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蓝舌病病毒感染绵羊胚胎睾丸细胞转录组测序数据的基因集富集分析及验证
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作者 鲁丹枫 李占鸿 +2 位作者 张振兴 朱沛 李卓然 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第9期4319-4333,共15页
【目的】从促炎细胞因子和细胞凋亡涉及的生物过程和信号通路角度,探讨在蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)感染进程中将促炎细胞因子-炎症反应-凋亡三者串联起来的关键宿主细胞因子或蛋白,以期获得BTV致病机制相关宿主因子或蛋白线索... 【目的】从促炎细胞因子和细胞凋亡涉及的生物过程和信号通路角度,探讨在蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)感染进程中将促炎细胞因子-炎症反应-凋亡三者串联起来的关键宿主细胞因子或蛋白,以期获得BTV致病机制相关宿主因子或蛋白线索。【方法】对BTV-1血清型毒株Y863感染的绵羊胚胎睾丸细胞(OA3.Ts)总RNA进行转录组测序(RNA-Seq);利用R package edgeR(v 3.14.0)包统计差异表达基因,对差异表达基因进行基因集富集分析(GSEA),获得其在基因集C2:curated gene sets下的KEGG基因子集,基因集C5:GO下的生物过程、细胞组分和分子功能基因子集,以及基因集Hallmark下的基因富集图谱;利用实时荧光定量RT-PCR、ELISA和Western blotting对关键生物过程或通路的10个领头亚集(LS)基因的表达进行验证;并通过Annexin V-FITC/碘化丙锭(PI)染色法检测被感染细胞的凋亡水平。【结果】GSEA结果表明,差异表达基因分别显著富集在基因集C2:curated gene sets的KEGG基因子集下的凋亡通路,基因集C5:GO的生物过程基因子集下的对肿瘤坏死因子(TNF)的反应、对白细胞介素1(IL-1)的反应、细胞对IL-1的反应、对γ-干扰素(IFN-γ)的反应、细胞对IFN-γ的反应和IL-12产生等条目,以及基因集Hallmark下的炎症反应通路。实时荧光定量RT-PCR结果显示,GSEA结果中关键促炎细胞因子和蛋白中的IL-1α、IL-6、C-X-C趋化因子8(CXCL8)、半胱天冬酶7(CASP7)、CASP8、TNF受体超家族成员5(CD40)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员3(NLRP3)的转录水平显著上调,log2差异倍数(FoldChange,FC)值分别为0.34、1.03、7.42、3.98、3.61、1.00和1.74。ELISA和Western blotting结果显示,与对照组相比,感染组CXCL8、CD40、CASP7和CASP8表达水平显著或极显著上升(P<0.05;P<0.01)。Annexin V-FITC/PI染色结果表明,凋亡的OA3.Ts细胞由对照组的1.89%上升至感染组的12.78%。【结论】本研究分析预测高表达的CD40和CXCL8是串联促炎细胞因子-炎症反应-凋亡三者的关键因素,对BTV感染导致的多组织出血、水肿、弥散性血管内凝血和组织坏死等临床症状及雄性绵羊睾丸退化和无精子症具有重要潜在贡献。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒(BTV) 转录组测序 基因富集分析 CD40 CXCL8
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基于GEO数据库对多原发肺癌差异表达基因的生物信息学分析
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作者 刘博 孙超 +1 位作者 王旭 马克威 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期437-446,共10页
目的:采用生物信息学方法筛选多原发肺癌(MPLCs)的差异表达基因(DEGs),分析其生物学功能以及对肺腺癌预后的影响。方法:在高通量基因表达综合数据库(GEO)下载GSE200972单细胞转录组测序数据。采用R软件进行数据初步处理后,采用Seurat R... 目的:采用生物信息学方法筛选多原发肺癌(MPLCs)的差异表达基因(DEGs),分析其生物学功能以及对肺腺癌预后的影响。方法:在高通量基因表达综合数据库(GEO)下载GSE200972单细胞转录组测序数据。采用R软件进行数据初步处理后,采用Seurat R包进行数据处理与细胞聚类及注释并得到DEGs。采用clusterProfiler R包进行基因集富集分析(GSEA),采用STRING数据库和Cytoscape软件建立蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络并筛选关键基因(Hub基因),采用基因表达水平值的交互式分析(GEPIA)检测基因在肺腺癌数据库中的表达水平,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测基因在A549细胞原位移植瘤小鼠肿瘤与正常小鼠肺组织中的表达情况,采用Kaplan Meier-Plotter软件进行预后分析。结果:细胞聚类分析共识别出上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞、T细胞和自然杀伤(NK)细胞、B细胞、髓系细胞和肥大细胞共7种细胞类型,以及肿瘤上皮细胞与正常上皮细胞14 605个DEGs。GSEA分析,得到4个在肿瘤样本中发生激活的通路[原癌基因蛋白(MYC)通路、P53通路、氧化磷酸化通路和糖酵解通路]以及1个抑制通路[肿瘤坏死因子α/核因子κB (TNF-α/NF-κB)通路]。筛选PPI网络中的CXC趋化因子8 (CXCL8)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、趋化因子受体4 (CXCR4)、鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)、CXC趋化因子1 (CXCL1)、趋化因子配体2 (CCL2)、黏蛋白1 (MUC1)和分泌型磷蛋白1 (SPP1)为Hub基因。GEPIA数据库分析与动物实验,与肺正常组织比较,在非小细胞肺癌组织中SPP1 mRNA表达水平升高(P<0.01)。Kaplan-Meier生存曲线分析,SPP1高表达患者总生存期(OS)短于低表达患者(P<0.01)。结论:MPLCs中不仅有原癌基因相关通路的激活,也有抑癌通路起拮抗肿瘤进展作用,同时非小细胞肺癌中SPP1基因表达水平升高提示有相对较差的预后。 展开更多
