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应用穿孔全细胞膜片钳记录技术研究培养大鼠耳蜗螺旋神经节神经元的基本电生理特性 被引量：1
1
作者 查定军 王智明 +3 位作者 薛涛 林颖 邱建华 李云庆 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期157-160,共4页
为了深入了解耳蜗螺旋神经节(SG)神经元的基本电生理特点,本研究首先成功培养了急性分离的大鼠SG神经元,然后采用穿孔全细胞膜片钳记录技术观察了培养SG神经元的基本电生理特性。结果表明,可从培养的SG神经元记录到动作电位,且不同的SG... 为了深入了解耳蜗螺旋神经节(SG)神经元的基本电生理特点,本研究首先成功培养了急性分离的大鼠SG神经元,然后采用穿孔全细胞膜片钳记录技术观察了培养SG神经元的基本电生理特性。结果表明,可从培养的SG神经元记录到动作电位,且不同的SG神经元具有异质性的放电特征。上述结果提示穿孔全细胞膜片钳记录技术可用于体外培养耳蜗SG神经元的电生理特征研究,为开展听觉信息传导和调控的功能研究开辟了新途径。 展开更多
关键词 螺旋神经节神经元 细胞培养 穿孔全细胞膜片钳记录 大鼠
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一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法 被引量：1
2
作者 王文伟 祁小燕 张雪梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1150-1152,共3页
目的:探讨一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法。此方法使玻璃电极与细胞内液保持电化学连续性,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜造成的破膜难和封接不稳,以及常规全细胞膜片钳破膜后造成的封接不... 目的:探讨一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法。此方法使玻璃电极与细胞内液保持电化学连续性,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜造成的破膜难和封接不稳,以及常规全细胞膜片钳破膜后造成的封接不稳。方法:以成骨细胞为研究对象,采用β-七叶素穿孔全细胞膜片钳技术,记录骨细胞L型钙通道电流。结果:采用这种穿孔全细胞膜片钳技术,能有效记录到成骨细胞上L型钙通道电流。结论:穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法,该方法的建立为今后更深入的研究疾病中成骨细胞的病理生理机制提供实验基础。 展开更多
关键词 骨细胞 L型钙通道电流 穿孔全细胞膜片钳 β-七叶素
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全细胞膜片钳技术在神经元钙通道药理研究中的应用 被引量：3
3
作者 林智颖 张静 +1 位作者 黄天文 陈晓春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1327-1328,共2页
全细胞膜片钳技术是研究离子通道和药物对离子通道影响的最重要的技术之一,但是由于其对实验技术要求高,对实验标本制备和实验环境、实验用溶液等条件均有严格要求等原因致使其在实际运用中较为困难。本文报告了运用全细胞膜片钳技术进... 全细胞膜片钳技术是研究离子通道和药物对离子通道影响的最重要的技术之一,但是由于其对实验技术要求高,对实验标本制备和实验环境、实验用溶液等条件均有严格要求等原因致使其在实际运用中较为困难。本文报告了运用全细胞膜片钳技术进行神经元钙通道药理研究的一些经验。 展开更多
关键词 全细胞膜片钳技术 海马神经元 电压门控的钙通道 人参皂苷RB1 原代培养 Y管
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穿孔膜片钳方法记录L型钙通道及脱氢紫堇碱对其影响的研究 被引量：10
4
作者 孟红旭 王宝 刘建勋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1051-1054,共4页
