葛根素对糖尿病大鼠主动脉糖基化终产物的形成及其受体表达的影响 被引量：38

1

作者 茅彩萍 顾振纶 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期393-397,共5页

目的　观察葛根素 (Puerarin ,Pue)对糖尿病 (DM)大鼠主动脉糖基化终产物 (AGEs)的形成及其受体 (RAGEmRNA)表达的影响。方法　以STZ诱导DM大鼠模型 ,并将DM大鼠随机分为DM对照组 (DM)、不同剂量葛根素治疗组 (0 5、0 2 5、0 1 2 5g&... 目的　观察葛根素 (Puerarin ,Pue)对糖尿病 (DM)大鼠主动脉糖基化终产物 (AGEs)的形成及其受体 (RAGEmRNA)表达的影响。方法　以STZ诱导DM大鼠模型 ,并将DM大鼠随机分为DM对照组 (DM)、不同剂量葛根素治疗组 (0 5、0 2 5、0 1 2 5g·kg-1 ,ig )和氨基胍治疗组 (0 1g·kg-1 ,ig) ,另设一正常对照组 ,给药 1 2wk后 ,分别以葡萄糖氧化酶法测定血糖 ,NBT法测定血清果糖胺的含量 ,采用荧光法、RT PCR方法分别对主动脉AGEs的沉积及RAGEmRNA的表达进行检测。结果　Pue治疗后DM大鼠血糖、血清果糖胺含量明显降低 ,主动脉AGEs的形成量也明显低于DM模型组 (P <0 0 1 ) ,其治疗作用与氨基胍 (AG)相当 ;RAGE主要在内皮细胞表达 ,其表达量与AGEs的沉积量呈明显正相关 ,而葛根素也可明显下调RAGEmRNA在DM大鼠主动脉中的表达 (P<0 0 1 )。结论　葛根素可通过有效降低糖尿病大鼠血糖、血清果糖胺的含量 ,减少主动脉AGEs的沉积 ,下调主动脉中RAGEmRNA的表达 。 展开更多

关键词 葛根素 糖尿病 主动脉 果糖胺 糖基化终产物 糖 基化终产物受体基因表达

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人晚期糖基化终产物受体胞质内段融合蛋白表达载体的构建与表达 被引量：7

2

作者 赵善超 刘靖华 +4 位作者 李志杰 秦清和 邓鹏 侯凡凡 姜勇 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第12期1314-1316,共3页

目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白。方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中。重组质粒经PC... 目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白。方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中。重组质粒经PCR、酶切、序列鉴定分析后,转化大肠杆菌BL21,以异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导产生hRAGE胞质内段的GST融合蛋白。结果PCR、酶切和测序结果表明所克隆的GST/hRAGE-C原核表达载体完全正确,继而表达、纯化获得了相对分子质量约35 000的融合蛋白(符合预期大小)。结论将hRAGE胞质内段构建于含有GST标记的载体上并获得融合蛋白的高效表达。 展开更多

关键词 人晚期糖基化终产物受体 融合蛋白 载体 基因表达

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人可溶性晚期糖基化终产物受体的原核表达及活性鉴定 被引量：3

3

作者 赵善超 姜勇 +7 位作者 刘靖华 李志杰 邓鹏 张桂林 刘志强 张训 侯凡凡 郑少斌 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第7期769-773,共5页

目的构建人可溶性晚期糖基化终产物受体(hsRAGE)His融合蛋白表达载体并在原核细胞表达与纯化。方法PCR扩增hRAGE基因编码区的胞质外段,利用分子克隆技术将其重组于pET-14b载体中。利用酶切、序列分析鉴定克隆正确性。转化大肠杆菌BL21(D... 目的构建人可溶性晚期糖基化终产物受体(hsRAGE)His融合蛋白表达载体并在原核细胞表达与纯化。方法PCR扩增hRAGE基因编码区的胞质外段,利用分子克隆技术将其重组于pET-14b载体中。利用酶切、序列分析鉴定克隆正确性。转化大肠杆菌BL21(DE)3,用异丙基b-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达。以尿素对获得的包涵体进行处理,用金属螯合亲和层析的方法纯化融合蛋白并进行复性。以Western印迹和ELISA法对融合蛋白的免疫原性及与AGE的结合活性进行鉴定。结果克隆的hsRAGE完全正确,经过表达与纯化,获得了相对分子质量约45000的融合蛋白。纯化得到的变性蛋白经复性后可被相应抗体识别。所得到的hsRAGE具有与AGE相互结合的活性,并能够抑制AGE诱导的内皮细胞NF-kB的表达。结论成功地构建了hsRAGE融合蛋白原核表达载体且获得高效表达,得到大量的复性蛋白;该蛋白具有特异的免疫原性,保持与AGE的结合活性,并能够有效阻断AGE-RAGE相互作用。 展开更多

