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基于GBS测序的全基因组SNP揭示大凉山玉米地方品种资源的亲缘关系与遗传分化 被引量:2
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作者 冷益丰 罗樊 +2 位作者 陈从顺 丁鑫 蔡光泽 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期32-47,共16页
玉米地方品种是玉米育种种质的重要来源,其类型丰富、部分性状田间表现突出,常含有可利用的优良抗性基因。大凉山因其独特的地理位置和光热资源,生产中积累了各具特色的玉米地方品种,但缺乏系统的遗传研究,导致本区域的玉米育种利用进... 玉米地方品种是玉米育种种质的重要来源,其类型丰富、部分性状田间表现突出,常含有可利用的优良抗性基因。大凉山因其独特的地理位置和光热资源,生产中积累了各具特色的玉米地方品种,但缺乏系统的遗传研究,导致本区域的玉米育种利用进展缓慢。本研究利用基因分型测序(genotyping-by-sequencing,GBS)技术,对收集自大凉山不同地方的360份玉米地方品种资源进行亲缘关系与遗传分化分析。通过高通量测序,产生有效数据250.99 GB,所有样本获得1 659 033 712个clean reads,平均reads数量为4 608 427,平均raw base为0.70 GB,clean base为0.67 GB。各样本的Q20平均值大于等于94.57%,Q30平均值大于等于87.14%,平均GC含量48.20%。经过SNP calling并过滤,获得124 342个单核苷酸多态性(SNP)位点、32 063个插入缺失(InDel)位点(其中插入位点15 738个、缺失位点16 325个)。邻接法构建的系统进化树将360份玉米地方品种群体分成A和B两大类群,支持玉米杂优两群学说;结合主成分分析表明,两群亲缘关系较远,呈现遗传分化;群体结构分析进一步把其分成9个亚群。类群A与B之间的群体分化指数(F_(st))为0.462 2,类群A的核苷酸多样性(πA)高于类群B;选择性清除分析得到96个基因组区域,对前5%的基因组区域进一步分析,共检测到418个基因。对候选基因进行基因功能注释,发现富集的基因组区域中包含寒冷响应基因、缺水响应基因、病菌响应基因等与逆境应答相关的基因。研究结果为大凉山玉米地方品种资源的保护和遗传改良提供了参考依据。 展开更多
关键词 玉米 大凉山 地方品种 基因分型 亲缘关系
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基于GBS测序的湘东黑山羊的亲缘关系及近交系数 被引量:2
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作者 刘海林 江为民 +4 位作者 段洪峰 李昊帮 罗璋 李安定 龚龑 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期78-85,共8页
利用基因分型测序(GBS)对60只湘东黑山羊(9只公羊、51只母羊)进行基因组测序,获得湘东黑山羊染色体上的SNP数据和连续纯合子片段(ROH)数据。通过SNP数据进行基于G矩阵的基因组亲缘关系分析和NJ聚类分析,构建湘东黑山羊的群体家系结构,... 利用基因分型测序(GBS)对60只湘东黑山羊(9只公羊、51只母羊)进行基因组测序,获得湘东黑山羊染色体上的SNP数据和连续纯合子片段(ROH)数据。通过SNP数据进行基于G矩阵的基因组亲缘关系分析和NJ聚类分析,构建湘东黑山羊的群体家系结构,并通过ROH数据得到群体平均近交系数。结果表明,60只湘东黑山羊的平均测序深度为9.15X,与参考基因组比对率平均为99.59%;在SNP检测过程中,3只母羊不符合基因型数据质控标准,将其过滤后获得其他57只黑山羊29条染色体上153046个SNPs位点和1937个ROH片段;构建的湘东黑山羊8个家系,其中9只公羊和6只母羊被分为7个家系,另42只母羊被单独分类;基于ROH片段分析的湘东黑山羊群体中每个个体的近交系数均值为0.047,说明湘东黑山羊公羊在繁育过程中有较大的利用空间。 展开更多
关键词 湘东黑山羊 基因分型 单核苷酸多态性 连续纯合子片段 近交系数 亲缘关系
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4株CAMP阴性无乳链球菌的全基因测序分析
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作者 王秀 姚杰 +2 位作者 冷贵云 唐伟 周强 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第4期707-711,共5页