关键词 多原发肺癌 单细胞转录组测序 生物信息学 基因富集分析 生存分析
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金耳T-1的生物学特性及全基因组测序分析
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作者 田爽 毕宇 +4 位作者 郭燕 吴皓琼 叶阳 刘佳宁 朱加楠 《湖北农业科学》 2025年第8期152-159,共8页
以金耳(Naematelia aurantialba)T-1孢子为试验材料,对金耳的生物学特性进行探究并对其进行全基因组测序及分析。结果表明,T-1的最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为蛋白胨,最佳无机盐为氯化钾,最适宜pH为7,最佳接种量为10^(8)个细胞/mL;基因组... 以金耳(Naematelia aurantialba)T-1孢子为试验材料,对金耳的生物学特性进行探究并对其进行全基因组测序及分析。结果表明,T-1的最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为蛋白胨,最佳无机盐为氯化钾,最适宜pH为7,最佳接种量为10^(8)个细胞/mL;基因组碱基测序质量为35~40,测序质量较好;碱基的AT、GC含量较为均一,测序结果正常;利用K-mer频率分析出T-1基因组大小为26 612 159 bp;对测序数据拼接后显示N50较高,GC含量为56.45%;使用Circos软件对基因组进行展示表明,T-1基因组全长为18180 385 bp,GC含量为56.46%,基因组共被分为10个contig;系统发育树显示T-1与金耳菌株聚类关系最近;GO功能分类显示被注释到3大类别中,其中参与生物学过程的基因最多;与KEGG数据库比对后,共4 096个基因被注释到五大类代谢途径,其中参与代谢途径的基因最多。 展开更多
关键词 金耳(Naematelia aurantialba) 生物学特性 基因组测序 功能预测 通路富集分析
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基于基因集富集分析阐释补肺益肾方抑制巨噬细胞炎症反应机制
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作者 关庆洲 赵鹏 +4 位作者 田燕歌 李康沉 彭岩 郭弘妍 李建生 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第6期1490-1496,共7页
目的从通路水平探究慢性阻塞性肺疾病有效方药补肺益肾方的干预机制。方法采用LPS诱导巨噬细胞建立炎症反应模型。基于基因集富集分析(Gene set enrichment analysis,GSEA)方法,筛选巨噬细胞炎症反应相关通路,通过富集评分(Normalized e... 目的从通路水平探究慢性阻塞性肺疾病有效方药补肺益肾方的干预机制。方法采用LPS诱导巨噬细胞建立炎症反应模型。基于基因集富集分析(Gene set enrichment analysis,GSEA)方法,筛选巨噬细胞炎症反应相关通路,通过富集评分(Normalized enrichment score,NES)筛选药物干预后发生逆转的通路,揭示补肺益肾方及其配伍的干预机制。结果补肺益肾方所含中药的NES为-1377.23,其中补肾配伍的为-485.07、活血配伍的为-351.86、化痰配伍的为-303.71、益气配伍的为-236.59;补肺益肾方显著逆转的通路为213条,其中活血配伍的为184条、补肾配伍的为147条、化痰配伍的为134条、益气配伍的为133条,逆转率分别为75.41%、60.25%、54.92%、54.51%。TGF-βproduction等90条通路在4个配伍中均被显著逆转。Positive regulation of cytokine production involved in inflammatory response等为配伍特异性逆转通路。结论补肺益肾方各配伍组逆转炎症信号通路的强度依次为补肾、活血、化痰、益气配伍,逆转通路数量依次为活血、补肾、化痰、益气。补肺益肾方可通过调控各配伍共性及特异性逆转通路干预炎症反应。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 补肺益肾方 巨噬细胞 炎症反应 基因富集分析
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基于转录组分析CSFV感染猪睾丸支持细胞对屏障功能相关基因的影响
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作者 马尧丹 俞晖 +4 位作者 陈海恩 杨阳开心 葛书君 吴江 康恺 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第5期22-32,共11页
