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不同剂量包虫病基因工程亚单位疫苗EG95免疫牦牛后的抗体水平测定 被引量:4
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作者 李盛琼 杨光友 +10 位作者 李徳珍 陈和强 华瑞其 高露 尹杰 袁东波 杨天俊 黄雅琳 魏秋霞 阳爱国 侯巍 《中国动物检疫》 CAS 2022年第7期108-110,118,共4页
为比较和评价不同剂量包虫病基因工程亚单位疫苗EG95免疫牦牛后的抗体差异,随机选择1岁左右的牦牛50头,平均分成A、B、C、D、E 5组,分别按照1、2、3、4、5头份剂量(每头份含EG9550μg)进行一免和二免(间隔28 d);免疫前及二免后15 d采血... 为比较和评价不同剂量包虫病基因工程亚单位疫苗EG95免疫牦牛后的抗体差异,随机选择1岁左右的牦牛50头,平均分成A、B、C、D、E 5组,分别按照1、2、3、4、5头份剂量(每头份含EG9550μg)进行一免和二免(间隔28 d);免疫前及二免后15 d采血,应用间接ELISA法检测血清中的特异性抗体。结果显示:二免后A、B、C组的抗体阳性率分别为30%、40%、50%,与E组的90%存在显著性差异(P<0.05),D组阳性率为80%,与E组无显著性差异(P>0.05);A组和B组抗体合格率均为0,C、D、E组的抗体合格率分别为10%、40%、70%,E组抗体合格率明显高于其他组(P<0.05)。试验结果表明,采用EG95基因工程亚单位疫苗按5头份剂量免疫,间隔28 d后二免,对牦牛的免疫效果较为理想。 展开更多
关键词 包虫病 基因工程亚单位疫苗eg95 牦牛 抗体 免疫效果
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猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)免疫攻毒后带毒、排毒评价研究
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作者 陈坚 贾宝琴 +14 位作者 高洁 赵丽霞 车影 程水生 宋志刚 杜宇荣 李晓艳 岳继恒 狄栋栋 张建华 吴素芳 张强 高日明 闫聪 才学鹏 《中国兽药杂志》 2024年第12期1-8,共8页
猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)为中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO)表达的E2蛋白加佐剂乳化制成。为评价其免疫攻毒保护效果,同时重点监测攻毒后的带毒、排毒及水平传播情况,将制备的1批猪瘟基因工程亚单位疫苗(CH... 猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)为中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO)表达的E2蛋白加佐剂乳化制成。为评价其免疫攻毒保护效果,同时重点监测攻毒后的带毒、排毒及水平传播情况,将制备的1批猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)两次免疫接种4~6周龄仔猪,二免后第21天连同对照猪进行猪瘟石门系强毒攻击,另设同居组;各组实验猪于攻毒后第0、2、4、6、8、10、12、14、16天,采集口、鼻、肛拭子及全血进行RT-qPCR检测猪瘟病毒核酸,并于攻毒后第16天剖检所有试验猪,采集各组织器官进行免疫组化检测及组织病毒载量检测。攻毒观察结果表明,免疫组5/5保护,对照组5/5发病并死亡。RT-qPCR结果表明,对照组猪攻毒后口、鼻、肛拭子,及全血均持续检测到明显排毒,各脏器均检出猪瘟病毒;免疫组攻毒后口、鼻、肛拭子均未检测到猪瘟病毒,且攻毒12 d之后全血中猪瘟病毒核酸全部转为阴性,免疫组部分猪扁桃体和淋巴结中检出较低的病毒核酸拷贝数;同居组猪,口、鼻、肛拭子及全血、各组织器官中均未检测到猪瘟病毒。免疫组化结果表明,对照组猪各脏器均为阳性,免疫组和同居组猪各脏器均为阴性。猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)对猪只提供良好的免疫保护,猪瘟石门系强毒攻击后免疫猪健活不排毒,有效阻断病毒的水平传播,可作为今后临床中猪瘟疫病传播防控的参考疫苗。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 基因工程单位疫苗 带毒 排毒 水平传播
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铜绿假单胞菌oprI基因DNA疫苗及其重组亚单位疫苗免疫效果的评估 被引量:1
