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HSV-TK/HSV-sr39TK基因工程T细胞的研制
被引量:
2
1
作者
李振宇
徐开林
+5 位作者
潘秀英
高飞
何徐彭
鹿群先
孙海英
李德鹏
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期999-1003,共5页
目的:制备慢病毒载体为基础的野生型及突变型单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK/HSV-sr39TK)基因工程T细胞(TK+T及sr39TK+T细胞),观察给予前体药物丙氧鸟苷/无环鸟苷后小鼠T淋巴细胞对其敏感性及存活情况。方法:构建含HSV-TK/HSV-sr39TK及内...
目的:制备慢病毒载体为基础的野生型及突变型单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK/HSV-sr39TK)基因工程T细胞(TK+T及sr39TK+T细胞),观察给予前体药物丙氧鸟苷/无环鸟苷后小鼠T淋巴细胞对其敏感性及存活情况。方法:构建含HSV-TK/HSV-sr39TK及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的双顺反子慢病毒载体;采用磷酸钙沉淀法将慢病毒载体三质粒转染293T细胞,收集病毒上清感染刀豆蛋白刺激的小鼠T淋巴细胞,给予不同浓度的前体药物GCV/ACV,用Cell Counting Kit(CCK-8)等方法检测T细胞的存活率。结果:转染293T细胞后,病毒滴度达106/U/ml以上;含不同启动子的病毒载体转染效率CMV>PUB>PGK,对小鼠T淋巴细胞的感染效率以CMV启动子最高;IC50值的测定显示sr39TK+T细胞对GCV和ACV的敏感性较TK+T细胞分别提高约2.5和17.4倍;ACV及GCV浓度在1~10μmol/Lsr39TK+T细胞活率下降最为明显,ACV组细胞存活率由(98.4±2.7)%下降为(49.9±5.9)%,GCV组由(97.9%±2.7)%下降为(33.7±5.3)%,P<0.05,随ACV及GCV浓度的增加,细胞活率下降趋势有所减弱;TK+T细胞对GCV敏感,细胞活率由(97.9±2.7)%下降为(38.4±5.5)%,(P<0.05),对ACV不敏感,细胞活率由(98.4±2.7)%下降为(73.8±7.4)%,P>0.05。结论:成功构建了HSV-TK/HSV-sr39TK基因工程T细胞,不同启动子对慢病毒载体在293T细胞的转染效率、转导自杀基因在T淋巴细胞内的表达均有影响;HSV-sr39TK+T细胞对GCV和ACV的敏感性高于TK+T细胞。
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关键词
单纯疱疹病毒胸苷激酶
突变型
野生型
基因工程t细胞
慢病毒载体
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职称材料
基因工程T细胞的临床研究进展
2
作者
高俊芳
李峰
+1 位作者
王丽萍
张毅
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2016年第6期685-690,共6页
尽管手术和放化疗等传统治疗手段在肿瘤治疗方面取得了很大进展,但在改善肿瘤患者预后和生存等方面仍不令人满意。近年来,肿瘤免疫治疗领域发展迅速,出现了多种效果良好的免疫治疗药物和技术[1-6]。免疫治疗已经成为肿瘤综合治疗的重要...
尽管手术和放化疗等传统治疗手段在肿瘤治疗方面取得了很大进展,但在改善肿瘤患者预后和生存等方面仍不令人满意。近年来,肿瘤免疫治疗领域发展迅速,出现了多种效果良好的免疫治疗药物和技术[1-6]。免疫治疗已经成为肿瘤综合治疗的重要手段,甚至在不久后有可能成为肿瘤治疗的主要手段。在这些免疫治疗新技术中,基因工程T细胞的发展尤为令人瞩目[7]。多项临床研究[8-11]显示,基因工程T细胞能够有效清除机体内恶性细胞,甚至能够长期缓解病情。该文将介绍基因工程T细胞的临床研究进展,并探讨该领域在中国的发展。
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关键词
免疫治疗
基因工程t细胞
t
CR-
t
细胞
CAR-
t
细胞
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职称材料
基因工程T细胞临床研究专家指导意见(2021)
被引量:
1
3
作者
中国医药质量管理协会细胞治疗质量控制与研究专业委员会
赵璇
+3 位作者
黄建敏
夏建川
张毅
韩为东
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期431-434,共4页
目前,越来越多的基因工程T细胞临床研究在中国开展,但尚无适用于临床研究中供临床研究医生参考的指导意见。因此,中国医药质量管理协会细胞治疗质量控制与研究专业委员会针对基因工程T细胞临床研究的特点,从开展临床研究医生的角度,对...