为探究猪瘟病毒(CSFV)感染对猪睾丸支持细胞(ST)mRNA表达谱的影响,本试验以感染CSFV 24和48 h的ST细胞和未感染ST细胞为模型,通过蛋白免疫印迹试验(WB)和间接免疫荧光(IIF)染色检测CSFV E2蛋白的表达;构建4个cDNA文库进行转录组测序,对... 为探究猪瘟病毒(CSFV)感染对猪睾丸支持细胞(ST)mRNA表达谱的影响,本试验以感染CSFV 24和48 h的ST细胞和未感染ST细胞为模型,通过蛋白免疫印迹试验(WB)和间接免疫荧光(IIF)染色检测CSFV E2蛋白的表达;构建4个cDNA文库进行转录组测序,对差异表达基因(DEGs)进行基因本体论(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书数据库(KEGG)富集分析并筛选血睾屏障相关DEGs,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)、WB和IIF对DEGs进行验证。结果显示,CSFV感染24和48 h后,ST细胞均表达了E2蛋白;与Control 24 h相比,CSFV 24 h的ST细胞共鉴定出86个显著差异DEGs(P <0.05);与Control 48 h相比,CSFV 48 h的ST细胞共鉴定出1 481个显著差异DEGs(P <0.05)。DEGs极显著富集在27个GO功能条目上,主要包括生物学过程、细胞组分和分子功能(P <0.01);极显著富集的KEGG信号通路主要包括肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、晚期糖基化终产物受体(AGE-RAGE)信号通路、白细胞介素-17(IL-17)信号通路和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路等(P <0.01)。DEGs的qPCR验证结果显示,与Control 24 h相比,CSFV 24 h的CLDN11、H2AFX和CDH2表达量极其或极显著上调(P<0.001或P <0.01),TJP1、OCLN和GJA1表达量显著下调(P <0.05);与Control48 h相比,CSFV 48 h的FASLG、TGFB1、IL-6和H2AFX表达量极其或极显著上调(P <0.001或P <0.01),TJP1、OCLN、GJA1、CLDN11和CDH2表达量极显著下调(P <0.01)。差异表达蛋白WB验证结果显示,与Control 24 h相比,CSFV 24 h的TJP1、CLDN11和GJA1蛋白表达量极其或极显著下调(P <0.001或P <0.01),CLDN11蛋白表达量极其显著上调(P <0.001);与Control 48 h相比,CSFV 48 h的TJP1、CLDN11、OCLN和GJA1蛋白表达量极其或极显著下调(P <0.001或P <0.01)。IIF结果显示,与Control 48 h相比,CSFV 48 h的TJP1蛋白相对荧光面积极显著下调(P <0.01),CLDN11、OCLN和GJA1蛋白相对荧光面积显著下调(P <0.05)。以上验证结果与转录组测序结果基本一致。结果表明,CSFV感染24和48 h均会影响ST细胞屏障功能相关基因的表达,本试验为进一步探究CSFV对ST细胞屏障的影响机制提供了数据支持。 展开更多
关键词 猪瘟病毒(CSFV) 猪睾丸支持细胞 mRNA差异表达 基因本体论(GO)功能注释 京都基因基因组百科全书数据库(KEGG)富集分析
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基于GEO数据库的慢性自发性荨麻疹基因集富集及免疫细胞浸润分析
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作者 韩露 周扬 +3 位作者 万月 管宁 方如男 李建红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1405-1410,I0001,共7页
目的:基于基因表达数据库(GEO)对慢性自发性荨麻疹(CSU)表达谱芯片数据筛选差异表达基因并进行基因集富集分析(GSEA)和免疫细胞浸润分析,深入了解CSU的发病机制。方法:从GEO数据库中获取GSE72541芯片数据,利用R软件获取差异表达基因并... 目的:基于基因表达数据库(GEO)对慢性自发性荨麻疹(CSU)表达谱芯片数据筛选差异表达基因并进行基因集富集分析(GSEA)和免疫细胞浸润分析,深入了解CSU的发病机制。方法:从GEO数据库中获取GSE72541芯片数据,利用R软件获取差异表达基因并构建蛋白质相互作用(PPI)网络;利用GSEA软件进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析;利用ssGSEA方法对表达谱进行免疫细胞浸润分析。结果:与血小板活化及其功能密切相关的基因在CSU血清中上调,与Th1细胞趋化相关的基因在CSU血清中下调;与凝血级联反应、血管通透性的调节、免疫及炎症反应以及神经精神的调控等方面相关的生物过程及信号通路在CSU组上调;免疫细胞浸润分析显示活化的B细胞、未成熟B细胞、滤泡辅助性T细胞以及Th2细胞在CSU组显著下调。结论:血小板活化、凝血级联反应与Th1/Th2免疫细胞失衡在CSU的发病中有重要意义。 展开更多
关键词 慢性自发性荨麻疹 基因富集分析 免疫细胞浸润 凝血级联反应 自身免疫 TH1/TH2细胞
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基因富集及meta分析筛选非小细胞肺癌发生发展关键基因的研究 被引量:3
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作者 何文武 冼磊 +2 位作者 王永勇 胡艳玲 陈铭伍 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2012年第7期416-421,共6页
