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谷氨酸脱羧酶和谷氨酸脱氢酶基因的串联表达及其对GABA产量影响被引量：1: 1; 作者罗秀针林燕燕 +2 位作者陈雅静张文华谢伟容《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第7期744-749,共6页; 为构建一株无外源L-谷氨酸(L-Glu)条件下可直接转化葡萄糖生产γ-氨基丁酸(GABA)的安全基因工程菌,将植物乳杆菌GABA合成途径的关键酶——谷氨酸脱羧酶基因gadB与L-Glu合成途径中的关键酶谷氨酸脱氢酶基因gdh进行串联表达,导入产谷氨酸... 展开更多; 关键词谷氨酸脱羧酶谷氨酸脱氢酶谷氨酸生产菌SF016 基因串联表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

家蚕抗菌肽moricin基因的串联表达与切割产物的活性检测被引量：5: 2; 作者周雍吴程程 +5 位作者斯洪强李丹吕正兵盛清张耀洲聂作明《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期864-869,共6页; 家蚕抗菌肽是蚕体内具有免疫功能的碱性多肽,具有抑制病菌生长和杀伤癌变细胞的作用。以家蚕抗菌肽moricin为研究对象,经密码子优化,设计合成了家蚕抗菌肽moricin基因多拷贝的串联体6×moricin基因,并将其克隆到大肠杆菌原核表达载... 展开更多; 关键词家蚕抗菌肽 moricin 基因串联表达抑菌活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗菌肽(tachyplesin Ⅰ)串联基因的构建、表达及抗菌活性被引量：2: 3; 作者谢海伟孙兰萍 +2 位作者王娣许晖郭勇《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第4期640-647,共8页; 为了实现通过基因工程方法制备具有稳定结构的抗菌肽tachyplesinⅠ,采取了tachyplesinⅠ基因串联表达的方法。实验以高拷贝穿梭表达载体pSBPTQ为表达载体,通过RT-PCR扩增tachyplesinⅠ基因(tac)和采用直接退火的方法合成tachyplesinⅠ... 展开更多; 关键词抗菌肽tachyplesinⅠ 表达载体构建串联基因表达抗菌活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒gB蛋白抗原表位基因串联构建及原核表达被引量：2: 4; 作者王雨吉艺宽 +3 位作者程艺向柯宇张宝石琚春梅《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期810-815,共6页; 本试验通过自行设计两段引物,利用重叠延伸PCR方法,将伪狂犬病病毒(PRV)gB基因两段优势抗原表位序列串联,克隆至pMD18-T载体,测序正确后双酶切连接至pET-32a(+)载体,构建重组质粒;重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)受体菌,经IPTG诱导后,... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 GB基因抗原表位串联基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

食物中毒菌多联融合毒素Hc-VT1B-SEA-VT2B-SEB的表达及免疫学特性研究被引量：1: 5; 作者孟宪梅于师宇 +4 位作者李兆辉任洪林卢士英任立松柳增善《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1088-1092,共5页; 目的构建食物中毒菌多联融合毒素基因及重组表达载体,制备抗5种毒素的血清抗体。方法采用一定的linker序列(G-P-G-P-G)将克隆的3种食物中毒菌的5个毒素基因片段进行串联,并定向克隆到表达载体pET-22b(+)的NcoI和XhoI位点之间,构建五联... 展开更多; 关键词食物中毒菌融合毒素基因串联表达抗体免疫学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌半胱氨酸合成途径强化对谷胱甘肽生物合成的影响被引量：2: 6; 作者万俊仙张静 +1 位作者吴辉李志敏《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期61-65,共5页; 谷胱甘肽(Glutathione,GSH)是一种细胞中广泛存在的活性巯基短肽,因其具有重要的生理活性功能而得到广泛关注。通过在Escherichia coli MG1655中过表达3-磷酸甘油酸脱氢酶(PGDH)和丝氨酸酰基转移酶(SAT),并与来源于Actinobacillus succi... 展开更多; 关键词谷胱甘肽半胱氨酸基因串联表达摇瓶发酵; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名谷氨酸脱羧酶和谷氨酸脱氢酶基因的串联表达及其对GABA产量影响被引量：1: 1; 作者罗秀针林燕燕陈雅静张文华谢伟容; 机构漳州卫生职业学院; 出处《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第7期744-749,共6页; 基金漳州市自然科学基金项目(ZZ2016J37); 文摘为构建一株无外源L-谷氨酸(L-Glu)条件下可直接转化葡萄糖生产γ-氨基丁酸(GABA)的安全基因工程菌,将植物乳杆菌GABA合成途径的关键酶——谷氨酸脱羧酶基因gadB与L-Glu合成途径中的关键酶谷氨酸脱氢酶基因gdh进行串联表达,导入产谷氨酸菌株谷氨酸棒杆菌SF016中,检测其对L-Glu及GABA产量的影响。