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作者 祝世纪 宫强 +1 位作者 田佳雨 李雅静 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期285-291,共7页
为评估铜绿假单胞菌opr I基因DNA疫苗和重组亚单位疫苗对小鼠的免疫效果,本实验将铜绿假单胞菌外膜蛋白编码基因opr I克隆至真核表达载体p CAGGS-HA中构建重组质粒p CAGGS-opr I,经酶切鉴定正确后获得DNA疫苗。同时将opr I基因克隆至原... 为评估铜绿假单胞菌opr I基因DNA疫苗和重组亚单位疫苗对小鼠的免疫效果,本实验将铜绿假单胞菌外膜蛋白编码基因opr I克隆至真核表达载体p CAGGS-HA中构建重组质粒p CAGGS-opr I,经酶切鉴定正确后获得DNA疫苗。同时将opr I基因克隆至原核表达载体p ET32a中构建重组质粒p ET32a-oprI,经酶切鉴定正确后转入大肠杆菌,经IPTG诱导重组Opr I蛋白(rOprI)的表达,采用亲和层析法纯化后以SDS-PAGE检测,结果显示正确表达了r Opr I,且获得了其纯化蛋白,利用其制备重组亚单位疫苗。分别以DNA疫苗和重组亚单位疫苗免疫BALB/c小鼠,并以铜绿假单胞菌的灭活疫苗和外膜蛋白疫苗为对照,采用间接ELISA法检测免疫后不同时间小鼠血清中的抗体水平和血清中IFN-γ、IL-2和IL-4的含量;初免42 d后以铜绿假单胞菌(1.25×109 cfu/mL,100μL/只)对各组小鼠进行攻毒试验,通过测定各疫苗对小鼠的保护率,评估疫苗的保护效果。结果显示,各疫苗诱导的免疫小鼠血清抗体水平和细胞因子含量均显著高于阴性对照组(P<0.05),且重组亚单位疫苗诱导小鼠的抗体水平和IL-4含量均显著高于DNA疫苗(P<0.05),而IFN-γ和IL-2含量则与DNA疫苗无显著差异(P>0.05)。小鼠攻毒试验结果显示,DNA疫苗组、重组亚单位疫苗组、外膜蛋白疫苗组和灭活疫苗组小鼠获得的免疫保护率分别为45%、55%、70%和95%。上述结果首次表明以铜绿假单胞菌opr I基因制备的DNA疫苗和r Opr I重组亚单位疫苗均可诱导小鼠产生体液和细胞免疫应答,并可为小鼠提供对铜绿假单胞菌攻毒的免疫保护效果,但二者的免疫效果还需进一步提高。本研究为铜绿假单胞菌疫苗的研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 oprI基因 DNA疫苗 重组单位疫苗 免疫效果
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A组牛轮状病毒基因工程亚单位疫苗的初步研究 被引量:4
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作者 杨少华 何洪彬 +4 位作者 杨宏军 王长法 高运东 马跃宁 仲跻峰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期506-510,共5页
目的构建轮状病毒外膜蛋白VP4、VP7基因与大肠杆菌LTB蛋白基因的重组表达载体,研究重组表达蛋白的免疫原性,为研制犊牛腹泻基因工程亚单位疫苗奠定基础。方法克隆A组牛轮状病毒临床分离株CHLY的VP4、VP7基因和大肠杆菌LTB基因,插入pET32... 目的构建轮状病毒外膜蛋白VP4、VP7基因与大肠杆菌LTB蛋白基因的重组表达载体,研究重组表达蛋白的免疫原性,为研制犊牛腹泻基因工程亚单位疫苗奠定基础。方法克隆A组牛轮状病毒临床分离株CHLY的VP4、VP7基因和大肠杆菌LTB基因,插入pET32a中构建了4个原核表达载体pET32a/VP7、pET32a/VP4、pET32a/VP7-LTB、pET32a/VP4-LTB,转化到BL21(DE3)中进行表达纯化,纯化蛋白与弗氏佐剂混合免疫10 w龄雌鼠,在实验期间对雌鼠进行交配,对其所产乳鼠用150μL10-6.5/0.1 mL TCID50的轮状病毒进行攻毒以研究重组蛋白免疫原性和攻毒保护性。结果重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体的形式存在,Bandscan扫描分析结果显示,它们分别占菌体总蛋白的35%、20%、30%、18%,利用Ni-NTA Agarose在变性条件下成功纯化得到高纯度重组蛋白。10 w龄雌鼠免疫试验表明rVP4-LTB组激发了最强的免疫反应,rVP4组次之,rVP7-LTB组略高于rVP7,各个免疫组间的差异性不显著(P>0.05),各实验组IgG抗体水平显著高于空质粒对照组(P<0.01)。雌鼠所产乳鼠的攻毒实验表明,免疫组雌鼠所产乳鼠腹泻率为13.35%~23.8%,腹泻持续时间为48h~72h,较空质粒对照组明显降低,腹泻症状较轻且症状持续时间明显缩短。四个重组蛋白组攻毒保护率为76.2%~86.7%,rVP7-LTBr、VP4-LTB两组略高于rVP7r、VP4组,但相互间差异不显著(P>0.05)。结论重组蛋白具有较好的免疫原性,被免疫雌鼠体内产生的中和性抗体可以经被动免疫过程传递至子代,并为仔鼠提供保护。本研究为犊牛轮状病毒基因工程疫苗的研究奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 牛轮状病毒 基因工程单位疫苗 LTB