背景与目的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,其发病遗传机制仍不清楚。本研究旨在筛选影响NSCLC发生发展的关键基因和通路,为NSCLC发病遗传机制及靶向治疗的研究奠定科学基础。方法运用基因... 背景与目的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,其发病遗传机制仍不清楚。本研究旨在筛选影响NSCLC发生发展的关键基因和通路,为NSCLC发病遗传机制及靶向治疗的研究奠定科学基础。方法运用基因组富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)以及对单套数据集单个基因元分析(meta-analysis,meta)的方法,筛选出在转录水平上影响NSCLC发生发展的关键通路和基因。结果通过GSEA和meta两种分析方法得出的通路中,重叠性较高的主要为粘着斑通路和细胞骨架肌动蛋白调控通路。在粘着斑通路中31个基因具有统计学意义(P<0.05);细胞骨架肌动蛋白调控通路中32个基因具有统计学意义(P<0.05)。结论粘着斑通路和细胞骨架肌动蛋白调控通路可能与NSCLC的发生发展有重要的联系,后续本研究小组将对这两条通路中的具有统计学意义的基因进行生物功能学上的验证。 展开更多
关键词 肺肿瘤 基因富集 META分析 通路 关键基因
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基于计算机文本挖掘的白内障氧化应激相关基因功能富集及药物治疗分析 被引量:3
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作者 姜凌峰 石栋 +3 位作者 陆博 韩笑 周文凯 阎启昌 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第1期36-40,共5页
目的利用计算机工具和已知的数据库进行挖掘和分析进而确定与白内障和抗氧化应激相关的基因集及信号通路,并进行白内障可能的有效治疗药物的预测和探索。方法利用文本挖掘工具pubmed2ensembl对白内障和抗氧化应激均相关的基因进行初步筛... 目的利用计算机工具和已知的数据库进行挖掘和分析进而确定与白内障和抗氧化应激相关的基因集及信号通路,并进行白内障可能的有效治疗药物的预测和探索。方法利用文本挖掘工具pubmed2ensembl对白内障和抗氧化应激均相关的基因进行初步筛选,得到的基因集利用GeneC odis工具进行基因功能的富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析,富集的结果则应用STRING工具进行进一步蛋白质-蛋白质相互作用分析,选取相互作用紧密的基因,最后使用DGIdb工具得到基因-药物相互作用的结果,然后对药物进行筛选,确定可能有效的白内障治疗药物。结果通过文本挖掘得到103个与白内障和抗氧化应激均相关的基因集,通过对这些基因的生物学过程的功能富集分析,筛选出22个基因,KEGG工具的进一步筛选确定了11个基因,通过蛋白质-蛋白质相互作用分析得到9个紧密联系的基因,与之对应的基因-药物相互作用分析筛选出了31种药物。结论利用文本挖掘和基因功能富集等生物信息学工具可以进一步探索白内障的发病机制,并且能够很方便地预测可能有效的治疗药物,为白内障的临床治疗提供了新的线索。 展开更多
关键词 文本挖掘 白内障 氧化应激 基因富集分析
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胃癌顺铂抵抗相关免疫标记基因的富集分析 被引量:2
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作者 汪圣毅 程彦 +4 位作者 李旭升 闫亚飞 张尚鑫 闫强 李永翔 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第2期200-204,共5页
目的采用基因集富集分析(GSEA)方法寻找胃癌抵抗顺铂的免疫标记基因(ISGs)。方法用GEO数据库的GSE94714数据集,GEO2R分析差异基因,观察条件筛选对基因数的作用,GSEA纳入耐药、未耐药组胃癌细胞的全部差异表达基因,与分子标签数据库比较... 目的采用基因集富集分析(GSEA)方法寻找胃癌抵抗顺铂的免疫标记基因(ISGs)。方法用GEO数据库的GSE94714数据集,GEO2R分析差异基因,观察条件筛选对基因数的作用,GSEA纳入耐药、未耐药组胃癌细胞的全部差异表达基因,与分子标签数据库比较,获取ISGs,交集筛选,Kaplan Meier Plotter分析交集基因对胃癌预后的影响。结果差异表达基因共34183个,其中上调12452个、下调17381个,筛选差异倍数的增加使排除基因数增加。GSEA富集到标准化富集评分(NES)排序前6的条目(P<0.01),其中的交集基因包括线粒体核糖体蛋白L12、富含脯氨酸蛋白13、毛状蛋白样F-肌动蛋白结合蛋白1、聚(RC)结合蛋白1、艾杜糖2-硫酸酯酶、LIM结构域2、富含嘌呤元素结合蛋白A、小视觉叶同源物、CCR 4-非转录复合物亚单位3、转化生长因子β1、二酰甘油激酶ζ、接头蛋白2,12个基因与胃癌的总生存时间有关,均具有统计学意义(P<0.05)。结论GSEA方法可有效获取胃癌顺铂抵抗的ISGs,新发现的基因作为潜在靶点,可促进胃癌化疗抵抗机制的研究。 展开更多
关键词 胃癌 化疗抵抗 基因富集分析 基因表达数据库 免疫标记基因 预后
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基因集富集分析探讨HER2基因对胃癌代谢的影响 被引量:5
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作者 刘虎 吴思浛 +3 位作者 包楚阳 李文娟 周守兵 金伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第9期1339-1342,1349,共5页
目的运用基因集富集分析(GSEA)探索人表皮生长因子受体2(HER2)基因表达状态对胃癌代谢通路影响情况。方法下载癌症基因组图谱(TCGA)、基因表达综合数据库(GEO)和欧洲生物信息研究所(ArrayExpress)数据库的胃癌转录表达数据库,根据Her2... 目的运用基因集富集分析(GSEA)探索人表皮生长因子受体2(HER2)基因表达状态对胃癌代谢通路影响情况。方法下载癌症基因组图谱(TCGA)、基因表达综合数据库(GEO)和欧洲生物信息研究所(ArrayExpress)数据库的胃癌转录表达数据库,根据Her2拷贝数或者表达水平选取高低表达组,应用GSEA软件进行富集分析,取错误发现率q值(FDR q val)<25%和/或名义P值(nom P val)<0.01的代谢通路作为有意义的代谢基因集,结果绘制热图寻找共性。结果在癌症基因组图谱胃腺癌集(TCGA STAD)、GEO数据集(GSE66229)等10个数据库中,Her2的高低表达对对过氧物酶体、N-聚糖生物合成和嘧啶代谢通路基因集有影响(FDR q val<25%且nom P val<0.01),糖基磷脂酰肌醇、甘油磷脂、鞘脂类代谢差异有统计学意义(nom P val<0.01)。结论多个数据库GSEA分析结果提示癌基因Her2的状态与多个代谢通路基因集有相关性。 展开更多
