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体细胞多位点基因打靶技术的研究
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作者 唐冬生 田允波 +1 位作者 顾万军 施家琦 《广东畜牧兽医科技》 2002年第4期32-35,共4页
利用多拷贝序列作为靶位点进行多位点基因打靶技术的研究。通过显微切割、菌落杂交、Southern杂交等方法获得人类D、G组染色体短臂多拷贝序列(DGMS),然后利用DGMS构建含Neo/TK基因正负选择系统的基因打靶载体。采用电穿孔、G418和GCV筛... 利用多拷贝序列作为靶位点进行多位点基因打靶技术的研究。通过显微切割、菌落杂交、Southern杂交等方法获得人类D、G组染色体短臂多拷贝序列(DGMS),然后利用DGMS构建含Neo/TK基因正负选择系统的基因打靶载体。采用电穿孔、G418和GCV筛选进行Neo基因的基因打靶,并经PCR、FISH定位、Neo基因表达等证实Neo基因定点整合到D、G组染色体短臂且表达,最终建立了一种有效的、多个安全位点的基因打靶技术。该技术可应用于体外细胞和动植物的转基因,甚至人类的基因治疗。 展开更多
关键词 体细胞 多位点基因打靶技术 多拷贝序列 基因定点整合
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浅谈“基因敲除” 被引量:1
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作者 吕飞 《生物学教学》 北大核心 2010年第10期61-62,共2页
基因敲除是20世纪80年代末发展起来的新型分子生物学技术,通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的。它克服了随机整合的盲目性和偶然性,是一种理想的修饰、改造生... 基因敲除是20世纪80年代末发展起来的新型分子生物学技术,通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的。它克服了随机整合的盲目性和偶然性,是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。 展开更多
关键词 基因敲除 分子生物学技术 基因定点整合 同源重组 随机整合 遗传物质 基因 靶细胞
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