期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到10篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
毕赤酵母在基因克隆与表达中的应用
1
作者 占今舜 宋虎威 +2 位作者 陈宇光 李丽立 张彬 《猪业科学》 2012年第11期74-75,共2页
随着分子生物学及基因工程的发展，利用自身基因在外源细胞中的克隆与表达也受世人关注。生物表达系统的出现满足了科学发展的要求，并渐渐成为处理工农生产以及医疗：卫生等领域问题的重要手段之一。
关键词 基因克隆与表达 毕赤酵母 分子生物学 应用 基因工程 科学发展 表达系统 细胞
在线阅读 下载PDF
毕赤酵母在基因克隆与表达中的应用
2
作者 占今舜 宋虎威 +2 位作者 陈宇光 李丽立 张彬 《猪业科学》 2012年第12期74-75,共2页
（上接第11期75页） 1）外源蛋白在酵母中表达受mRNA5＇端和3’端的UTR序列的核苷酸序列及长度的干扰比较大。为保证外源蛋白的成功表达，目的基因5’端UTR应该与AOX1基因的mRNA5’端UTR尽量相似或保持一致。
关键词 基因克隆与表达 毕赤酵母 核苷酸序列 应用 外源蛋白 目的基因
在线阅读 下载PDF
锰超氧化物歧化酶基因的克隆和在保加利亚乳杆菌中的表达 被引量：12
3
作者 黄勇 张德纯 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期92-95,共4页
目的:克隆大肠杆菌锰超氧化物歧化酶基因(sodA)并在保加利亚乳杆菌(L6032)中表达,以提高该菌对氧的耐受性,同时为SOD发酵奶的研制奠定实验室基础。方法:PCR扩增大肠杆菌sodA,将其克隆入乳酸菌表达载体pMG36e中,并将该重组质粒pMG36e-so... 目的:克隆大肠杆菌锰超氧化物歧化酶基因(sodA)并在保加利亚乳杆菌(L6032)中表达,以提高该菌对氧的耐受性,同时为SOD发酵奶的研制奠定实验室基础。方法:PCR扩增大肠杆菌sodA,将其克隆入乳酸菌表达载体pMG36e中,并将该重组质粒pMG36e-sod电转入L6032中表达。用SOD测试盒测定SOD的表达活性,同时对L6032及其重组子在MRS平板上的生长情况及其在有氧条件下的存活情况进行比较,初步探讨SOD在L6032中的活性表达对其氧耐受性的影响。结果:构建了重组质粒pMG36e-sod,经酶切和PCR鉴定与预期完全吻合。核酸测序显示插入的sodA片段能正确编码SOD氨基酸序列。利用电转化成功地将重组质粒导入L6032中,SOD的表达活性约590.5NU/mgprot。SOD的活性表达,能增强保加利亚乳杆菌对氧的耐受性,在有氧条件下重组子的生长和存活率都优于原菌。结论:SodA在保加利亚乳杆菌中获得了成功表达,增强了该菌对氧的耐受性,有利于该菌的开发应用。同时也为下一步SOD发酵奶的研制奠定了实验室基础。 展开更多
关键词 保加利亚乳杆菌 超氧化物歧化酶 基因克隆与表达
在线阅读 下载PDF
具纤溶活性菌株ND2的筛选及其纳豆激酶基因的克隆、表达
4
作者 胡忠 吴奕瑞 +1 位作者 林键 庄东红 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期473-478,共6页