目的探讨4株CAMP阴性无乳链球菌(S.agalactiae)的全基因组测序分子特征。方法应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)筛选可疑菌株。对于确认为S.agalactiae的菌株,进一步开展CAMP试验。针对CAMP阴性菌株,利用MGI DNBSEQ-T... 目的探讨4株CAMP阴性无乳链球菌(S.agalactiae)的全基因组测序分子特征。方法应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)筛选可疑菌株。对于确认为S.agalactiae的菌株,进一步开展CAMP试验。针对CAMP阴性菌株,利用MGI DNBSEQ-T7和MinION Flow Cell测序平台进行全基因组测序。测序结果重点分析多位点序列分型(MLST)、毒力基因和耐药基因。采用全自动Phoenix M50药敏仪对CAMP阴性菌株进行药敏检测。结果4株CAMP阴性S.agalactiae被纳入研究。全基因组测序分析显示,4株CAMP阴性菌株均为ST862型;携带22种与荚膜多糖、β-溶血素和透明质酸酶相关的毒力基因,以及7种与大环内酯类、林可酰胺类、多肽类和氨基糖苷类相关的耐药基因。药敏结果显示,4株CAMP阴性菌株对青霉素G、头孢吡肟、头孢噻肟、万古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星、莫西沙星和氯霉素均敏感;其中3株对红霉素耐药;1株对克林霉素耐药。结论4株CAMP阴性S.agalactiae均为ST862型,携带多种毒力基因及耐药基因,对红霉素耐药率高,应引起临床重视。 展开更多
关键词 无乳链球菌 CAMP阴性 基因 多位点分型 毒力基因 耐药基因
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基于基因分型测序(GBS)技术的堇叶紫金牛遗传结构分析 被引量:3
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作者 周鑫洋 饶盈 +3 位作者 夏国华 马丹丹 陈涛梅 姚熠涵 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期11-21,共11页
采用基因分型测序(GBS)技术对堇叶紫金牛[Ardisia violacea(T.Suzuki)W.Z.Fang et K.Yao]13个野生居群77份样本进行单核苷酸多态性(SNP)位点挖掘,在此基础上,对13个居群77份样本的遗传多样性、系统发育树、亲缘关系等进行分析。结果表明... 采用基因分型测序(GBS)技术对堇叶紫金牛[Ardisia violacea(T.Suzuki)W.Z.Fang et K.Yao]13个野生居群77份样本进行单核苷酸多态性(SNP)位点挖掘,在此基础上,对13个居群77份样本的遗传多样性、系统发育树、亲缘关系等进行分析。结果表明:共获得有效SNP位点246307个,每份样本检测到SNP位点1154~3789个。13个居群的观测杂合度为0.1569~0.4289,多态信息含量为0.0785~0.3244,核苷酸多样性指数为0.0002~0.0007,Tajima’s D值为0.2247~1.0936,Shannon’s多样性指数为0.2175~0.6649,表明堇叶紫金牛整体遗传多样性水平偏低。系统发育树、主成分分析和遗传结构分析结果显示77份样本可划分为6组。亲缘关系分析结果显示:居群内个体间的亲缘关系整体较近;居群间的亲缘关系与地理距离有一定的相关性。遗传分化和基因流分析结果显示:大部分居群间存在较高的遗传分化,各居群间存在一定程度的基因交流。综上所述,堇叶紫金牛13个居群的整体遗传多样性偏低,但居群间的遗传分化程度较高,这与居群间的地理距离较远、基因交流较少有关。建议优先保护安徽省黄山市祁门县牯牛降、浙江省舟山市定海区蔡家岙和浙江省宁波市象山县屠家园村3个遗传多样性较高的居群,并开展相关繁育工作以维持和扩大居群数量。 展开更多
关键词 堇叶紫金牛 基因分型(gbs) 单核苷酸多态性(SNP) 遗传结构
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基于全基因组测序技术分析扬州市黄金海岸沙门氏菌病原学特征
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作者 徐娅雯 王艳 +3 位作者 许蓉蓉 陆荣荣 英航宁 周乐 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第6期597-602,共6页