目前,越来越多的基因工程T细胞临床研究在中国开展,但尚无适用于临床研究中供临床研究医生参考的指导意见。因此,中国医药质量管理协会细胞治疗质量控制与研究专业委员会针对基因工程T细胞临床研究的特点,从开展临床研究医生的角度,对患者的选择、细胞的采集与制备、细胞的储存与运输、围细胞输注期治疗及疗效评价等多方面,组织细胞治疗领域的多名专家,综合国内外研究最新进展并结合临床实践经验,经多次讨论和修改,最终形成基因工程T细胞临床研究专家指导意见(2021)。本指导意见旨在为基因工程T细胞的临床研究医生提供专业指导,保护临床研究中患者的安全并争取最大的获益。
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关键词
基因工程t细胞
临床研究
专家共识
指导意见
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职称材料
题名
HSV-TK/HSV-sr39TK基因工程T细胞的研制
被引量:
2
1
作者
李振宇
徐开林
潘秀英
高飞
何徐彭
鹿群先
孙海英
李德鹏
机构
徐州医学院附属医院血液科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期999-1003,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30170389)
江苏省"135"医学重点人才基金资助项目(编号RC2002080)
文摘
目的:制备慢病毒载体为基础的野生型及突变型单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK/HSV-sr39TK)基因工程T细胞(TK+T及sr39TK+T细胞),观察给予前体药物丙氧鸟苷/无环鸟苷后小鼠T淋巴细胞对其敏感性及存活情况。方法:构建含HSV-TK/HSV-sr39TK及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的双顺反子慢病毒载体;采用磷酸钙沉淀法将慢病毒载体三质粒转染293T细胞,收集病毒上清感染刀豆蛋白刺激的小鼠T淋巴细胞,给予不同浓度的前体药物GCV/ACV,用Cell Counting Kit(CCK-8)等方法检测T细胞的存活率。结果:转染293T细胞后,病毒滴度达106/U/ml以上;含不同启动子的病毒载体转染效率CMV>PUB>PGK,对小鼠T淋巴细胞的感染效率以CMV启动子最高;IC50值的测定显示sr39TK+T细胞对GCV和ACV的敏感性较TK+T细胞分别提高约2.5和17.4倍;ACV及GCV浓度在1~10μmol/Lsr39TK+T细胞活率下降最为明显,ACV组细胞存活率由(98.4±2.7)%下降为(49.9±5.9)%,GCV组由(97.9%±2.7)%下降为(33.7±5.3)%,P<0.05,随ACV及GCV浓度的增加,细胞活率下降趋势有所减弱;TK+T细胞对GCV敏感,细胞活率由(97.9±2.7)%下降为(38.4±5.5)%,(P<0.05),对ACV不敏感,细胞活率由(98.4±2.7)%下降为(73.8±7.4)%,P>0.05。结论:成功构建了HSV-TK/HSV-sr39TK基因工程T细胞,不同启动子对慢病毒载体在293T细胞的转染效率、转导自杀基因在T淋巴细胞内的表达均有影响;HSV-sr39TK+T细胞对GCV和ACV的敏感性高于TK+T细胞。
关键词
单纯疱疹病毒胸苷激酶
突变型
野生型
基因工程t细胞
慢病毒载体
Keywords
Herpes simplex virus
t
hymidine kinase gene
Wild-
t
ype
Mu
t
an
t
-
t
ype
Gene
t
ic engineering
t
lymphocy
t
es
Len
t
iviral vec
t
or
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
R552 [医药卫生—血液循环系统疾病]
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职称材料
题名
基因工程T细胞的临床研究进展
2
作者
高俊芳
李峰
王丽萍
张毅
机构
郑州大学第一附属医院肿瘤科
郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心
郑州大学生命科学学院
出处
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2016年第6期685-690,共6页
基金
国家自然科学基金项目81171986
81271815
卫生部科研资助金201501004
文摘
尽管手术和放化疗等传统治疗手段在肿瘤治疗方面取得了很大进展,但在改善肿瘤患者预后和生存等方面仍不令人满意。近年来,肿瘤免疫治疗领域发展迅速,出现了多种效果良好的免疫治疗药物和技术[1-6]。免疫治疗已经成为肿瘤综合治疗的重要手段,甚至在不久后有可能成为肿瘤治疗的主要手段。在这些免疫治疗新技术中,基因工程T细胞的发展尤为令人瞩目[7]。多项临床研究[8-11]显示,基因工程T细胞能够有效清除机体内恶性细胞,甚至能够长期缓解病情。该文将介绍基因工程T细胞的临床研究进展,并探讨该领域在中国的发展。
关键词
免疫治疗
基因工程t细胞
t
CR-
t
细胞
CAR-
t
细胞
分类号
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
基因工程T细胞临床研究专家指导意见(2021)
被引量:
1
3
作者
中国医药质量管理协会细胞治疗质量控制与研究专业委员会
赵璇
黄建敏
夏建川
张毅
韩为东
机构
不详
郑州大学第一附属医院
中山大学肿瘤防治中心
解放军总医院第一医学中心
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期431-434,共4页
基金
国家重点研发计划重点专项资助项目(No.2018YFC1313400)
重大新药创制科技重大专项资助项目(No.2020ZX09201-009)。
文摘
目前,越来越多的基因工程T细胞临床研究在中国开展,但尚无适用于临床研究中供临床研究医生参考的指导意见。因此,中国医药质量管理协会细胞治疗质量控制与研究专业委员会针对基因工程T细胞临床研究的特点,从开展临床研究医生的角度,对患者的选择、细胞的采集与制备、细胞的储存与运输、围细胞输注期治疗及疗效评价等多方面,组织细胞治疗领域的多名专家,综合国内外研究最新进展并结合临床实践经验,经多次讨论和修改,最终形成基因工程T细胞临床研究专家指导意见(2021)。本指导意见旨在为基因工程T细胞的临床研究医生提供专业指导,保护临床研究中患者的安全并争取最大的获益。
关键词
基因工程t细胞
临床研究
专家共识
指导意见
Keywords
gene
t
ically engineered
t
cells
clinical research
exper
t
consensus
guidance
分类号
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HSV-TK/HSV-sr39TK基因工程T细胞的研制
李振宇
徐开林
潘秀英
高飞
何徐彭
鹿群先
孙海英
李德鹏
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基因工程T细胞的临床研究进展
高俊芳
李峰
王丽萍
张毅
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2016
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
基因工程T细胞临床研究专家指导意见(2021)
中国医药质量管理协会细胞治疗质量控制与研究专业委员会
赵璇
黄建敏
夏建川
张毅
韩为东
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
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职称材料
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