经摇瓶发酵40h重组菌SF016-pgg谷氨酸脱羧酶的酶活达0.63mol·min^(-1)·g^(-1),而谷氨酸脱氢酶的酶活达0.131mol·min^(-1)·g^(-1),比原始菌株提高了约2.0倍。重组菌SF016-pgg以葡萄糖为碳源,通过40h发酵罐发酵可积累产生23.12g·L^(-1)的GABA,说明串联表达gadB和gdh基因有效实现重组菌在以葡萄糖为单一碳源、无外源L-Glu存在的培养基中直接发酵生产GABA。该生产方式的成本明显降低,且产品的安全性高,可用于食品、饲料或医药等行业。; 关键词谷氨酸脱羧酶谷氨酸脱氢酶谷氨酸生产菌SF016 基因串联表达; Keywords glutamate decarboxylase glutamate dehydrogenase glutamic acid producing strain co-expression; 分类号 Q784 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名家蚕抗菌肽moricin基因的串联表达与切割产物的活性检测被引量：5: 2; 作者周雍吴程程斯洪强李丹吕正兵盛清张耀洲聂作明; 机构浙江理工大学生命科学学院; 出处《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期864-869,共6页; 基金国家级大学生创新创业训练计划项目(No.201410338015) 浙江理工大学研究生创新研究项目(No.YCX12034); 文摘家蚕抗菌肽是蚕体内具有免疫功能的碱性多肽,具有抑制病菌生长和杀伤癌变细胞的作用。以家蚕抗菌肽moricin为研究对象,经密码子优化,设计合成了家蚕抗菌肽moricin基因多拷贝的串联体6×moricin基因,并将其克隆到大肠杆菌原核表达载体pET-28a(+),转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,串联表达了融合抗菌肽6×moricin,且表达量较高。进一步通过盐酸羟胺专一性切割串联表达的融合抗菌肽6×moricin,获得相应的抗菌肽单体。体外抑菌试验验证,切割的抗菌肽moricin单体对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有较强的抑制效果,且抑菌圈大小随抗菌肽单体浓度增加而增加。采用基因串联表达技术有望解决抗菌肽对宿主大肠杆菌的抑制作用,为利用生物反应器规模化生产家蚕抗菌肽开辟了新的技术途径。; 关键词家蚕抗菌肽 moricin 基因串联表达抑菌活性; Keywords Bombyx mori antimicrobial peptide moricin Expression of tandem genes Antibacterial activity; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S881.2 [农业科学—特种经济动物饲养]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗菌肽(tachyplesin Ⅰ)串联基因的构建、表达及抗菌活性被引量：2: 3; 作者谢海伟孙兰萍王娣许晖郭勇; 机构蚌埠学院生物与食品工程系华南理工大学生物科学与工程学院; 出处《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第4期640-647,共8页; 基金安徽省自然科学基金项目(120808SQC60) 安徽省高校省级优秀人才基金项目(2011SQRL166); 文摘为了实现通过基因工程方法制备具有稳定结构的抗菌肽tachyplesinⅠ,采取了tachyplesinⅠ基因串联表达的方法。实验以高拷贝穿梭表达载体pSBPTQ为表达载体,通过RT-PCR扩增tachyplesinⅠ基因(tac)和采用直接退火的方法合成tachyplesinⅠ串联基因(2tac)。构建重组表达载体pSBPTQ-TAC和pSBPTQ-2TAC,转化到枯草杆菌WB800实现高效表达,经2%蔗糖诱导获得表达串联产物(2TAC)和TAC。通过离子交换柱层析纯化后得表达产物2TAC和TAC,2TAC经BrCN水解后,对表达产物抑菌活性分析,观察发酵液上清对大肠杆菌(E.coli K88)和伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)的抑菌圈和细胞微观形态的变化。实验结果表明:基因tac和2tac在枯草杆菌中表达成功,表达产物在发酵上清液中的含量分别约为8.25、17.36 mg L 1;表达产物TAC和2TAC对大肠杆菌K88和伤寒沙门氏菌都具有明显的抑菌作用,2TA C经BrCN水解产物抑菌活力高于TAC。; 关键词抗菌肽tachyplesinⅠ 表达载体构建串联基因表达抗菌活性; Keywords antimicrobial peptide tachyplesin I construction of expression vector expression of tandem-arranged gene antimicrobial activity; 分类号 Q812 [生物学—生物工程] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒gB蛋白抗原表位基因串联构建及原核表达被引量：2: 4; 作者王雨吉艺宽程艺向柯宇张宝石琚春梅; 机构华南农业大学兽医学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期810-815,共6页; 基金国家自然科学基金(31001074); 文摘本试验通过自行设计两段引物,利用重叠延伸PCR方法,将伪狂犬病病毒(PRV)gB基因两段优势抗原表位序列串联,克隆至pMD18-T载体,测序正确后双酶切连接至pET-32a(+)载体,构建重组质粒;重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)受体菌,经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE和Western blotting检测融合蛋白表达情况。