目的分析扬州市黄金海岸沙门氏菌分离株的病原学及基因组特征。方法对2017—2023年扬州地区食源性疾病监测和健康人群体检中分离的黄金海岸沙门氏菌进行复核鉴定、抗生素敏感性实验和全基因组测序,结合CRISPR分型与单核苷酸多态性系统... 目的分析扬州市黄金海岸沙门氏菌分离株的病原学及基因组特征。方法对2017—2023年扬州地区食源性疾病监测和健康人群体检中分离的黄金海岸沙门氏菌进行复核鉴定、抗生素敏感性实验和全基因组测序,结合CRISPR分型与单核苷酸多态性系统进化分析,解析其耐药表型与基因型的关联。结果共检出8株黄金海岸沙门氏菌,检出2~7类抗生素抗性基因。所有菌株的parC基因均存在T57S突变位点。50%(4/8)的菌株携带磺胺类耐药基因sul1或sul3;37.5%(3/8)检出超广谱β-内酰胺酶基因(bla_(CTX-M-55)、bla_(TEM-1))。多位点序列分型结果显示ST358(5株)与ST2529(3株)为优势型别,分别对应CRISPRⅠ群与Ⅱ群。SNP进化分析表明,病例分离株Sal-2214与多地区分离株亲缘关系密切(SNP差异≤20),提示跨地区传播可能。1株4岁腹泻儿童粪便分离株Sal-2214携带β-内酰胺类耐药基因(bla_(CTX-M-55)),对头孢噻肟(CTX)和头孢他啶(CAZ)呈高水平。结论自2022年起,扬州市开始出现黄金海岸沙门氏菌,呈现多重耐药特征,且存在与沿海地区菌株的遗传关联,需加强耐药监测及溯源研究。 展开更多
关键词 黄金海岸沙门氏菌 多重耐药 基因 CRISPR分型 单核苷酸多态性
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基于GBS测序技术分析云上黑山羊主配公羊亲缘关系及近交系数
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作者 李子健 江炎庭 +4 位作者 兰蓉 朱兰 叶朗惠 龚翔 欧阳依娜 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3447-3460,共14页
[目的]探究云上黑山羊主配公羊的亲缘关系及近交系数,构建肉羊高效联合育种体系,提升云上黑山羊生产性能和可持续发展力。[方法]采用简化基因组测序(genotyping-by-sequencing,GBS)技术对云上黑山羊5个核心育种场(XD、ZY、ML、SB、TJ)的... [目的]探究云上黑山羊主配公羊的亲缘关系及近交系数,构建肉羊高效联合育种体系,提升云上黑山羊生产性能和可持续发展力。[方法]采用简化基因组测序(genotyping-by-sequencing,GBS)技术对云上黑山羊5个核心育种场(XD、ZY、ML、SB、TJ)的100只主配公羊进行测序,并使用BWA、SAMTOOLS、PLINK v 1.90、Gmatrix v 2、Mega X等软件进行质控后高质量单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点鉴定、主成分分析(PCA)、状态同源距离矩阵(identical by state,IBS)和G矩阵构建、群体进化树分析、亲缘系数计算及近交系数估计。[结果]GBS质控后共获得215926个高质量SNPs位点;共检测到8692条连续性纯合片段(runs of homozygosity,ROH),长度在10.59~591.23 Mb之间,平均长度245.74 Mb。云上黑山羊主配公羊群体平均IBS遗传距离为0.118±0.011,亲缘关系G矩阵结果与IBS距离矩阵结果一致。结合群体进化树和亲缘关系分析,100只云上黑山羊被分为三大支和28个家系,其中家系2、11、13、14、16、17、18、20、23、24、25仅有1只公羊,XD、ZY、ML、SB、TJ核心育种场分别有18、10、8、5和8个家系;基于ROH的群体平均基因组近交系数为0.099641,29只公羊的近交系数<0.0625,39只公羊的近交系数在0.0625~0.125之间,32只公羊近交系数>0.125,存在较大的近交累积。[结论]100只云上黑山羊主配公羊被分为28个家系,其中11个家系仅有1只公羊,应加强繁育防止其血统的流失,配种方案制定中应关注近交系数>0.125的个体,防止近交衰退,同时根据不同的育种目标合理进行种公羊的交换。 展开更多
关键词 云上黑山羊主配公羊 简化基因(gbs) 亲缘关系 近交系数
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一种以测序为基础的基因分型方法的建立 被引量:5
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作者 刘泽寰 林蒋海 +2 位作者 符志彦 潘德京 徐安龙 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期83-87,共5页