目的比较全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录大鼠心室肌细胞L型钙通道电流随时间经过的变化差异,并观察脱氢紫堇碱对L型钙通道的影响。方法采用全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录急性分离的大鼠心室肌细胞L型钙通道电流。结果采用全细胞... 目的比较全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录大鼠心室肌细胞L型钙通道电流随时间经过的变化差异,并观察脱氢紫堇碱对L型钙通道的影响。方法采用全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录急性分离的大鼠心室肌细胞L型钙通道电流。结果采用全细胞膜片钳法记录到的L型钙通道电流峰值在15 min内衰减了(34±23)%(n=10),采用穿孔膜片钳方法记录到的L型钙通道电流峰值15 min内仅衰减了(2.7±3.4)%(n=9);采用穿孔膜片钳方法能够记录到人参皂苷Re(100μmol.L-1)的抑制效应,而采用全细胞膜片钳方法产生的电流衰减几乎完全掩盖了人参皂苷Re的效应。脱氢紫堇碱(10,100μmol.L-1)能够抑制L型钙通道的电流峰值,抑制率分别为(9±7.5)%(n=5);(28.6±8.5)%(n=5)。结论穿孔膜片钳方法较全细胞膜片钳方法在对L型钙通道电流记录方面更具稳定性和准确性,脱氢紫堇碱能够浓度依赖性的抑制L型钙通道。 展开更多
关键词 穿孔膜片钳 全细胞膜片钳 心室肌细胞 L型钙通道 电流衰减 脱氢紫堇碱
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人非小细胞肺癌细胞膜钾离子通道特性的研究 被引量：5
5
作者 戴天阳 周清华 +6 位作者 曾晓荣 贺军 杨艳 李成文 任德莲 刘伦旭 廖斌 《中国肺癌杂志》 CAS 2001年第4期281-286,共6页
目的　研究人非小细胞肺癌细胞膜钾离子通道特性。方法　采用原代培养的非小细胞肺癌细胞、肺部良性病变和癌旁支气管上皮细胞 ,应用膜片钳全细胞记录方式检测细胞膜钾离子通道特性。结果　( 1)非小细胞肺癌细胞膜K+ 通道表达的K+ 电流... 目的　研究人非小细胞肺癌细胞膜钾离子通道特性。方法　采用原代培养的非小细胞肺癌细胞、肺部良性病变和癌旁支气管上皮细胞 ,应用膜片钳全细胞记录方式检测细胞膜钾离子通道特性。结果　( 1)非小细胞肺癌细胞膜K+ 通道表达的K+ 电流具有电压依赖性 ,能被K+ 通道阻断剂TEA阻断。鳞癌细胞膜电流具有失活趋势和内向整流特点 ;腺癌细胞膜电流具有不失活特性 ,无内向整流特点。TP =5 0～ 90mV时 ,时间常数 (τ值 )为 3.6～ 9.8ms。非小细胞肺癌细胞膜电容为 ( 15 .35± 0 .65 )pF ,K+ 电流密度为 ( 12 1.0 8±8.35 )A/F。 ( 2 )非小细胞肺癌细胞膜K+ 电流幅度、电流密度和膜电容较支气管上皮细胞明显增高 (P <0 .0 0 1) ,癌细胞τ值显著小于支气管上皮细胞的τ值 (P <0 .0 0 1)。结论　 ( 1)非小细胞肺癌细胞膜存在与延迟整流性类似的钾离子通道 ,且表达明显增加 ,活动明显增强。 ( 2 )检测肺癌细胞膜K+ 通道可为研究肺癌发生、发展。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌细胞 支气管上皮细胞 全细胞膜片钳记录 钾离子通道
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降钙素基因相关肽对大鼠心室肌细胞膜ATP敏感性钾离子通道的影响 被引量：9
6
作者 王鑫 原大江 郭政 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期396-399,共4页
目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)与大鼠心室肌细胞膜ATP敏感性钾通道(KATP)之间的关系及其信号转导通路。方法酶解法急性分离SD大鼠心室肌细胞,采用Langendroff灌流装置,分别用含0.1nmol/L CGRP、1nmol/LCGRP8-37(CGRP特异性阻滞剂)、1... 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)与大鼠心室肌细胞膜ATP敏感性钾通道(KATP)之间的关系及其信号转导通路。方法酶解法急性分离SD大鼠心室肌细胞,采用Langendroff灌流装置,分别用含0.1nmol/L CGRP、1nmol/LCGRP8-37(CGRP特异性阻滞剂)、1μmol/L H-89(蛋白激酶A阻滞剂)的细胞外液灌流心室肌细胞,每个细胞采用给药前后自身对照,标准的全细胞膜片钳技术记录KATP电流,待细胞电流稳定后,观察不同药物对KATP电流的影响。结果 0.1nmol/L CGRP对KATP电流有明显的激活作用,电流密度-电压(I-V)曲线明显上移(P<0.05)。1nmol/L CGRP8-37和1μmol/L H-89可使CGRP激活的KATP电流明显降低,I-V曲线明显下移(P<0.05)。结论心肌细胞上CGRP与其特异性受体结合,通过蛋白激酶A激活KATP,增强KATP电流。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 ATP敏感性钾通道 心肌细胞 全细胞膜片钳 蛋白激酶A