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棘球蚴基因工程亚单位疫苗免疫绵羊的效果研究 被引量:6
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作者 阚威 蔡金山 +6 位作者 赵全邦 沈艳丽 马占全 胡广卫 李静 王小红 才华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第8期10-12,共3页
采用羊棘球蚴基因工程亚单位疫苗对2 315只3~20月龄藏系绵羊进行3次免疫试验,并用间接ELISA对免疫后的抗体进行动态监测。检测结果显示,首免前、首免1周后、二免1周后、二免1年后、三免1周后、三免后6个月的血清抗体阳性率依次为0%、98.... 采用羊棘球蚴基因工程亚单位疫苗对2 315只3~20月龄藏系绵羊进行3次免疫试验,并用间接ELISA对免疫后的抗体进行动态监测。检测结果显示,首免前、首免1周后、二免1周后、二免1年后、三免1周后、三免后6个月的血清抗体阳性率依次为0%、98.75%、94.94%、40.74%、98.72%、50%。同时,对同龄、同群、同草场放牧的羊三免1年后进行剖检,免疫组59只、对照组60只。结果显示,对照组感染率、感染强度为86.67%和3.43,免疫组感染率、感染强度为45.76%和0.86,免疫保护率(减囊率)为69.38%。 展开更多
关键词 棘球蚴病 棘球蚴基因工程单位疫苗 免疫研究
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CAV基因工程亚单位苗与IBDV二联灭活疫苗的研究 被引量:3
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作者 张知良 黄建芳 +4 位作者 赵宝华 胡清海 何家禄 张志芳 肖庆利 《动物医学进展》 CSCD 2002年第3期57-59,共3页
IBDV为自行分离的 VVIBDV COB-C1组织毒 ,毒价为 CEL D50 1 0 5.6 / 0 .2 m L ,CAV为 VP1和 VP2基因克隆进家蚕杆状病毒转基因载体质粒中 ,后经重组 ,筛选后获得的重组VP1和 VP2基因产物。IBDV经甲醛灭活后与CAV按适当比例混合。 1∶ 4... IBDV为自行分离的 VVIBDV COB-C1组织毒 ,毒价为 CEL D50 1 0 5.6 / 0 .2 m L ,CAV为 VP1和 VP2基因克隆进家蚕杆状病毒转基因载体质粒中 ,后经重组 ,筛选后获得的重组VP1和 VP2基因产物。IBDV经甲醛灭活后与CAV按适当比例混合。 1∶ 4与白油佐剂研制成油包水型乳化剂二联疫苗 ,经安全试验、免疫保护试验证明该二联灭活疫苗安全有效 ,免疫种鸡群后可使其后代产生 IBDV和 CAV抗体 。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病病毒 传染性法氏囊病毒 CAV 基因工程单位 IBDV二联灭活疫苗
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产气荚膜梭菌α蛋白的高效可溶性表达与基因工程亚单位疫苗的制备 被引量:2
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作者 孙雨 杨林 +3 位作者 王传彬 董浩 杨天意 宋晓晖 《中国草食动物科学》 CAS 2017年第3期40-45,共6页
通过优化α蛋白的密码子、去除蛋白信号肽、选择亲水性与抗原性较好的序列、优化表达条件等方法,在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达的产气荚膜梭菌可溶性重组α蛋白,用该蛋白免疫小鼠,再用间接ELISA方法测定血清抗体水平。结果表明:针... 通过优化α蛋白的密码子、去除蛋白信号肽、选择亲水性与抗原性较好的序列、优化表达条件等方法,在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达的产气荚膜梭菌可溶性重组α蛋白,用该蛋白免疫小鼠,再用间接ELISA方法测定血清抗体水平。结果表明:针对A型、B型、C型和D型产气荚膜梭菌的保护率分别为100%、90%、85%和90%,小鼠三免后7~14 d抗体效价达到峰值。该研究表达的α蛋白具有较好的免疫原性,可进一步用于研制预防产气荚膜梭菌的基因工程亚单位疫苗。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 α蛋白 可溶性表达与纯化 基因工程单位疫苗