设计了一种自动化的基因分型方法,能够直接利用PCR产物的DNA测序结果作为数据,通过自动化基因分型程序(automatic genotyping program)与一个含有其等位基因序列的数据库进行比较,来完成高精度的... 设计了一种自动化的基因分型方法,能够直接利用PCR产物的DNA测序结果作为数据,通过自动化基因分型程序(automatic genotyping program)与一个含有其等位基因序列的数据库进行比较,来完成高精度的基因分型工作.用这种方法对50个随机挑选的中冈南方人的HLA-DPB1基因进行广基因分型,证明该方法是可行的,并从中发现了2个不明确杂合子以及一个新的等位基因序列.随后对这些样品克隆测序,发现除了2个不明确杂合子得到了进一步的区分外,其它样品都与前面的分型结果一致,显示了96%的精确性.通过以上的研究表明,成功建立了一种高精度的、基于序列的分型(sequence-based typing)方法.既然该方法能成功分型HLA-DPB1基因,预示了该方法同样能应用于其它基因的分型.该AGP程序可以在http:/genome.zsu.edu.cn免费下载. 展开更多
关键词 基因分型 HLA-DPB1 免疫系统
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基于Sanger测序方法检测赛鸽竞翔相关基因的单核苷酸多态性 被引量:1
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作者 杨理程 吴锐琼 +2 位作者 李培健 王冰梅 黄镇 《福建农业科技》 CAS 2024年第7期1-9,共9页
大量研究发现赛鸽中LDHA、F-KER、DRD4、MSTN和CRY1这5个基因存在单核苷酸多态性,并与归巢能力相关,成为分子辅助育种的潜在SNP标记。当前的检测方法仍以传统的RFLP为主,尚未报道Sanger测序的应用。通过建立一种基于Sanger测序技术的检... 大量研究发现赛鸽中LDHA、F-KER、DRD4、MSTN和CRY1这5个基因存在单核苷酸多态性,并与归巢能力相关,成为分子辅助育种的潜在SNP标记。当前的检测方法仍以传统的RFLP为主,尚未报道Sanger测序的应用。通过建立一种基于Sanger测序技术的检测方法,以识别这5个基因中的多态性位点。结果表明:针对赛鸽的LDHA、F-KER、DRD4、MSTN和CRY1基因设计了特异性引物,用于扩增单核苷酸多态性位点,所得PCR产物条带单一,显示具有良好的特异性。进一步,利用这些引物对60羽赛鸽的羽毛DNA样品进行扩增和Sanger测序,能成功获得各个基因位点的多态性分型结果。最后,统计了各种基因分型在这60羽赛鸽中的分布频率,发现相关的罕见基因型频率均低于5%,与国外赛鸽群体的频率相一致。研究显示所建立的赛鸽竞翔相关基因SNP分型Sanger测序分析方法,对于选育优良基因型的赛鸽具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 赛鸽 Sanger 基因分型
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测序法检测丙型肝炎病毒的基因分型 被引量:1
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作者 牛俊奇 刘媛媛 苏秀芬 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 1997年第2期72-73,共2页
测序法检测丙型肝炎病毒的基因分型牛俊奇刘媛媛苏秀芬作者单位:130021白求恩医大第一临床学院丙型肝炎病毒克隆的建立和重组蛋白抗原用于丙型肝炎病毒感染的血清学诊断,使非甲非乙型肝炎的研究起到了一个突破性的进展〔1,2... 测序法检测丙型肝炎病毒的基因分型牛俊奇刘媛媛苏秀芬作者单位:130021白求恩医大第一临床学院丙型肝炎病毒克隆的建立和重组蛋白抗原用于丙型肝炎病毒感染的血清学诊断,使非甲非乙型肝炎的研究起到了一个突破性的进展〔1,2〕,目前已证实在大多数非肠道传播的... 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 基因分型
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基于GBS测序开发SNP在植物上的应用进展 被引量:12
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作者 薛晓杰 杜晓云 +4 位作者 盖艺 唐岩 孙燕霞 宋来庆 姜中武 《江苏农业科学》 2020年第13期62-68,共7页
基因分型测序(genotyping by sequencing,GBS)因具有实现相对简单、成本较低、可产生高通量SNP的优点而受到青睐。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)因简单、快速、特异性强、稳定遗传、便于检测等特点已成为目前最... 基因分型测序(genotyping by sequencing,GBS)因具有实现相对简单、成本较低、可产生高通量SNP的优点而受到青睐。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)因简单、快速、特异性强、稳定遗传、便于检测等特点已成为目前最广泛使用的分子标记之一。本文就利用GBS技术开发SNP分子标记近年来在亲缘关系评价、重要农艺性状鉴定、遗传多样性研究、遗传图谱构建以及基因定位等方面在国内外的研究进展进行综述,并对其今后的研究提出展望,以期为其在植物上的更广泛应用提供参考。 展开更多