关键词 胃癌 癌症基因组图谱 基因富集分析 人类表皮生长因子受体2 京都基因基因组百科全书 代谢
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家族性肾阳虚的基因功能富集分析 被引量:1
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作者 刘明 丁维俊 +3 位作者 蔡欣 张天娥 李炜弘 王米渠 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期747-752,共6页
在临床调查中筛选出一个典型肾阳虚证家系,选取典型肾阳虚证患者3例及家系内正常人3例进行表达谱芯片试验.芯片分析结果显示,肾阳虚证者表达上调基因106条,下调基因16条.通过基因功能分类及深入的基因功能富集分析发现,肾阳虚证与GnRH... 在临床调查中筛选出一个典型肾阳虚证家系,选取典型肾阳虚证患者3例及家系内正常人3例进行表达谱芯片试验.芯片分析结果显示,肾阳虚证者表达上调基因106条,下调基因16条.通过基因功能分类及深入的基因功能富集分析发现,肾阳虚证与GnRH信号通路及氧化磷酸化密切相关(P≤0.05),从而为肾阳虚证本质的研究提供了新的思路,但具体的机制有待深入研究. 展开更多
关键词 肾阳虚证 基因功能富集分析 家系 氧化磷酸化 GnRH信号通路
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布鲁氏菌介导的mmu-miR-671-5p的靶基因预测与功能富集性分析 被引量:1
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作者 赵宇 罗艺晨 +8 位作者 顾国靖 李博文 李文杰 周志雄 帅学宏 伍莉 陈吉轩 黄庆洲 焦寒伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第10期2843-2850,共8页
为进行布鲁氏菌介导的mmu-miR-671-5p的靶基因预测,本试验利用布鲁氏菌(Brucella)感染RAW264.7细胞后,分别运用miRanda和TargetScan软件进行差异表达的mmu-miR-671-5p靶基因的预测,预测的靶基因分别有11 953和9 252个,将预测结果取交集... 为进行布鲁氏菌介导的mmu-miR-671-5p的靶基因预测,本试验利用布鲁氏菌(Brucella)感染RAW264.7细胞后,分别运用miRanda和TargetScan软件进行差异表达的mmu-miR-671-5p靶基因的预测,预测的靶基因分别有11 953和9 252个,将预测结果取交集进行韦恩(Venn)分析,重叠部分的靶基因有3 681个;利用GO与KEGG进行功能富集性分析,再利用PicTar软件进一步对mmu-miR-671-5p的靶基因进行预测,将预测结果与Venn分析结果进一步取交集,结果显示,mmu-miR-671-5p的预测靶基因有7个;实时荧光定量PCR分别验证7个预测靶基因的相对表达量发现,Tnfrsf1b与Tnip 1基因相对表达量极显著降低(P<0.01);在RAW264.7细胞中转染mmu-miR-671-5p inhibitors,分别验证7个预测靶基因的相对表达量发现,Tnfrsf1b与Tnip 1基因的相对表达量极显著升高(P<0.01);对mmu-miR-671-5p与Tnfrsf1b和Tnip1的3′非翻译区(3′UTR)结合靶位点分别进行预测,结果初步表明,mmu-miR-671-5p的靶基因为Tnfrsf1b与Tnip 1,其预测结合靶位点均只有1个,分别位于Tnfrsf1b和Tnip1 3′UTR全长位置的91和305 bp。本研究结果为进一步揭示mmu-miR-671-5p在布鲁氏菌感染RAW264.7细胞过程中的功能提供科学依据。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 RAW264.7细胞 mmu-miR-671-5p 基因预测 功能富集分析
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芥菜SRO基因家族全基因组鉴定与表达分析 被引量:1
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作者 杨巍 赵丽芬 +7 位作者 唐兵 周麟笔 杨娟 莫传园 张宝会 李飞 阮松林 邓英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期129-141,共13页
【目的】SRO基因家族是植物特有的一类转录因子,在植物生长发育与胁迫响应中具有重要作用,研究芥菜SRO基因家族,为解析芥菜SRO基因功能与遗传改良提供理论依据。【方法】利用生物信息学鉴定油用芥菜与菜用芥菜基因组中的SRO基因家族成员... 【目的】SRO基因家族是植物特有的一类转录因子,在植物生长发育与胁迫响应中具有重要作用,研究芥菜SRO基因家族,为解析芥菜SRO基因功能与遗传改良提供理论依据。【方法】利用生物信息学鉴定油用芥菜与菜用芥菜基因组中的SRO基因家族成员,运用TBtools、MEGA、Cytoscape、NCBI、STRING、EggNOG等软件与数据库进行理化性质、序列特征、进化关系、调控网络等分析以及RT-qPCR分析盐胁迫下的表达模式。【结果】两种类型芥菜SRO基因家族成员数量存在差异,并分属A与B两大类,其中A类SRO蛋白含有WWE、PARP及RST结构域,而B类蛋白则缺少WWE结构域,SRO基因启动子区域含有多种非生物胁迫响应与激素响应的顺式作用元件,microRNA-BjuSRO-靶基因构建复杂调控网络,参与了细胞凋亡、根系形态建成、免疫应答、异源刺激的细胞反应、对活性氧的反应等生物学过程,油用芥菜BjuOSRO基因与甘蓝SRO基因具有较近的进化关系,RT-qPCR结果显示,在盐胁迫下BjuVA1a、BjuVA1e、BjuVA2a、BjuVA3a、BjuVB1b、BjuVA2a显著上调表达。【结论】芥菜SRO基因家族具有功能多样性,BjuVA1a、BjuVA1e、BjuVA2a、BjuVA3a、BjuVB1b、BjuVA2a与盐胁迫响应密切相关,可作为培育耐盐型芥菜新品种的候选基因。 展开更多