从市售的纳豆制品中分离并纯化出一株具有高效纤溶活性的菌株ND2,经生理生化特性及16SrRNA序列分析鉴定为芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌。通过正交试验优化菌株ND2的发酵条件,得到ND2产纳豆激酶的最佳条件:氮源-大豆蛋白胨,碳源-淀粉,碳氮比... 从市售的纳豆制品中分离并纯化出一株具有高效纤溶活性的菌株ND2,经生理生化特性及16SrRNA序列分析鉴定为芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌。通过正交试验优化菌株ND2的发酵条件,得到ND2产纳豆激酶的最佳条件:氮源-大豆蛋白胨,碳源-淀粉,碳氮比3:1,37℃,pH6.0。经PCR扩增得到825bp的纳豆激酶成熟肽基因,采用pET32a(+)表达载体和BL21(DE3)为宿主菌,在温度为37℃、1‰IPTG浓度下可诱导获得较高表达量的重组纳豆激酶。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 纳豆激酶 基因克隆与表达
在线阅读 下载PDF
茶树CsLHTs亚家族基因的克隆与表达分析 被引量：2
5
作者 郭玲玲 张芬 +5 位作者 张亚真 成浩 韦康 阮丽 吴立赟 王丽鸳 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期280-288,共9页
氨基酸是茶叶的重要品质成分和氮素贮存形式,因此开展茶树体内氨基酸转运蛋白的研究尤为重要。本研究从茶树转录组中筛选得到5条茶树LHTs(Lysine histidine transporters,赖氨酸/组氨酸转运蛋白)家族基因序列,并从龙井43中成功克隆获得... 氨基酸是茶叶的重要品质成分和氮素贮存形式,因此开展茶树体内氨基酸转运蛋白的研究尤为重要。本研究从茶树转录组中筛选得到5条茶树LHTs(Lysine histidine transporters,赖氨酸/组氨酸转运蛋白)家族基因序列,并从龙井43中成功克隆获得4个茶树LHTs基因,分别命名为CsLHT1、CsLHT6、CsLHT8.1和CsLHT8.2。对该亚家族编码的氨基酸序列的理化性质和功能结构进行预测,结果显示CsLHTs亚家族含有9~11个跨膜区;且含有与氨基酸转运相关的结构域。为了明确在不同茶树品种和氮素水平间CsLHTs基因的表达差异,本研究选用3个茶树品种的扦插苗为试验材料,水培条件下氮饥饿两周后,分别用0.2、2、10mmol·L^-1的NH4NO3进行处理。利用qRT-PCR分析了CsLHTs在不同组织间的表达情况,结果表明4个基因在茶树营养组织中均有表达。经氮素处理后,CsLHTs基因在3个氮素水平和3个品种中呈现出不同的变化规律。CsLHT1、CsLHT6和CsLHT8.2在品种间的表达差异程度高于不同氮素水平间的基因表达差异。CsLHT8.1对氮素处理有明显的响应,尤其经0.2mmol·L^-1和10mmol·L^-1的NH4NO3处理72h后,在氮高效品种中茶302根中呈上调表达,表明CsLHT8.1可能参与氨基酸由根部向地上部的转运过程。 展开更多
关键词 茶树 LHTs 氮素 基因克隆与表达
在线阅读 下载PDF
茶树CsAAPs亚家族基因的克隆与表达分析 被引量：1
6
作者 郭玲玲 张芬 +4 位作者 成浩 韦康 阮丽 吴立赟 王丽鸳 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期454-464,共11页
采用RT-PCR技术,从龙井43中成功克隆了5个茶树AAPs(Amino acid permeases,氨基酸通透酶)基因。氨基酸序列比对结果表明,5个CsAAPs亚家族蛋白的序列同源性较高,为70.27%。根据氨基酸序列同源性构建系统发育树,结果显示5个CsAAPs分属3组... 采用RT-PCR技术,从龙井43中成功克隆了5个茶树AAPs(Amino acid permeases,氨基酸通透酶)基因。氨基酸序列比对结果表明,5个CsAAPs亚家族蛋白的序列同源性较高,为70.27%。根据氨基酸序列同源性构建系统发育树,结果显示5个CsAAPs分属3组。生物信息学分析表明,CsAAPs均含有9~10个跨膜区域和16~18个AAP保守基序。