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碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心室肌细胞膜钾通道的影响 被引量：5
7
作者 高分飞 石刚刚 +3 位作者 郑锦鸿 黄展勤 周燕琼 刘幸平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期891-895,共5页
目的研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾通道的影响。方法采用酶急性消化法分离得到单个大鼠心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术观察F2对大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾电流(Ito)的影响。结果F2可剂量依赖地抑制I... 目的研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾通道的影响。方法采用酶急性消化法分离得到单个大鼠心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术观察F2对大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾电流(Ito)的影响。结果F2可剂量依赖地抑制Ito,IC50为0.28mmol·L-1。F2可使Ito的稳态失活曲线左移,半量膜电位Vmid变负,斜率因子S变大;但对激活曲线几乎无影响;对Ito灭活后再复活时程无影响。结论F2对心室肌膜Ito具有抑制作用。 展开更多
关键词 瞬时外向钾电流 全细胞膜片钳 心室肌细胞
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人肺腺癌A549细胞膜钾离子通道特性与细胞增殖关系的研究
8
作者 李向楠 戴天阳 +3 位作者 曾晓荣 杨艳 潘雪 王琼 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第4期261-265,共5页
背景与目的肺癌的发生发展、侵袭和转移均受肺癌相关基因的调控,而相关基因的表达、缺失或/和突变常是通过细胞膜信号传导系统和细胞膜离子通道实现的。本研究观察了人肺腺癌细胞系A549细胞膜钾离子通道的特性,以探讨应用钾通道阻断剂... 背景与目的肺癌的发生发展、侵袭和转移均受肺癌相关基因的调控,而相关基因的表达、缺失或/和突变常是通过细胞膜信号传导系统和细胞膜离子通道实现的。本研究观察了人肺腺癌细胞系A549细胞膜钾离子通道的特性,以探讨应用钾通道阻断剂抑制肺腺癌细胞增殖的可行性。方法以人肺腺癌细胞系A549细胞为研究对象,采用全细胞膜片钳技术记录细胞膜离子通道特性;通过细胞体外增殖试验,观察钾通道阻断剂四乙胺(TEA)对细胞增殖影响。结果A549细胞在保持电压为-70mV,测试电压-30^+110mV时,记录到一种跨膜电流,该跨膜电流具有电压依赖性、外向整流特性,并且500ms内不失活,可被钾通道阻断剂TEA阻断;细胞体外增殖试验显示,20、40和60mmol/L的TEA作用24h能明显抑制人肺腺癌A549细胞的体外增殖,而0.2和2mmol/L的TEA对细胞的体外增殖无明显抑制作用。结论人肺腺癌细胞系A549细胞中存在外向性电压门控性钾通道,该钾通道可被TEA阻断;钾通道阻断剂TEA能抑制A549细胞的体外增殖,抑制作用与TEA存在剂量依赖关系。 展开更多
关键词 肺腺癌 钾离子通道 全细胞膜片钳记录 四乙胺 细胞增殖
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松果体素抑制大鼠海马神经元甘氨酸激活的全细胞电流
9
作者 程新萍 开远忠 +2 位作者 吴旭 刘雅静 周江宁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期97-100,共4页