关键词 芥菜 SRO转录因子 生物信息学 MICRORNA调控 蛋白互作 GO富集分析 进化分析 基因表达分析
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钙诱导下白菜的转录特征及钙富集关键基因表达研究 被引量:3
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作者 邵晓庆 卢一铭 徐卫红 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期47-58,共12页
白菜是喜钙作物,对钙的需求量较大且易在体内富集.目前白菜钙富集的代谢途径及分子机理尚未被完全解析.本研究采用盆栽试验结合室内分析,研究了不同钙水平(0,0.2,0.4,0.6和0.8 g/kg)对‘黑叶五月慢’和‘上海六月慢’两个白菜品种生长... 白菜是喜钙作物,对钙的需求量较大且易在体内富集.目前白菜钙富集的代谢途径及分子机理尚未被完全解析.本研究采用盆栽试验结合室内分析,研究了不同钙水平(0,0.2,0.4,0.6和0.8 g/kg)对‘黑叶五月慢’和‘上海六月慢’两个白菜品种生长及钙质量分数的影响,运用转录组学和基因组学初步探讨了白菜钙富集代谢途径和生物学信息,以及钙富集关键基因家族的表达特征.结果显示,钙诱导下,‘黑叶五月慢’和‘上海六月慢’地上部钙质量分数较对照分别增加了14.0%~21.6%和6.6%~41.3%.两个白菜品种的地上部钙质量分数大小为‘黑叶五月慢’>‘上海六月慢’.转录组分析发现,钙处理下两个白菜品种的差异表达基因主要富集在细胞组分、转运和分解代谢通路、信号转导通路、氨基酸的生物合成等通路上.随着供钙水平的增加,两个白菜品种的BcECA和BcCAS家族基因表达量具有上调现象,BcECA和BcCAS家族基因表达量与钙质量分数之间呈正相关关系. 展开更多
关键词 钙诱导 白菜 富集 基因表达 转录组分析
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WGCNA分析筛选膝骨关节炎自噬相关基因 被引量:3
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作者 赵连兴 杜欣瑞 +1 位作者 刘凯 王建忠 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期517-524,共8页
目的利用生物信息学分析方法筛选出膝骨关节炎中的差异性自噬相关基因,并获取其中特征性基因的miRNA及转录因子调控网络,进而阐释自噬在膝骨关节炎发病机制中的作用。方法首先,通过GEO数据库下载并整合GSE55235和GSE169077的基因表达谱... 目的利用生物信息学分析方法筛选出膝骨关节炎中的差异性自噬相关基因,并获取其中特征性基因的miRNA及转录因子调控网络,进而阐释自噬在膝骨关节炎发病机制中的作用。方法首先,通过GEO数据库下载并整合GSE55235和GSE169077的基因表达谱矩阵,随后使用R软件对整合后的基因表达矩阵分别进行差异分析、WGCNA分析。然后,将两种分析结果与从genecards数据库中获取的自噬相关基因取交集,得到差异性自噬相关基因,并对差异性自噬相关基因进行GO、KEGG、GSEA富集分析。最后,利用cytoscape中的CytoHubba插件筛选出特征性基因并在数据集GSE98918中对其进行验证。结果经筛选后共得到了111个差异性自噬相关基因,经验证集验证最终得到7个可靠的特征性基因,分别是COL1A1、MMP9、CCL5、CX3CR1、ITGB2、PTPRC、CSF1R,并获得了特征基因的miRNA的调控网络和转录因子调控网络。结论自噬在膝骨关节炎发病机制中具有重要作用,7个特征性自噬相关基因包括COL1A1、MMP9、CCL5、CX3CR1、ITGB2、PTPRC、CSF1R可作为潜在的生物标志物为诊断、治疗该疾病提供新思路。 展开更多
关键词 自噬相关基因 膝骨关节炎 生物信息学 富集分析 生物标志物
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姜黄素治疗骨关节炎过程中潜在的铁死亡关键基因的分析与验证 被引量:1
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作者 李培金 韩倩 +2 位作者 王威 唐园 李照文 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第9期2455-2465,共11页
目的通过生物信息学手段,基于铁死亡(Ferroptosis)基因探究姜黄素治疗骨关节炎(Osteoarthritic,OA)的分子机制,为骨关节炎的诊疗和新药开发提供理论基础。方法通过基因综合表达数据(Gene Expression Omnibus,GEO)检索,下载姜黄素治疗骨... 目的通过生物信息学手段,基于铁死亡(Ferroptosis)基因探究姜黄素治疗骨关节炎(Osteoarthritic,OA)的分子机制,为骨关节炎的诊疗和新药开发提供理论基础。方法通过基因综合表达数据(Gene Expression Omnibus,GEO)检索,下载姜黄素治疗骨关节炎的高通量测序数据;通过主成分分析,考察姜黄素治疗前后基因表达主成分的变化;通过limma算法,考察姜黄素治疗前后转录组的变化;通过基因本体论富集算法,考察姜黄素治疗前后信号通路的改变;通过GeneMANIA在线工具,构建蛋白-蛋白相互作用网络并筛选枢纽基因;通过荧光定量PCR技术,体外验证姜黄素治疗对枢纽基因表达量的影响。