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题名人Ⅰ型基质金属蛋白酶基因真核表达重组质粒的构建
被引量：4
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作者
彭慧
汪谦
黄洁夫
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机构
中山医科大学附属第一医院肝胆外科
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出处
《中山医科大学学报》
CSCD
北大核心
2001年第6期433-435,453,共4页
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基金
教育部高校博士学科点科研基金资助项目 ( 1996 0 5 6 90 4)
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文摘
【目的】构建人Ⅰ型基质金属蛋白酶基因 (MMP1)真核表达重组质粒 ,并进行序列分析。【方法】用逆转录聚合酶链反应扩增人Ⅰ型基质金属胶原酶cDNA ,获得目的基因片段 (140 7bp)连接至 pcDNA3载体 ,并转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆并鉴定 ,并对片断全长进行DNA序列测定。【结果】所克隆人Ⅰ型基质金属胶原酶cDNA ,含全长MMP1编码区 ,与GeneBank公布序列比较 ,仅 1318位的胞苷酸C突变为腺苷酸A。并成功构建了含有MMP1的真核表达质粒 pcDNA3 MMP1。【结论】以逆转录聚合酶链反应方法成功构建了人Ⅰ型基质金属胶原酶cDNA克隆 ,并获得该基因真核表达质粒pcDNA3 MMP1,从而为下一步抗肝纤维化基因治疗研究提供物质基础。
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关键词
人I型基质金属胶原酶
DNA
克隆
质粒
基因寡核表达
肝纤维化
基因疗法
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Keywords
MMP1
DNA, complementary
clones, molecular
plasmid
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分类号
R657.31
[医药卫生—外科学]
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