为了研究该亚家族对氮素的响应情况,选用3个茶树品种的扦插苗为试验材料,氮饥饿两周后,分别供应不同浓度的NH4NO3,然后利用qRT-PCR对CsAAPs在不同组织、氮素水平及茶树品种中的表达情况进行分析。研究发现CsAAPs在营养组织中均有表达,但是存在一定的组织表达差异,其中CsAAP3在茎中表达量最高,CsAAP8的主要表达部位为根和茎。在给氮素饥饿处理的茶苗从新供氮之后,CsAAP3的基因表达在3个氮素利用效率不同的品种间差异较大;在氮高效品种中茶302茎中表达的CsAAP3和CsAAP8,可以快速地对低氮条件做出响应,在低氮处理3 h后,基因表达水平明显增加。此研究预示着CsAAPs亚家族在茶树体内可能通过复杂的氨基酸转运参与氮代谢调控。 展开更多
关键词 茶树 氨基酸通透酶 基因克隆与表达 氮素
在线阅读 下载PDF
芽孢杆菌BC4铬抗性相关基因chrA的克隆表达
7
作者 苍岩 陈旭 +1 位作者 冉钟吕 蔡亚君 《武汉纺织大学学报》 2023年第5期25-30,共6页
以芽孢杆菌BC4菌株为对象,通过对其铬抗性相关基因chr A的克隆表达来测定其编码蛋白ChrA还原Cr(Ⅵ)的能力以及该蛋白在芽孢杆菌Cr(Ⅵ)去除中的作用,可帮助进一步阐明芽孢杆菌与Cr(Ⅵ)的作用机理,并为芽孢杆菌应用于铬污染治理奠定理论... 以芽孢杆菌BC4菌株为对象,通过对其铬抗性相关基因chr A的克隆表达来测定其编码蛋白ChrA还原Cr(Ⅵ)的能力以及该蛋白在芽孢杆菌Cr(Ⅵ)去除中的作用,可帮助进一步阐明芽孢杆菌与Cr(Ⅵ)的作用机理,并为芽孢杆菌应用于铬污染治理奠定理论基础。PCR扩增出芽孢杆菌BC4菌株铬抗性相关基因chr A,PCR产物经克隆与测序,得到chr A完整的DNA序列。该序列大小为1182bp,共编码393个氨基酸,预测编码蛋白分子量为43kDa。根据利用NCBI所进行的BLAST序列比对结果,判断该基因为铬转运蛋白编码基因。将chr A基因PCR产物双酶切后连接到表达载体pET28b并转化进大肠杆菌BL21中,对其表达产物进行分析。结果表明,chr A基因在大肠杆菌BL21中表达约43kDa的蛋白,与预期结果相符;重组菌株对Cr(Ⅵ)的耐受能力高于对照菌株,说明ChrA蛋白在芽孢杆菌BC4的Cr(Ⅵ)抗性机制中起重要作用,且重组菌株对Cr(Ⅵ)具备较强的抗性。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 chrA基因 基因克隆与表达 重组菌株
在线阅读 下载PDF
黑曲霉β-甘露聚糖酶基因克隆及在毕赤酵母中的表达
8
作者 章亭洲 王碧娇 +4 位作者 林路成 徐志伟 陆梦甜 易蒲红 吴石金 《发酵科技通讯》 CAS 2020年第3期130-134,共5页
采用RT-PCR方法从黑曲霉中克隆得到β-甘露聚糖酶基因(manA)cDNA,按照毕赤酵母密码子优化序列后,构建至毕赤酵母表达载体pPIC9K的Eco R I和Not I酶切位点之间,并与醇氧化酶强启动子序列和α因子分泌肽信号序列融合。构建好的载体进行大... 采用RT-PCR方法从黑曲霉中克隆得到β-甘露聚糖酶基因(manA)cDNA,按照毕赤酵母密码子优化序列后,构建至毕赤酵母表达载体pPIC9K的Eco R I和Not I酶切位点之间,并与醇氧化酶强启动子序列和α因子分泌肽信号序列融合。构建好的载体进行大肠杆菌转化,提取大量质粒并用Sac I线性化后进行毕赤酵母转化,筛选鉴定获得酵母转化子。重组菌接种到YPD培养基中摇瓶培养24 h后,经甲醇诱导,取发酵上清液经SDS-PAGE检测到预期分子量大小的目标蛋白带,β-甘露聚糖酶最高酶活为125.78 IU/mL,酶的比活力为188.86 IU/mg。结果表明β-甘露聚糖酶基因已在毕赤酵母中成功表达并能有效分泌到细胞外。 展开更多