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接种传染性法氏囊病基因工程重组亚单位油乳剂疫苗的产蛋鸡血清抗体与蛋黄抗体的相关性分析 被引量:1
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作者 程太平 荣俊 +1 位作者 彭本英 曹志刚 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第5期48-50,共3页
用笔者研制的传染性法氏囊病(IBD)基因工程重组亚单位油乳剂疫苗免疫产蛋鸡,接种后第22d及以后每周进行一次无菌采血,分离血清,用琼脂免疫扩散试验(AGID)检测IBD血清抗体水平;每周用同样的方法检测蛋黄中IBD抗体水平。对血清抗体水平和... 用笔者研制的传染性法氏囊病(IBD)基因工程重组亚单位油乳剂疫苗免疫产蛋鸡,接种后第22d及以后每周进行一次无菌采血,分离血清,用琼脂免疫扩散试验(AGID)检测IBD血清抗体水平;每周用同样的方法检测蛋黄中IBD抗体水平。对血清抗体水平和蛋黄中抗体水平进行相关性统计分析,得出两者之间的相关系数,并进行显著性检验。统计分析结果表明,相关系数r=0.7782,表明血清抗体水平和蛋黄中抗体水平相关关系属于强正直线相关;t值为14.02,t>t(∞)=2.576,差异极显著(P<0.01),即血清抗体水平和蛋黄中抗体水平之间的相关系数极显著;F值为190.55,F>F0.01(1,128)=6.84,差异极显著(P<0.01),即血清抗体水平和蛋黄中抗体水平之间的相关关系极显著。 展开更多
关键词 IBD 基因工程重组单位油乳剂疫苗 血清抗体 蛋黄抗体 AGID 相关性分析
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基因工程亚单位疫苗的研究现状及发展动态 被引量:11
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作者 郭文龙 朱瑞良 《国外畜牧学(猪与禽)》 2008年第4期72-75,共4页
随着生物技术在生物制品领域的应用不断深化和发展,近年成功研制了许多基因工程亚单位疫苗,代表了新疫苗的一个发展新途径。为克服一些常规疫苗的缺陷带来希望,展示了其广阔的应用前景。
关键词 基因工程单位疫苗 表达 现状 前景
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禽流感H5亚型基因工程亚单位疫苗对哺乳动物的免疫保护
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作者 孟庆文 刘光亮 +2 位作者 施建忠 吴东来 陈化兰 《中国畜禽种业》 2005年第8期43-44,共2页
该研究以本课题组克隆构建并于昆虫/杆状病毒表达系统中表达的禽流感病毒A/goose/Guangdong/1/96(H5N1)H5HA蛋白定量乳化后,皮下多点注射免疫SPF级BALB/c雌性小鼠,免疫后产生了H5HA特异抗体,并在三免前后达到并保持较高水平。用致死剂量... 该研究以本课题组克隆构建并于昆虫/杆状病毒表达系统中表达的禽流感病毒A/goose/Guangdong/1/96(H5N1)H5HA蛋白定量乳化后,皮下多点注射免疫SPF级BALB/c雌性小鼠,免疫后产生了H5HA特异抗体,并在三免前后达到并保持较高水平。用致死剂量的HPAIVH5N1攻击小鼠,免疫组小鼠提供了100%的保护力,而对照组小鼠先后发病且死亡。 展开更多
关键词 单位疫苗 基因工程疫苗 禽流感病毒 哺乳动物 雌性小鼠 杆状病毒表达系统 攻毒保护 免疫保护 病毒含量
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鸡痘病毒载体多价基因工程疫苗及禽流感等亚单位疫苗研制
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作者 王云峰 《中国农村科技》 2006年第8期56-56,共1页
关键词 禽流感病毒 疫苗研制 鸡痘病毒 基因工程疫苗 病毒载体 单位 传染性支气管炎病毒 传染性喉气管炎病毒 多价 免疫保护效果
