基因为筛选标记基因,转化受体小麦济麦22,共轰击6045个幼胚,获得再生植株130株,PCR检测阳性植株30株,转化效率为0.50%;随机选取6株PCR阳性植株进行RT-PCR分析,其中5株可检测到外源基因的转录。进一步对这5株RT-PCR阳性植株插入片段完整性进行分析,其中4株插入片段基本完整。通过real-time PCR分析,发现T0代6个RT-PCR阳性植株的外源GmDREB3的拷贝数为1~3个。以上结果证明,在最小表达框两端加上SAR序列后可以提高小麦最小表达框转基因表达的稳定性。 展开更多
关键词 SAR序列 最小表达框转化 DREB类基因 基因枪转化法
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部