结果姜黄素治疗前后,软骨细胞的转录组表达和信号通路活性发生显著改变(P<0.05);蛋白-蛋白相互作用网络显示,GCLC、HMOX1、FTL、FTH1和SLC7A11为铁死亡枢纽基因;亚铁离子荧光探针检测和细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)检测结果显示,与对照组相比,IL-1β显著诱导炎症并提高了软骨细胞中Fe^(2+)和ROS的累积,姜黄素治疗显著缓解了IL-1β诱导的炎症反应,并显著降低软骨细胞中Fe^(2+)和ROS的含量;荧光定量PCR和免疫印迹技术结果显示,姜黄素治疗显著改变了枢纽基因的表达水平(P<0.05)。结论姜黄素可能通过介导GCLC、SLC7A11基因的上调和HMOX1、FTL、FTH1基因的下调影响软骨细胞的铁死亡过程,从而对骨关节炎具有治疗作用。 展开更多
关键词 骨关节炎 铁死亡 基因表达谱 通路富集分析 生物信息学
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基于盆腔器官脱垂相关衰老基因的GEO数据库和LASSO回归算法的生物信息学分析
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作者 宁敏琦 何勇 +5 位作者 李秉枢 黄国涛 左晓虎 赵芷晗 韩武岳 洪莉 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期178-187,共10页
目的:通过生物信息学技术筛选与盆腔器官脱垂(POP)密切相关的衰老基因,并阐明关键基因潜在的临床意义和价值。方法:利用基因表达汇编(GEO)数据库以“pelvicorgan prolapse”为关键词检索下载数据集GSE53868和GSE151188获取POP相关基因。... 目的:通过生物信息学技术筛选与盆腔器官脱垂(POP)密切相关的衰老基因,并阐明关键基因潜在的临床意义和价值。方法:利用基因表达汇编(GEO)数据库以“pelvicorgan prolapse”为关键词检索下载数据集GSE53868和GSE151188获取POP相关基因。从Aging Atlas数据库、CellAge数据库和人类衰老基因组资源(HAGR)数据库获取衰老相关基因,2组基因取交集得到POP相关衰老的差异表达基因(DEGs)。采用R 4.2. 1软件进行基因富集分析(GSEA)。采用注释可视化和集成发现(DAVID)数据库对DEGs进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,采用Cytoscape 3.9. 1软件构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,用cytoHubba插件筛选排名前10位的核心基因(Hub基因)。采用R软件CIBERSORT反卷积法分析22种免疫细胞在POP组和对照组患者中的浸润情况。采用LASSO回归算法进一步筛选关键基因,分析关键基因与免疫细胞浸润的相关性和诊断效能。结果:通过Aging Atlas、CellAge和HAGR数据库得到724个衰老相关基因,与POP表达谱取交集,提取到含624个基因的POP相关衰老基因表达矩阵,差异分析后得到29个POP相关DEGs,其中表达上调基因2个,表达下调基因27个。GSEA显示,上调通路主要是糖尿病和细胞衰老等通路,下调通路包括阿尔茨海默病和缺氧诱导因子1(HIF-1)信号通路等。GO功能富集分析主要富集于细胞对脂多糖的反应、炎症反应和细胞增殖的负向调节等生物学过程。KEGG信号通路富集分析主要是白细胞介素17 (IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF)和核因子κB (NF-κB)信号传导途径。PPI网络分析得到白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素1B (IL-1B)、环氧合酶2 (PTGS2)和NF-κB抑制因子α (NFKBIA)等10个Hub基因。CIBERSORT反卷积法分析,中性粒细胞和活化的肥大细胞在POP组患者中浸润比例相对较大,且在相关性分析中活化的肥大细胞与大部分DEGs呈正相关关系(r>0.5),巨噬细胞与IL-1B呈明显正相关关系(r>0.6)。LASSO回归算法进一步筛选的10个关键基因中,Jun D原癌基因(JUND)、Snail同源物1 (SNAI1)、双调蛋白(AREG)、A型核纤层蛋白基因(LMNA)和超氧化物歧化酶2(SOD2)的诊断效能较高,受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)均大于0.750。结论:在衰老过程中,JUND、SNAI1、AREG、LMNA和SOD2基因可能通过炎症相关通路、转录调控、影响胶原蛋白分泌和代谢等多种途径参与POP病理生理过程,从而影响结缔组织支撑功能,促进POP的发生发展。 展开更多
关键词 盆腔器官脱垂 生物信息学 差异基因 富集分析
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基于生物信息学的银屑病基因集富集及免疫细胞浸润分析 被引量:3
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作者 周扬 韩露 +5 位作者 方如男 赵艳 郭杨 翟烨 李萍 李建红 《海南医学院学报》 CAS 2021年第21期1652-1658,共7页