关键词 晚期糖基化终产物 原核表达 受体 受体 可溶性 融合蛋白/生物活性

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糖基化终产物对单核细胞源性巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活型受体γ表达的影响 被引量：4

4

作者 杨启红 徐强 司良毅 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2008年第3期214-217,共4页

目的研究糖基化终产物(AGEs)对单核细胞源性巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)表达的影响。方法将AGEs-牛血清白蛋白(AGEs-BSA)与佛波酯(PMA)诱导分化72h后的巨噬细胞共同孵育,按加入AGEs-BSA的浓度不同分为A组(50mg/L)、... 目的研究糖基化终产物(AGEs)对单核细胞源性巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)表达的影响。方法将AGEs-牛血清白蛋白(AGEs-BSA)与佛波酯(PMA)诱导分化72h后的巨噬细胞共同孵育,按加入AGEs-BSA的浓度不同分为A组(50mg/L)、B组(100mg/L)、C组(200mg/L)、D组(400mg/L),另外仅加100mg/L BSA的为对照组,各组分别处理细胞24h,另用200mg/L AGEs-BSA分别于0、12、24、36和48h时处理细胞,运用RT-PCR和Western blot方法检测细胞PPARγmRNA和蛋白的表达。结果细胞PPARγmRNA和蛋白的表达量A组为0.727±0.041和1.260±0.033、B组0.655±0.029和1.059±0.047、C组0.527±0.032和0.899±0.036、D组0.353±0.026和0.415±0.025;较对照组明显降低(P<0.05)。不同时相点作用下,细胞PPARγmRNA和蛋白表达量12h为0.918±0.048和2.830±0.063、24h为0.718±0.023和1.288±0.006、36h为0.567±0.028和0.876±0.037、48h为0.367±0.019和0.455±0.009;较0h时相点比较明显降低(P<0.05)。结论AGEs可抑制单核细胞源性巨噬细胞PPARγmRNA和蛋白的表达,呈浓度和时间依赖性。 展开更多

关键词 糖尿病 糖基化 过氧化物酶体增殖物激活受体 巨噬细胞 基因表达

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晚期糖化终产物受体、核因子-κB双基因反义RNA抑制糖化终产物刺激的炎症因子表达 被引量：1

5

作者 游捷 赵蓉 +1 位作者 刘礼斌 林建银 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第7期784-788,共5页

目的:观察晚期糖化终产物受体(receptor ofadvanced glycation endproducts,RAGE)、核因子-κB(NF-κB)双基因反义RNA对晚期糖化终产物(ad-vanced glycation endproducts,AGEs)刺激ECV304细胞分泌炎症因子的影响。方法:酶联免疫吸附测定... 目的:观察晚期糖化终产物受体(receptor ofadvanced glycation endproducts,RAGE)、核因子-κB(NF-κB)双基因反义RNA对晚期糖化终产物(ad-vanced glycation endproducts,AGEs)刺激ECV304细胞分泌炎症因子的影响。方法:酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法观察AGEs对ECV304细胞分泌TNF-α和IL-6的影响,应用脂质体将RAGE、NF-κB单/双基因反义RNA转染ECV304,流式细胞仪、筛选低表达RAGE、NF-κB的细胞株,观察RAGE、NF-κB双基因反义RNA对AG-Es刺激ECV304细胞分泌TNF-α和IL-6的影响。结果:AGEs可引起ECV304细胞分泌TNF-α和IL-6增加,诱导作用具有时间和剂量依赖规律。稳定转染筛选出低表达RAGE、NF-κB的细胞株,在AGEs100 mg.L-1诱导下双基因转染细胞ECV-asRAGE-asP65克隆中RAGE、NF-κBp65表达抑制率分别为(62.2±8.7)%及(37.2±7.1)%。AGEs 100 mg.L-1刺激下ECV-asRAGE-asP65克隆分泌TNF-αI、L-6较空载体转染细胞、单基因转染细胞减少更明显(P<0.01)。结论:RAGE、NF-κB双基因反义RNA可抑制AGEs刺激的ECV304细胞的TNF-α和IL-6释放。 展开更多