关键词 SNP分子标记 gbs技术 简化基因 遗传图谱构建 QTL定位 基因定位
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基于测序技术鉴定血型基因5873CT突变引起B抗原弱表达 被引量:5
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作者 方小敏 刘伟 +2 位作者 杨斌 刘岩 曲秀娟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1929-1934,共6页
目的:探讨血型基因分型和基因测序技术在鉴定血型亚型中的作用和意义。方法:利用血型血清学方法对先证者及其儿子进行初步血型鉴定,根据血清学表达格局结果选择疑难血型的补充实验,并进行ABO基因分型及测序。结果:血清学实验发现,先证... 目的:探讨血型基因分型和基因测序技术在鉴定血型亚型中的作用和意义。方法:利用血型血清学方法对先证者及其儿子进行初步血型鉴定,根据血清学表达格局结果选择疑难血型的补充实验,并进行ABO基因分型及测序。结果:血清学实验发现,先证者及其儿子有弱B抗原的表达,血型血清学方法初步鉴定为B3亚型。ABO基因分型明确了先证者的基因型为B/O1,其儿子的基因型为B/O2。最终通过基因测序,证实先证者及其儿子的B101等位基因上intron1内均存在5873C>T杂合突变。结论:采用血清学、基因分型和测序相结合的方法,可发现血型基因新突变位点,有益于阐明ABO亚型的分子生物学基础,对精准血型鉴定、个体化用血及输血安全有着重要战略意义。 展开更多
关键词 血型鉴定 血型亚型 基因分型 基因
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芬兰和瑞典等国科学家的基因分型测序揭示一子宫肌瘤相关基因
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《生物学教学》 2012年第3期77-77,共1页
据生物通网2011年8月30日报道,芬兰赫尔辛基大学和瑞典卡罗琳斯卡学院等机构的研究人员利用基因组测序技术,对200多个肿瘤样品进行分析,发现了一个与子宫肌瘤相关的基因,从而为进一步深入研究子宫肌瘤提供了新线索。这一研究成果公... 据生物通网2011年8月30日报道,芬兰赫尔辛基大学和瑞典卡罗琳斯卡学院等机构的研究人员利用基因组测序技术,对200多个肿瘤样品进行分析,发现了一个与子宫肌瘤相关的基因,从而为进一步深入研究子宫肌瘤提供了新线索。这一研究成果公布在新一期美国《科学》杂志上。 展开更多
关键词 子宫肌瘤 相关基因 技术 基因分型 瑞典 芬兰 科学家 《科学》杂志
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简化基因组测序技术及其在海洋生物研究中的应用 被引量:11
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作者 边力 王军 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期3-12,共10页
传统开发遗传标记的方法通常会消耗大量的人力、物力和时间,伴随着高通量测序技术的飞速发展,一种高效的标记开发技术即简化基因组测序技术开始得到广泛应用.简化基因组测序技术可以在一次实验中获得成千上万的遗传标记,建库过程简易,... 传统开发遗传标记的方法通常会消耗大量的人力、物力和时间,伴随着高通量测序技术的飞速发展,一种高效的标记开发技术即简化基因组测序技术开始得到广泛应用.简化基因组测序技术可以在一次实验中获得成千上万的遗传标记,建库过程简易,成本较低.其通过实验手段降低基因组的复杂度,仅对部分基因组进行测序,随后在该部分获得的基因组开发分子标记.基于酶切的简化基因组测序技术可分为三大类:简化代表库测序、限制性酶切位点相关DNA测序和低覆盖度的分型测序.在海洋生物研究中,简化基因组测序技术已被广泛应用于群体遗传学、系统进化学、适应性进化、遗传图谱构建及数量性状位点定位等研究领域. 展开更多
关键词 简化基因 海洋生物 基因分型 限制性酶切位点相关DNA
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应用二代测序技术排除PCR-SBT零错配的HLA-C基因型 被引量:3
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作者 钟艳平 陈浩 +1 位作者 周丹 邹红岩 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1213-1218,共6页