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中博生物PCV2基因工程亚单位疫苗强势来袭,首日签单1152万mL
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作者 黄若涵 《猪业科学》 2015年第1期66-66,共1页
2014年12月18日,在由湖北省畜牧兽陕学会、湖北省兽用生物制品工程技术研究中心共吲主办、武汉中博生物股份何限公州承办的猪圆环病毒防控国际学术研讨会上,武汉中博生物股份有限公司发布了新产品——猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活... 2014年12月18日,在由湖北省畜牧兽陕学会、湖北省兽用生物制品工程技术研究中心共吲主办、武汉中博生物股份何限公州承办的猪圆环病毒防控国际学术研讨会上,武汉中博生物股份有限公司发布了新产品——猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗(CP08株)。来自韩国、美国和中国的专家以及中博生物的全国经销商近600人共同见证了这一辉煌时刻。 展开更多
关键词 兽用生物制品 单位疫苗 基因工程 PCV2 猪圆环病毒2型 工程技术研究中心 国际学术研讨会 杆状病毒载体
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羊棘球蚴(包虫)病基因工程亚单位疫苗的工业化生产及应用 被引量:3
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作者 曹政 赵扬扬 +3 位作者 林雅 李春燕 刘晓竹 邓灿新 《四川畜牧兽医》 2016年第5期28-30,共3页
本文对羊棘球蚴(包虫)病基因工程亚单位疫苗的工业化生产工艺及应用效果进行了研究,为有效防控包虫病在人畜间传播奠定了基础。
关键词 包虫病 基因工程单位疫苗 eg95 工业化生产
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羊棘球蚴(包虫)病基因工程亚单位疫苗的效果监测 被引量:5
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作者 赵扬扬 李春燕 +1 位作者 郭建华 曹政 《四川畜牧兽医》 2016年第10期28-30,共3页
为了解羊棘球蚴(包虫)病基因工程亚单位疫苗对包虫病防控的效果,我们在新疆某地区进行了持续的疫苗使用情况监测。试验结果显示:疫苗免疫后ELISA抗体检测呈阳性,2011年该地区羊棘球蚴患病率高迭57%,2012~2014年患病率分别为26.... 为了解羊棘球蚴(包虫)病基因工程亚单位疫苗对包虫病防控的效果,我们在新疆某地区进行了持续的疫苗使用情况监测。试验结果显示:疫苗免疫后ELISA抗体检测呈阳性,2011年该地区羊棘球蚴患病率高迭57%,2012~2014年患病率分别为26.0%、8.53%、4.63%;2011~2014年犬粪中棘球蚴虫卵的检出率从14.1%下降至7.4%。说明该疫苗对羊包虫病的传播起到了明显的抑制作用。 展开更多
关键词 棘球蚴(包虫)病基因工程单位疫苗 免疫效果 患病率
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鸡传染性法氏囊病灭活苗与基因工程亚单位疫苗免疫效果比较 被引量:2
15
作者 赵玉康 田振中 《新疆畜牧业》 2013年第11期34-35,共2页
应用SPF鸡分别比较研究了鸡传染性法氏囊病组织灭活苗和基因工程亚单位疫苗接种后的免疫效果,并用中等毒力毒株D78株攻毒后产生的免疫保护力。结果表明用于试验的灭活苗能够80%保护已经免疫的SPF鸡免于D78株人工感染造成的死亡,而基因... 应用SPF鸡分别比较研究了鸡传染性法氏囊病组织灭活苗和基因工程亚单位疫苗接种后的免疫效果,并用中等毒力毒株D78株攻毒后产生的免疫保护力。结果表明用于试验的灭活苗能够80%保护已经免疫的SPF鸡免于D78株人工感染造成的死亡,而基因工程亚单位相对效果较差,仅能保护20%。这说明在不受母源抗体干扰的情况下,灭活苗的免疫效果要优于基因工程亚单位疫苗。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病 灭活苗 基因工程单位疫苗
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猪瘟E2基因工程亚单位疫苗使用效果分析 被引量:2
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作者 牛德料 《今日养猪业》 2020年第2期93-94,共2页