经检测,诱导后的重组蛋白获得表达,重组蛋白大小约为54ku,其中串联蛋白大小约为34ku。该重组蛋白可与伪狂犬病病毒gB蛋白单克隆抗体发生特异性反应,表明重组蛋白的抗原性良好。; 关键词伪狂犬病病毒 GB基因抗原表位串联基因表达; Keywords pseudorabies virus （PRV） gB gene epitope tandem gene expression; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名食物中毒菌多联融合毒素Hc-VT1B-SEA-VT2B-SEB的表达及免疫学特性研究被引量：1: 5; 作者孟宪梅于师宇李兆辉任洪林卢士英任立松柳增善; 机构吉林大学畜牧兽医学院教育部人兽共患病重点实验室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1088-1092,共5页; 基金国家自然基金资助项目(30371059); 文摘目的构建食物中毒菌多联融合毒素基因及重组表达载体,制备抗5种毒素的血清抗体。方法采用一定的linker序列(G-P-G-P-G)将克隆的3种食物中毒菌的5个毒素基因片段进行串联,并定向克隆到表达载体pET-22b(+)的NcoI和XhoI位点之间,构建五联融合毒素基因及重组表达载体,表达产物经切胶回收初步纯化后免疫獭兔,制备抗血清,利用ELISA和琼脂扩散试验检测抗体和5种毒素反应的特异性和敏感性。结果构建了重组融合毒素(命名为F5)Hc-VT1B-SEA-VT2B-SEB基因和重组表达载体F5-22b,且在表达宿主菌E.coliBL21中得到有效表达(9.90%),基因序列全长2937bp,编码成熟蛋白979个氨基酸,融合蛋白分子量112.369ku,测序结果与设计序列(GenBank)100%同源。表达产物经初步纯化后免疫獭兔获得抗五种毒素的血清抗体,且具有较高的特异性和敏感性。结论成功构建了融合毒素基因,获得了抗五种毒素的血清抗体,本实验结果为下一步建立食品广谱、快速免疫学检测新方法奠定了基础。; 关键词食物中毒菌融合毒素基因串联表达抗体免疫学特性; Keywords foodborn poisoning bacteria,recombinant toxin,gene linking expression,antibody,immunological character; 分类号 TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学] TQ78 [化学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌半胱氨酸合成途径强化对谷胱甘肽生物合成的影响被引量：2: 6; 作者万俊仙张静吴辉李志敏; 机构华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室; 出处《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期61-65,共5页; 基金国家自然科学青年基金项目(21406065) 上海市科委产学研医合作项目(13DZ1930200) 生物反应器工程国家重点实验室开放课题资助项目(2060204); 文摘谷胱甘肽(Glutathione,GSH)是一种细胞中广泛存在的活性巯基短肽,因其具有重要的生理活性功能而得到广泛关注。通过在Escherichia coli MG1655中过表达3-磷酸甘油酸脱氢酶(PGDH)和丝氨酸酰基转移酶(SAT),并与来源于Actinobacillus succinogenes的谷胱甘肽双功能合成酶GshF串联表达,成功构建了半胱氨酸合成途径强化的重组菌株。摇瓶发酵结果显示,在含有5g/L葡萄糖的LB培养基中,重组菌株的生长相对于原始菌降低,但其GSH的产量达到了0.97mmol/L,为原始菌的1.56倍,表明通过增加GSH合成前体半胱氨酸的供应可以显著提高GSH的生物合成水平。; 关键词谷胱甘肽半胱氨酸基因串联表达摇瓶发酵; Keywords Glutathione L-cysteine tandem gene expression shaking fermentation; 分类号 TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	谷氨酸脱羧酶和谷氨酸脱氢酶基因的串联表达及其对GABA产量影响	罗秀针林燕燕陈雅静张文华谢伟容	《福建农业学报》 CAS 北大核心	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	家蚕抗菌肽moricin基因的串联表达与切割产物的活性检测	周雍吴程程斯洪强李丹吕正兵盛清张耀洲聂作明	《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心	2015	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	抗菌肽(tachyplesin Ⅰ)串联基因的构建、表达及抗菌活性	谢海伟孙兰萍王娣许晖郭勇	《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	伪狂犬病病毒gB蛋白抗原表位基因串联构建及原核表达	王雨吉艺宽程艺向柯宇张宝石琚春梅	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	食物中毒菌多联融合毒素Hc-VT1B-SEA-VT2B-SEB的表达及免疫学特性研究	孟宪梅于师宇李兆辉任洪林卢士英任立松柳增善	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	大肠杆菌半胱氨酸合成途径强化对谷胱甘肽生物合成的影响	万俊仙张静吴辉李志敏	《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料