目的:对3例PCR-SBT结果零错配的HLA-C罕见等位基因进行全长测序分析,以确定其真实基因型。方法:从临床移植配型样本中筛查出3例PCR-SBT结果零错配的HLA-C罕见等位基因,应用下一代测序技术检测序列全长以准确分型。结果:3例样本PCR-SBT... 目的:对3例PCR-SBT结果零错配的HLA-C罕见等位基因进行全长测序分析,以确定其真实基因型。方法:从临床移植配型样本中筛查出3例PCR-SBT结果零错配的HLA-C罕见等位基因,应用下一代测序技术检测序列全长以准确分型。结果:3例样本PCR-SBT分型结果分别为HLA-C*03:04,HLA-C*12:167;HLA-C*07:291,HLA-C*15:02;HLA-C*01:43,HLA-C*08:16;除HLA-C*03:04、HLA-C*15:02为HLA常见等位基因,其他等位基因均不在中国常见及确认HLA等位基因CWD表(2.3版本)中。NGS全长测序发现3例样本HLA-C基因型均为常见等位基因和新等位基因的组合,3个新等位基因分别在第6、2、4外显子存在一个碱基突变。新鉴定的等位基因序列已提交给Genbank数据库(MK629722、MK335474、MK641803),被WHO HLA命名委员会正式命名为HLA-C*03:04:74、HLA-C*15:192、HLA-C*08:01:25。3例样本的HLA高分辨分型结果应该为HLA-C*03:04:74,12:03;HLA-C*07:02,15:192;HLA-C*01:02,08:01:25。结论:HLA分型结果中含有罕见等位基因的零错配结果应谨慎对待,须通过NGS或克隆等方法对全长序列加以复核确认。本实验室通过加做NGS最终确认3例PCR-SBT零错配的HLA-C基因型均为常见等位基因和新等位基因的组合,为临床移植配型提供了准确依据,丰富了人类HLA遗传数据库。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 罕见等位基因 新等位基因 聚合酶链反应-分型 二代技术
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基于全基因组测序的甲型副伤寒沙门菌暴发疫情分离株分子特征研究 被引量:4
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作者 李毅 谢爱蓉 谢中必 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期898-905,共8页
目的分析一起甲型副伤寒暴发疫情菌株的分子分型特征,为病原菌的确定和暴发疫情的防控提供科学依据。方法利用生化试验、血清学试验对病原菌进行鉴定,并将分离到的病原菌进行微量肉汤稀释法药物敏感性试验、PFGE分子分型分析、全基因组... 目的分析一起甲型副伤寒暴发疫情菌株的分子分型特征,为病原菌的确定和暴发疫情的防控提供科学依据。方法利用生化试验、血清学试验对病原菌进行鉴定,并将分离到的病原菌进行微量肉汤稀释法药物敏感性试验、PFGE分子分型分析、全基因组测序,利用全基因组数据与沙门菌MLST标准数据库比对获得序列型别(ST)、cgMLST序列号以及rMLST序列号并进行聚类分析,通过细菌基因组分析平台fIDBA分析病原菌的耐药、毒力相关基因。结果11株沙门菌血清型均为甲型副伤寒沙门菌,具有100%相似性的PFGE带型,MLST、cgMLST、rMLST的型别均分别为ST129型、cgST-2191型、rST3678型,表明此次暴发疫情菌株从分子特征角度可诊断为同一传染源导致。对萘啶酸100%耐药,对链霉素100%中介。发现本次疫情菌株基因组均携带29种耐药基因。通过毒力因子数据库比对,均携带21类250种已知毒力基因,其中以Ⅲ型分泌系统、粘附、鞭毛等最为常见。结论本次暴发疫情是由共同来源的、具有相同分子分型特征的甲型副伤寒沙门菌引起。在病原溯源研究中,应用全基因组数据可更精细分析菌株遗传进化特征、亲缘关系及毒力基因、耐药基因携带情况,可以作为替代PFGE、MLST的技术用于更精准的传染病分子流行病学调查分析研究。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 基因 耐药基因 毒力基因 分子分型
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基于高通量测序的青稞产量相关性状的基因定位及候选基因挖掘 被引量:1
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作者 姚晓华 吴昆仑 +1 位作者 白羿雄 迟德钊 《大麦与谷类科学》 2018年第4期57-58,共2页