猪瘟俗称"烂肠瘟",又称"猪霍乱",是由黄病毒科猪瘟病毒属的猪瘟病毒引起,一年四季均可导致不同年龄、性别、品种的猪和野猪感染发病,具有高度传染性和致死性,在养猪生产中猪瘟的防控至关重要。猪瘟E2基因工程亚单... 猪瘟俗称"烂肠瘟",又称"猪霍乱",是由黄病毒科猪瘟病毒属的猪瘟病毒引起,一年四季均可导致不同年龄、性别、品种的猪和野猪感染发病,具有高度传染性和致死性,在养猪生产中猪瘟的防控至关重要。猪瘟E2基因工程亚单位疫苗可以有效改善目前猪瘟的防控现状。从猪瘟E2基因工程亚单位疫苗免疫前后检测结果得出. 展开更多
关键词 猪霍乱 阻断率 猪瘟抗体 基因工程单位疫苗 使用效果
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羊棘球蚴病基因工程亚单位疫苗免疫效果检测 被引量:2
17
作者 王淑芳 何金桂 《中兽医学杂志》 2019年第3期18-19,共2页
使用羊棘球蚴(包虫)病基因工程亚单位疫苗对绵羔羊进行一免、二免,中间间隔1个月时间。一免后60天抗体阳性率维持在75%,有保护力的抗体占15%;二免后抗体水平较高,持续时间较长,有效保护力在6个月以上,并且有保护力的抗体占45%以上。根... 使用羊棘球蚴(包虫)病基因工程亚单位疫苗对绵羔羊进行一免、二免,中间间隔1个月时间。一免后60天抗体阳性率维持在75%,有保护力的抗体占15%;二免后抗体水平较高,持续时间较长,有效保护力在6个月以上,并且有保护力的抗体占45%以上。根据此实验结果我们制定了合理的免疫程序用于生产中。 展开更多
关键词 羊棘球蚴(包虫)病基因工程单位疫苗 免疫效果 免疫程序
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2种佐剂在猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗中的效果比较 被引量:1
18
作者 胡江锋 张志刚 +2 位作者 董剑辉 陈瑞 黄文强 《今日畜牧兽医》 2021年第1期11-12,共2页
为给猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗选择一种理想的佐剂,以增强机体对抗原的适应性免疫应答,协同提高动物免疫力。实验用水包油Merckinade SDA 25佐剂和双向Montanide ISA 206佐剂,分别按各自说明制备猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗... 为给猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗选择一种理想的佐剂,以增强机体对抗原的适应性免疫应答,协同提高动物免疫力。实验用水包油Merckinade SDA 25佐剂和双向Montanide ISA 206佐剂,分别按各自说明制备猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗,再对两种佐剂的疫苗进行稳定性、黏度、安全及效力检验,比较评价出猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗的理想佐剂。结果表明,两种佐剂疫苗的稳定性、黏度、安全均合格,无明显差异;但Montanide ISA 206佐剂疫苗较Merckinade SDA 25佐剂疫苗诱导抗体效价更高。据此,笔者认为,Montanide ISA 206佐剂是猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗比较理想的佐剂。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型基因工程单位疫苗 佐剂 比较
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柯萨奇病毒B组3型亚单位疫苗与基因靶向疫苗免疫小鼠的效果比较 被引量:3
19
作者 高志云 蓝佳明 +5 位作者 金玉怀 李剑 刘贵霞 羡仙 张永红 王永祥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期882-885,899,共5页
