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以GLP-1受体为靶点的药物筛选模型的建立及功能鉴定
被引量：
5
1
作者
黎思彤
郑雪萍
+4 位作者
杨学敏
聂涛
陈健文
刘培庆
李民
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期285-289,共5页
目的以GLP-1受体为靶点,建立GLP-1类似物活性检测的细胞模型,为GLP-1类似物以及GLP-1受体激动剂的药物筛选提供一种简单可靠的评价方法。方法首先将人源GLP-1受体基因插入pEGFP-N3,构建真核表达载体pEGFP-GLP-1R,并转染至HEK293A细胞中,...
目的以GLP-1受体为靶点,建立GLP-1类似物活性检测的细胞模型,为GLP-1类似物以及GLP-1受体激动剂的药物筛选提供一种简单可靠的评价方法。方法首先将人源GLP-1受体基因插入pEGFP-N3,构建真核表达载体pEGFP-GLP-1R,并转染至HEK293A细胞中,经G418压力筛选后获得稳定表达GLP-1R-GFP的293A细胞株,然后通过GFP荧光信号和Western blot检测GLP-1R-GFP融合蛋白在该细胞中的表达与分布;最后利用GLP-1类似物利拉鲁肽刺激细胞,均相时间分辨荧光法检测细胞内cAMP含量变化。结果成功构建了GLP-1R-GFP-293A稳转细胞株,GLP-1RGFP蛋白主要分布在细胞膜表面,该细胞对GLP-1类似物利拉鲁肽具有高灵敏度和产生cAMP的特异性反应。结论利用所构建的细胞模型,可对小分子和GLP-1类似物进行体外活性分析,为筛选GLP-1受体激动剂奠定了模型基础。
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关键词
CAMP
GLP-1受体
细胞模型
融合蛋白
均相时间分辨荧光法
糖尿病
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职称材料
题名
以GLP-1受体为靶点的药物筛选模型的建立及功能鉴定
被引量：
5
1
作者
黎思彤
郑雪萍
杨学敏
聂涛
陈健文
刘培庆
李民
机构
中山大学药学院新药筛选中心
深圳翰宇药业股份有限公司
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期285-289,共5页
基金
广东省自然科学基金资助项目(No2016A030313335)
文摘
目的以GLP-1受体为靶点,建立GLP-1类似物活性检测的细胞模型,为GLP-1类似物以及GLP-1受体激动剂的药物筛选提供一种简单可靠的评价方法。方法首先将人源GLP-1受体基因插入pEGFP-N3,构建真核表达载体pEGFP-GLP-1R,并转染至HEK293A细胞中,经G418压力筛选后获得稳定表达GLP-1R-GFP的293A细胞株,然后通过GFP荧光信号和Western blot检测GLP-1R-GFP融合蛋白在该细胞中的表达与分布;最后利用GLP-1类似物利拉鲁肽刺激细胞,均相时间分辨荧光法检测细胞内cAMP含量变化。结果成功构建了GLP-1R-GFP-293A稳转细胞株,GLP-1RGFP蛋白主要分布在细胞膜表面,该细胞对GLP-1类似物利拉鲁肽具有高灵敏度和产生cAMP的特异性反应。结论利用所构建的细胞模型,可对小分子和GLP-1类似物进行体外活性分析,为筛选GLP-1受体激动剂奠定了模型基础。
关键词
CAMP
GLP-1受体
细胞模型
融合蛋白
均相时间分辨荧光法
糖尿病
Keywords
cAMP
GLP-1 R
cell model
fusion protein
HTRF
diabetes
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R587.1 [医药卫生—内分泌]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
以GLP-1受体为靶点的药物筛选模型的建立及功能鉴定
黎思彤
郑雪萍
杨学敏
聂涛
陈健文
刘培庆
李民
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
5
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