目的:基于生物信息学对银屑病表达谱芯片数据进行基因集富集分析(GSEA)和免疫细胞浸润分析,以更深入了解银屑病的发病机制。方法:从GEO数据库中获取GSE6710芯片数据,利用GSEA软件进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富... 目的:基于生物信息学对银屑病表达谱芯片数据进行基因集富集分析(GSEA)和免疫细胞浸润分析,以更深入了解银屑病的发病机制。方法:从GEO数据库中获取GSE6710芯片数据,利用GSEA软件进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析;CIBERSOFT官网下载22种免疫细胞基因表达矩阵及R包,运用R软件获取免疫细胞浸润矩阵并绘制相关图形。结果:与细胞增殖、先天免疫相关的通路在银屑病皮损组高表达,一些癌症相关通路在银屑病皮损组高表达。免疫细胞浸润分析显示活化的记忆T细胞、滤泡辅助性T细胞、M0巨噬细胞、活化的树突状细胞在银屑病皮损组中上调,未活化的肥大细胞在银屑病皮损组下调。活化的树突状细胞与滤泡辅助性T细胞呈正相关,活化的肥大细胞与M0巨噬细胞呈正相关。未活化的肥大细胞和活化的记忆T细胞呈负相关,M1巨噬细胞与调节性T细胞呈负相关,M0巨噬细胞和未活化的肥大细胞呈负相关。结论:细胞增殖与先天免疫在银屑病的发病中具有重要意义;免疫细胞浸润分析与目前银屑病发病模型大致符合,巨噬细胞和肥大细胞在银屑病发病中也起着一定作用。 展开更多
关键词 银屑病 基因富集分析 免疫浸润 细胞增殖 先天免疫
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基于慢性阻塞性肺疾病潜在治疗靶点的孟德尔随机化和GEO数据库识别分析
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作者 蒋先伟 王明航 +2 位作者 李慧茹 董晓升 刘元元 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期1072-1083,共12页
目的:通过使用微阵列数据集和孟德尔随机化(MR)方法筛选慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者遗传、诊断及治疗的关键靶点,为COPD患者的临床诊疗提供依据。方法:通过基因表达综合数据库(GEO)获得4个COPD基因表达谱数据,采用R软件对数据进行整理... 目的:通过使用微阵列数据集和孟德尔随机化(MR)方法筛选慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者遗传、诊断及治疗的关键靶点,为COPD患者的临床诊疗提供依据。方法:通过基因表达综合数据库(GEO)获得4个COPD基因表达谱数据,采用R软件对数据进行整理和归一化处理,并筛选出差异表达基因(DEGs)。MR分析COPD与相关表达数量性状位点(eQTL)的因果关系,再与DEGs取交集来确定潜在关键靶点。采用基因集合富集分析(GSEA)、基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析探讨关键靶点的功能作用和途径,外部数据集对其表达进行验证。结果:共筛选出1 571个DEGs,其中表达上调基因820个,表达下调基因751个。MR分析最终筛选出286个COPD相关基因,通过与DEGs取交集得出3个上调基因,包括二酰甘油激酶γ(DGKG)、重肽神经丝蛋白(NEFH)和Fc受体样B(FCRLB);6个下调基因,包括金属还原酶4(STEAP4)、含普列克底物蛋白家族F成员2(PLEKHF2)、分化簇3D(CD3D)、转胶蛋白2(TAGLN2)、三基序蛋白22(TRIM22)和核糖体蛋白L9(RPL9)。生物学功能分析结果主要涉及铁输入细胞、氧化还原酶活性、原发性免疫缺陷症和辅助性T(Th) 1及Th2细胞分化等途径。MR分析结果证实了上述靶点与COPD之间的因果关系。外部验证集分析,与健康对照组比较,COPD样本组中FCRLB基因表达水平升高(P<0.01),CD3D和RPL9基因表达水平降低(P<0.05或P<0.01),与MR分析结果一致,证明了本研究的可靠性。结论:DGKG、NEFH、FCRLB、STEAP4、PLEKHF2、CD3D、TAGLN2、TRIM22和RPL9COPD可能是COPD患者疾病发生发展过程中的重要调控因子及临床诊疗靶点。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 孟德尔随机化 基因本体论功能富集分析 京都基因基因组百科全书信号通路富集分析 生物标志物 生物信息学
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基于共表达模式的钙化性主动脉瓣疾病基因调控网络构建方法研究
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作者 齐红霞 古海博 +2 位作者 王成凤 李慧 李颜娥 《中国循环杂志》 北大核心 2025年第5期486-493,共8页
目的:建立钙化性主动脉瓣疾病(CAVD)相关基因调控网络,揭示基因之间的相互作用对CAVD的影响。方法:本研究提出一种基于共表达模式的启发式基因调控网络构建方法,以阐明CAVD相关基因之间的相互作用。首先,采用差异表达基因方法筛选基因,... 目的:建立钙化性主动脉瓣疾病(CAVD)相关基因调控网络,揭示基因之间的相互作用对CAVD的影响。方法:本研究提出一种基于共表达模式的启发式基因调控网络构建方法,以阐明CAVD相关基因之间的相互作用。首先,采用差异表达基因方法筛选基因,并采用STRING软件对筛选的基因构建蛋白质相互作用网络,获取得分最高的网络及基因;同时,采用蒙特卡洛方法对基因的重要性进行排序,获取排名前1%的基因;取交集获得关键基因。采用生物学验证方法确定关键基因与CAVD相关。然后,用基于共表达关联的方法检测看似不相关但实际受第三个基因表达水平影响的具有潜在共表达模式的基因三联体,再通过桥基因将基因三联体拼接成基因调控网络。最后,通过富集分析和文献分析,对所建立的基因调控网络进行功能验证。结果:从18084个基因中建立了一个包含211个基因的CAVD基因调控网络。功能富集分析表明,该基因调控网络包含了许多CAVD相关基因之间的新相互作用,为未来研究筛选了有潜力的候选基因。结论:本研究提出的方法通过可用的生物学先验信息解决了复杂的计算问题,并可以检测潜在的共表达模式。该研究将促进对CAVD相关基因相互作用的理解,为识别潜在的基因共表达模式提供了一种新方法。 展开更多
关键词 钙化性主动脉瓣疾病 基因调节模块 液体关联 富集分析
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