目的:观察柯萨奇病毒VP1基因靶向核酸疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1、重组腺病毒rAd/C3d3-sVP1和亚单位疫苗VP1蛋白的免疫效果。方法:雄性BALB/c小鼠随机分为4组,每组18只,分别肌肉注射PBS、pcDNA3/C3d3-sVP1、rAd/C3d3-sVP1和VP1蛋白,除重组腺... 目的:观察柯萨奇病毒VP1基因靶向核酸疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1、重组腺病毒rAd/C3d3-sVP1和亚单位疫苗VP1蛋白的免疫效果。方法:雄性BALB/c小鼠随机分为4组,每组18只,分别肌肉注射PBS、pcDNA3/C3d3-sVP1、rAd/C3d3-sVP1和VP1蛋白,除重组腺病毒rAd/C3d3-sVP1组免疫2次,间隔2周外,其余3组均免疫3次,间隔3周。质粒每次每只接种100μg/100μl,腺病毒每次每只接种1.2×107pfu/100μl,蛋白每次每只接种50μg。分别用ELISA法和微量中和试验法检测血清CVB3 VP1特异性IgG抗体和中和抗体;CCK-8法检测脾淋巴细胞特异性CTL杀伤活性;以致死量的CVB3病毒液感染已免疫小鼠,检测小鼠血中病毒滴度,观察存活情况以评价各种疫苗的免疫保护作用。结果:各实验组小鼠的特异性IgG抗体和中和抗体滴度随免疫次数增加而提高,末次免疫后,VP1蛋白组的特异性IgG抗体和中和抗体滴度均明显高于pcDNA3/C3d3-sVP1组和rAd/C3d3-sVP1组(P<0.05),但rAd/C3d3-sVP1组CTL杀伤活性高于pcDNA3/C3d3-sVP1组和VP1蛋白组;经致死量CVB3感染后,VP1蛋白组血中病毒滴度低于其他实验组,而生存率明显高于其他各组。结论:VP1蛋白疫苗诱导小鼠产生较强的特异性免疫应答,提高了小鼠的生存率,免疫效果优于靶向基因疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1和rAd/C3d3-sVP1。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒B3 靶向基因疫苗 单位疫苗
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铜绿假单胞菌oprD基因DNA疫苗和重组亚单位疫苗的免疫效果研究 被引量:4
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作者 宫强 翟文汉 +1 位作者 李雅静 田佳雨 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期868-874,共7页
为探究铜绿假单胞菌oprD基因DNA疫苗和重组亚单位疫苗的免疫效果,本研究经PCR扩增铜绿假单胞菌oprD基因,将其克隆于真核表达载体pcaggs-HA中,构建重组质粒pOPRD。同时将oprD基因克隆于原核表达载体pET32a中构建重组质粒,随后将该重组质... 为探究铜绿假单胞菌oprD基因DNA疫苗和重组亚单位疫苗的免疫效果,本研究经PCR扩增铜绿假单胞菌oprD基因,将其克隆于真核表达载体pcaggs-HA中,构建重组质粒pOPRD。同时将oprD基因克隆于原核表达载体pET32a中构建重组质粒,随后将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行蛋白表达并纯化后制备该基因的重组亚单位疫苗。分别以pOPRD质粒和重组亚单位疫苗免疫BALB/c小鼠,同时设置pOPRD初免-重组亚单位疫苗加强免疫组、灭活疫苗(本研究室制备)免疫组、铜绿假单胞菌外膜蛋白(本研究室制备)免疫组以及pcaggs-HA空载体对照组和PBS对照组。免疫后采用间接ELISA测定小鼠血清抗体水平,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖水平,双抗夹心ELISA测定脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-4的水平。结果显示各疫苗均可诱导免疫小鼠产生较高水平的血清抗体,初免-加强免疫组小鼠脾细胞的增殖指数(SI)值及小鼠脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-4含量显著高于DNA疫苗组和重组亚单位疫苗组(P<0.05)。三免两周后以铜绿假单胞菌强毒株CAV0792对各组小鼠进行攻毒试验,测定攻毒后各组小鼠的保护率,结果显示DNA疫苗组、重组亚单位疫苗组、初免-加强免疫组、外膜蛋白疫苗组和灭活疫苗组的保护率分别为53.3%、60%、73.3%、80%和93.3%。本研究首次证实以铜绿假单胞菌oprD基因制备的DNA疫苗和重组亚单位疫苗均可诱导小鼠产生免疫应答,并为其提供对铜绿假单胞菌感染的免疫保护,且两者以初免-加强免疫的方式诱导的免疫应答水平更高、保护效果更好。本研究为铜绿假单胞菌DNA疫苗和重组亚单位疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 oprD基因 DNA疫苗 重组单位疫苗 初免-加强免疫
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