青稞是青藏高原最具特色的农作物,主要分布在海拔3 000 m以上的高寒地带。为寻找控制青稞的抗倒、早熟以及穗部性状、株高、分蘖等产量相关性状的基因,采用简化基因组测序技术(specific-locus amplified fragment sequencing,SLAF)对30... 青稞是青藏高原最具特色的农作物,主要分布在海拔3 000 m以上的高寒地带。为寻找控制青稞的抗倒、早熟以及穗部性状、株高、分蘖等产量相关性状的基因,采用简化基因组测序技术(specific-locus amplified fragment sequencing,SLAF)对300份青稞自然群体进行全基因组测序,对抗倒相关性状和SNP标记检测结果利用MLM和GLM模型进行全基因组关联分析(GWAS),共挖掘到与抗倒性密切相关的分子靶点184个,并筛选出91个可能与青稞抗倒密切相关的基因。采用简化基因组测序技术(genotyping-by-sequencing,GBS)构建包含了3 662个SNP标记,7条染色体遗传图距为160.21~227.21 c M,所有连锁群的平均图距为0.57 c M。利用这一图谱定位了5个与紫粒相关的QTL,在区间内找到5个与花青素合成相关的结构基因和1个调控基因,并进行了功能验证。同时利用该遗传图谱在1H、2H和4H上定位了与早熟相关的QTL 4个;与产量相关的QTL共92个,其中在1H、3H、4H上定位到与株高相关QTL 5个;在2H上定位到与穗数相关QTL 2个;在4H、5H上定位到与穗长相关QTL 2个;在7H上定位到与穗粒数相关QTL 6个;在3H、5H、6H上定位到与穗粒质量相关QTL 9个。 展开更多
关键词 青稞 SLAF/gbs简化基因 基因定位 抗倒性
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HLA新等位基因B*46:30序列分析及其编码MHC蛋白分子结构预测与表型鉴定
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作者 聂向民 朱传福 +4 位作者 朱海峰 张毅 乔文本 刘艳 邵静茹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期152-156,161,共6页
目的:鉴定分析HLA新等位基因B*46:30序列,对其MHC蛋白分子三级结构及氨基酸残基改变对蛋白结构的可能影响进行模拟分析,并对其血清学表型进行鉴定。方法:应用Luminex SSOP流式、PCR-SBT及单等位基因特异性测序对HLA序列进行序列鉴定。应... 目的:鉴定分析HLA新等位基因B*46:30序列,对其MHC蛋白分子三级结构及氨基酸残基改变对蛋白结构的可能影响进行模拟分析,并对其血清学表型进行鉴定。方法:应用Luminex SSOP流式、PCR-SBT及单等位基因特异性测序对HLA序列进行序列鉴定。应用SWISS-MODEL及RCSB PDB分析软件,对HLA序列蛋白分子三维结构进行模拟分析。HistoCheck、FATCAT对比分析蛋白分子间差异。使用Terasaki分型板进行血清型表型鉴定。结果:相较于B*46:01,新等位基因B*46:30第559、560位发生C->G、T->A替代。MHC分子结构预测分析表明,B*46:30第163位氨基酸残基由疏水性脂肪族亮氨酸Leu→B*46:30带负电荷的酸性谷氨酸Glu,R值为32。该氨基酸变异位置位于α2结构域构成抗原多肽结合凹槽侧壁的α螺旋顶端,总差异值DSS Score=1.32,均方根偏差RMSD=0.59?,血清型表型检测为B46强阳性。结论:HLA新等位基因序列被WHO HLA命名委员会正式命名为B*46:30,分析预测此编码氨基酸残基改变将可能影响其抗原多肽结合功能,并影响其与TCR及抗体的结合特性,血清型表型鉴定为B46。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 分型 新等位基因 结构预
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下呼吸道感染患儿沙眼衣原体检测与初步基因分型
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作者 余加林 吴仕孝 刘官信 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期54-56,共3页
研究下呼吸道感染患儿沙眼衣原体 (Ct)的检测情况、Ct分离株的初步基因分型及方法学评价。采用McCoy细胞培养、聚合酶链反应 (PCR)对下呼吸道感染患儿 2 48例鼻咽拭子 (其中 110例加下睑结膜刮取标本 )进行检测 ;8份患儿Ct标本经双链DN... 研究下呼吸道感染患儿沙眼衣原体 (Ct)的检测情况、Ct分离株的初步基因分型及方法学评价。采用McCoy细胞培养、聚合酶链反应 (PCR)对下呼吸道感染患儿 2 48例鼻咽拭子 (其中 110例加下睑结膜刮取标本 )进行检测 ;8份患儿Ct标本经双链DNA直接测序法以及裂解酶片段长度多态性 (CFLP)基因分型。下呼吸道感染患儿鼻咽标本Ct检出率为 2 5 %(6 2 / 2 48) ,其中 110例新生儿鼻咽和结膜标本Ct总检出率为 40 9% (4 5 / 110 ) ,基因分型 :E型 4株 ,F、D和H型分别为 2、1和 1株 ,6株成人性病株中E型 3株 ,F、D和H型各 1株。取E型 3份 ,F型 2份作CFLP ,呈两类CFLP谱。提示同时取患儿鼻咽和结膜标本可提高Ct检出率 ,下呼吸道感染婴儿的Ct型别与成人性病Ct型别关系密切 ,双链DNA直接测序法及CFLP均可用于Ct基因分型。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 基因分型 儿童 下呼吸道感染