关键词 RNA 糖基化终产物 受体 核因子-ΚB 基因转染 炎症因子

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糖基化终产物抑制THP-1巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达

6

作者 杨启红 徐强 +1 位作者 张红 司良毅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第2期147-151,共5页

目的:观察糖基化终产物(AGEs)对THP-1巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨AGEs在糖尿病动脉粥样硬化中可能的作用。方法:用佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞72h使其分化为巨噬细胞,并将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-B... 目的:观察糖基化终产物(AGEs)对THP-1巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨AGEs在糖尿病动脉粥样硬化中可能的作用。方法:用佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞72h使其分化为巨噬细胞,并将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-BSA)与巨噬细胞共同孵育,运用RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测巨噬细胞PPARγmRNA和蛋白的表达水平。结果:PMA诱导72h后,THP-1细胞停止增殖,由单核细胞分化成为巨噬细胞。50、100、200和400μg/mlAGE-BSA处理24h后,巨噬细胞PPARγmRNA相对表达量分别是1.235±0.044、0.752±0.055、0.494±0.026、0.277±0.025;PPARγ蛋白的平均积分光密度值分别为36.460±0.625、24.561±0.636、19.326±0.803、12.715±0.752,二者较100μg/ml牛血清白蛋白(BSA)组均明显降低(P<0.05)。200μg/ml AGE-BSA作用12、24、36和48h后,巨噬细胞PPARγmRNA相对表达量分别是1.564±0.060、1.260±0.043、0.467±0.033、0.360±0.012;PPARγ蛋白的平均积分光密度值分别为32.502±0.739、22.234±0.835、16.568±0.683、11.537±0.547,二者较0h组也明显降低(P<0.05)。结论:AGEs可下调THP-1巨噬细胞PPARγmRNA和蛋白的表达水平,且呈浓度和时间依赖性。 展开更多

关键词 糖基化终产物 巨噬细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 基因表达 动脉粥样硬化

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晚期糖基化终产物受体Gly82Ser多态性与2型糖尿病相关性的研究 被引量：4

7

作者 高锦雄 许顶立 +3 位作者 邵亚辉 赖文岩 林晟 张彬 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期219-222,共4页

目的探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)基因Gly82Ser多态性在中国汉族人中的分布特点和对中国2型糖尿病易感性的影响。方法应用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测194例2型糖尿病患者和546例非糖尿病对照者的Gly82Ser多态性基因... 目的探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)基因Gly82Ser多态性在中国汉族人中的分布特点和对中国2型糖尿病易感性的影响。方法应用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测194例2型糖尿病患者和546例非糖尿病对照者的Gly82Ser多态性基因型。结果中国人RAGE基因Gly82Ser多态基因型以GG型、等位基因以G型为主,其频率分布显著高于其他国家和种族。2型糖尿病患者和非糖尿病对照者间,RAGE基因Gly82Ser多态性的基因型(GG、GS、SS)频率或等位基因(G、S)分布皆无显著性差异(P>0.05)。结论RAGE基因Gly82Ser多态性与中国2型糖尿病的发病、发展无关,提示RAGE基因Gly82Ser并非中国2型糖尿病的易感基因。然而,与其他国家、种族相比,RAGE基因Gly82Ser多态性在中国汉族人群、中国2型糖尿病人群呈高分布频率。 展开更多

关键词 糖基化终产物受体 Gly82Set 基因多态性 糖尿病

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糖基化终产物对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达的影响 被引量：1

8

作者 杨启红 徐强 +1 位作者 张红 司良毅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第17期1630-1633,共4页