关键词 Β-甘露聚糖酶 毕赤酵母 黑曲霉 基因克隆与表达
在线阅读 下载PDF
SEREX技术筛选EID3及其表达的实验研究
9
作者 王钦富 佟凤芝 +3 位作者 刘希龙 唐玲 蒋革 河上裕 《大连大学学报》 2006年第6期62-66,共5页
[目的]新的大肠癌相关性抗原EID3的基因克隆及其诊断价值研究.[方法]利用大肠癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选睾丸组织cDNA噬菌体表达文库和大肠癌组织cDNA噬菌体表达文库(SEREX),并用RT-PCR技术研究EID3 mRNA在... [目的]新的大肠癌相关性抗原EID3的基因克隆及其诊断价值研究.[方法]利用大肠癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选睾丸组织cDNA噬菌体表达文库和大肠癌组织cDNA噬菌体表达文库(SEREX),并用RT-PCR技术研究EID3 mRNA在正常组织和大肠癌传代细胞表达.[结果]睾丸组织cDNA噬菌体表达文库筛选得到了可以诱导大肠癌病人抗体免疫应答的新抗原EID3基因(Gen-bank NM_001008394.1).它们定位于染色体19q13.2,EID3含1个外显子.通过RT-PCR分析发现,EID3基因在43例大肠癌传代细胞株中,39例阳性,阳性率为90.7%.在正常组织中,除睾丸组织外不表达或有极低水平转录.[结论]EID3 mRNA表达检测用于诊断大肠癌,可能具有高特异性和高敏感性的特点.EID3蛋白被首次发现在大肠癌病人中能够诱导机体的抗体免疫应答,为一个新的大肠癌相关性抗原分子.其功能可能与抑制细胞的恶性增殖相关,并可进一步研究其用于治疗和诊断大肠癌的可行性. 展开更多
关键词 大肠癌 EID3 SEKEX 基因克隆与表达
在线阅读 下载PDF
核苷磷酸化酶的工程菌构建
10
作者 段佩玲 王振宇 刘国生 《郑州铁路职业技术学院学报》 2022年第4期60-62,67,共4页
使用PCR扩增技术对来源于AEM0812菌株的核苷磷酸化酶基因进行扩增。利用克隆载体pD18-T进行连接,构建重组质粒pMD18-T-deoD,再将其导入Escherichia coli DH5α菌体内,克隆目的基因。利用表达载体pET-28a与目的基因构建重组质粒pET-28a-d... 使用PCR扩增技术对来源于AEM0812菌株的核苷磷酸化酶基因进行扩增。利用克隆载体pD18-T进行连接,构建重组质粒pMD18-T-deoD,再将其导入Escherichia coli DH5α菌体内,克隆目的基因。利用表达载体pET-28a与目的基因构建重组质粒pET-28a-deoD,导入E.coli BL21(DE3)菌体内,获得工程菌E.coli(deoD)。利用IPTG进行诱导表达,采用SDS-PAGE方法检测到在大约27 KD处出现了明显的蛋白条带,其分子量与已知的嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)的分子量(25.82 KD)一致,这表明在E.coli(deoD)中成功表达出deoD基因,同时表明成功构建了嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)工程菌。 展开更多
关键词 嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)表达 工程菌 基因克隆与表达
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
关于我们 | 版权声明 | 联系我们 | 帮助中心| 意见反馈
主办单位：上海市教育委员会
技术支持：重庆维普资讯有限公司
渝公网安备 50019002500403号
使用帮助 返回顶部