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全基因组测序技术在结核病分子流行病学中的应用进展 被引量:5
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作者 凌曦 王璐 +3 位作者 张泽文 刘礼荣 戴江红 李凡卡 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期399-403,共5页
结核病给全球带来了严重的疾病负担,防控结核病具有重要意义。结核病分子流行病学将结核分枝杆菌分型技术与流行病学资料相整合,在研究结核病的传播和流行特点中起到了极其重要的作用。全基因组测序能够构建生物体基因组的完整DNA序列,... 结核病给全球带来了严重的疾病负担,防控结核病具有重要意义。结核病分子流行病学将结核分枝杆菌分型技术与流行病学资料相整合,在研究结核病的传播和流行特点中起到了极其重要的作用。全基因组测序能够构建生物体基因组的完整DNA序列,具有高分辨率、高通量、结果精确等优势,在结核病分子流行病学研究中非常有吸引力和发展潜力。比较全基因组测序技术(WGS)与传统结核分枝杆菌分型技术,指出WGS优势,介绍全基因组测序的技术路线及技术进展,并回顾其在疫情追踪,耐药研究,混合感染诊断等方面的应用成果,为结核病的防控和研究提供参考和支持。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 分子分型技术 基因 分子流行病学
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三类禽源碳青霉烯类耐药大肠杆菌流行病学调查及全基因组测序分析 被引量:5
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作者 李翠函 曲志娜 +12 位作者 高玉斌 李彦 王娟 段笑笑 王琳 张喜悦 赵格 黄秀梅 赵建梅 张青青 王君玮 黄保续 刘俊辉 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1653-1662,共10页
【目的】研究不同禽源碳青霉烯类耐药大肠杆菌(carbapenem-resistant Escherichia coli,CREC)的群间分布、耐药特征及菌株间亲缘关系,为阻断CREC的潜在危害提供技术支持。【方法】在胶东地区采集肉鸡、蛋鸡、水禽三类家禽泄殖腔拭子1131... 【目的】研究不同禽源碳青霉烯类耐药大肠杆菌(carbapenem-resistant Escherichia coli,CREC)的群间分布、耐药特征及菌株间亲缘关系,为阻断CREC的潜在危害提供技术支持。【方法】在胶东地区采集肉鸡、蛋鸡、水禽三类家禽泄殖腔拭子1131份,利用选择性分离培养、质谱鉴定、PCR、微量肉汤稀释法、多位点序列分型(MLST)及全基因组测序(WGS)等方法进行CREC菌株鉴定与分析。【结果】共分离出364株bla NDM基因阳性的CREC菌株,分离率为32.18%,阳性场总体占比为76.32%,肉鸡场和个体阳性率均最高,分别为93.33%和55.56%。三类禽源菌株均多重耐药,83.65%菌株对8类及以上药物同时耐药,对多数测试药物耐药率在80%以上。肉鸡多重耐药问题最严重,水禽次之,蛋鸡相对较轻。45株全基因组测序的CREC菌株携带12类52种耐药基因,4种bla NDM变异体,以bla NDM-5(77.78%)为主,三类家禽对同类耐药基因的检出率存在差异。共检出46种ST型,多样性比为44.23%。三类家禽CREC菌株间单核苷酸多态性(SNPs)差异位点为82~71307个,且携带的优势型不同。【结论】携带bla NDM的CREC在不同家禽养殖场尤其是肉鸡场广泛存在,以bla NDM-5亚型最为常见,对多种抗菌药普遍耐药,且携带大量耐药基因,以质粒传播为主。CREC菌株在三类家禽中呈多样化分布,且多数菌株间亲缘关系相差较远。提示应针对不同动物群体,加强监测和影响因素研究,以降低CREC的潜在风险。 展开更多
关键词 家禽 碳青霉烯类耐药大肠杆菌(CREC) 群间分布 多位点分型(MLST) 基因(WGS)
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