目的观察糖基化终产物(advanced glycosylation end-products,AGEs)对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响。方法将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-modified bovine ... 目的观察糖基化终产物(advanced glycosylation end-products,AGEs)对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响。方法将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-modified bovine serum albumin,AGE-BSA)与佛波酯(PMA)诱导分化72h的THP-1巨噬细胞共同孵育,运用RT-PCR和Western blot分别检测巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果PMA诱导72h后,THP-1细胞停止增殖,由单核细胞分化成为巨噬细胞。用50、100、200和400mg/L AGE-BSA处理巨噬细胞后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐增加;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐增加,二者较对照牛血清白蛋白组明显增加(P<0.05)。用200mg/LAGE-BSA作用巨噬细胞0、12、24、36h和48h后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐升高;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐升高,较0h明显增加(P<0.05)。结论AGEs可上调THP-1巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,呈浓度和时间依赖性,这可能与糖尿病动脉粥样硬化有关。 展开更多

关键词 糖尿病 糖基化终产物 酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1 基因表达

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晚期糖基化终末产物受体不同突变体真核表达载体的构建和表达

9

作者 程蔚蔚 李煜生 +4 位作者 龚小卫 赵琳琳 王继刚 邓鹏 姜勇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1779-1781,1785,共4页

目的构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体(RAGE)不同突变体的真核细胞表达载体。方法采用定点突变技术将亚克隆在载体pcDNA3-HA上的野生型RAGE构建成不同突变体pcDNA3-HA-RAGE(S391A)、pcDNA3-HA-RAGE(S399A)、pcDNA3-HA-RAGE(S400A)... 目的构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体(RAGE)不同突变体的真核细胞表达载体。方法采用定点突变技术将亚克隆在载体pcDNA3-HA上的野生型RAGE构建成不同突变体pcDNA3-HA-RAGE(S391A)、pcDNA3-HA-RAGE(S399A)、pcDNA3-HA-RAGE(S400A)、pcDNA3-HA-RAGE(T401A),经测序鉴定正确后转染HEK293细胞,利用Westernblotting检测各突变体的表达。结果RAGE不同突变体经测序鉴定正确无误后,在HEK293细胞中得到高量表达。结论成功构建了RAGE不同突变体的真核表达载体,并在真核细胞中进行了表达,为进一步研究RAGE在细胞信号转导中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 晚期糖基化终末产物受体 定点突变 载体构建 基因表达

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血清ANXA7、miR-211水平及RAGE基因多态性与吸烟诱导胃癌ESD术后复发的相关性研究 被引量：5

10

作者 张敏 周晓晴 +2 位作者 李保华 罗超 唐侨 《海南医学院学报》 CAS 2019年第14期1070-1073,共4页

目的:探究血清ANXA7、miR-211水平及RAGE基因多态性与吸烟诱导胃癌ESD术后复发的相关性。方法:随机选择400例进行ESD治疗的胃癌患者,根据是否复发分为复发组和未复发组,根据是否吸烟分为吸烟复发和吸烟未复发组。比较各组患者的血清ANXA... 目的:探究血清ANXA7、miR-211水平及RAGE基因多态性与吸烟诱导胃癌ESD术后复发的相关性。方法:随机选择400例进行ESD治疗的胃癌患者,根据是否复发分为复发组和未复发组,根据是否吸烟分为吸烟复发和吸烟未复发组。比较各组患者的血清ANXA7、miR-211水平及RAGE基因多态性。结果:复发组患者的吸烟率、以及血清ANXA7和miR-211的水平显著高于未复发组,并且RAGE基因rs2070600和rs184003位点的多态性可能与胃癌的复发有关。吸烟复发组患者的血清ANXA7和miR-211的水平显著高于吸烟未复发组,并且RAGE基因rs2070600和rs184003位点的多态性可能与吸烟诱发胃癌ESD术后的复发有关。血清ANXA7、miR-211以及RAGE基因的多态性可能与吸烟诱发胃癌ESD术后复发有关。结论:吸烟可能是诱导胃癌ESD术后复发的因素之一,并且吸烟可能引起血清ANXA7、miR-211的升高以及RAGE基因的突变,从而诱发胃癌ESD术后复发。 展开更多

关键词 胃癌 吸烟 膜联蛋白-VⅡ miR-211 晚期糖基化终产物受体 基因多态性 复发

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RAGE在恶性肿瘤中的研究进展 被引量：4

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作者 上官翰京 李志春 张晖萍 《海南医学院学报》 CAS 2007年第1期79-82,共4页

关键词 肿瘤 糖基化终产物 高级 基因表达调控 综述文献

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