目的研究松果体素对培养的大鼠海马神经元甘氨酸激活的全细胞电流(Igly)的调控。方法在培养的大鼠海马神经元上,采用全细胞膜片钳技术,研究松果体素对甘氨酸激活的全细胞电流的调控。结果松果体素以浓度依赖的方式可逆地抑制Igly,并且... 目的研究松果体素对培养的大鼠海马神经元甘氨酸激活的全细胞电流(Igly)的调控。方法在培养的大鼠海马神经元上,采用全细胞膜片钳技术,研究松果体素对甘氨酸激活的全细胞电流的调控。结果松果体素以浓度依赖的方式可逆地抑制Igly,并且这种抑制作用是非竞争性的,松果体素的抑制作用没有特异的亚基选择性。结论松果体素能以非竞争的方式直接抑制甘氨酸受体介导的电流,这种抑制作用可能对海马区域神经网络的兴奋性产生影响。 展开更多
关键词 松果体素 甘氨酸受体 全细胞膜片钳技术 海马神经元 大鼠 甘氨酸 海马
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川芎嗪对大鼠背根神经节细胞P2X嘌呤受体介导反应的作用 被引量：8
10
作者 徐昌水 徐文苑 梁尚栋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1319-1323,共5页
目的 探讨川芎嗪（tetramethy1pyrazine,TMP）对嘌呤2X（P2X）受体介导反应的作用。方法 在大鼠新鲜分离的背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）神经元标本上应用全细胞膜片钳技术记录川芎嗪对P2X受体激动剂激活电流的影响。结果 外... 目的 探讨川芎嗪（tetramethy1pyrazine,TMP）对嘌呤2X（P2X）受体介导反应的作用。方法 在大鼠新鲜分离的背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）神经元标本上应用全细胞膜片钳技术记录川芎嗪对P2X受体激动剂激活电流的影响。结果 外加ATP（1～1 000 μmol·L^-1）可引起DRG神经元产生激活电流（n=102）,ATP-激活电流（IATP）显示快失敏和慢失敏两种形式的内向电流。预加川芎嗪（0.1～10 mmol· L^-1）后，大部分（89.2%,91/102）受检细胞可观察到ATP（100 μmol·L^-1）-激活电流出现明显的抑制作用。川芎嗪 （1 mmol· L^-1）使α,β-meATP （10 μmol·L^-1）-激活电流减小。预加川芎嗪（1 mmol·L^-1）后ATP（1～1 000 μmol·L^-1）激活电流的剂量-效应曲线明显下移。预加川芎嗪（1 mmol·L^-1）前后ATP（100 μmol·L^-1）的I-V曲线反转电位值不变，均接近0 mV.川芎嗪（1 mmol·L^-1）可明显抑制被前列腺素E2（100 μmol·L^-1）或P物质（0.1 μmol·L^-1）增大的ATP激活电流。通过微电极胞内透析注入PKA抑制剂H89（10 μmol·L^-1）至胞内,使川芎嗪（1 mmol· L^-1）抑制ATP（100 μmol·L^-1）激活电流的作用减小。结论 川芎嗪可能是通过PKA系统以及P2X受体离子通道复合体细胞外环的变构调制点影响P2X受体激动剂在大鼠DRG神经元的激活电流. 展开更多
关键词 川芎嗪 背根神经节 嘌呤2X受体 全细胞膜片钳记录 抑制
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HCN4基因修饰大鼠MSCs体外诱导获得的心脏起搏样细胞动作电位检测 被引量：9
11
作者 王泽文 宋治远 姚青 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第22期2139-2141,共3页
目的探讨超极化激活及环化核苷酸调控的阳离子通道亚型4(hyperpolarization-activated cyclic nucleotidegated cation channel4,HCN4)基因修饰大鼠MSCs体外诱导分化的心脏起搏样细胞的动作电位特性。方法以HCN4基因修饰大鼠MSCs体外诱... 目的探讨超极化激活及环化核苷酸调控的阳离子通道亚型4(hyperpolarization-activated cyclic nucleotidegated cation channel4,HCN4)基因修饰大鼠MSCs体外诱导分化的心脏起搏样细胞的动作电位特性。方法以HCN4基因修饰大鼠MSCs体外诱导获得的具有自发搏动的心脏起搏样细胞为实验组,同期培养的原代乳鼠窦房结细胞为对照组,采用全细胞膜片钳技术对两组细胞的动作电位进行检测。结果心脏起搏样细胞及原代培养乳鼠窦房结细胞均可记录到具有舒张期自动去极化的动作电位,心脏起搏样细胞的动作电位特性与原代培养的乳鼠窦房结细胞相比,其静息电位、动作电位幅度及动作电位周期均无显著性差异(P>0.05),但阈电位较原代培养的乳窦鼠房结细胞显著降低(P<0.01)。结论从电生理角度证实,心脏起搏样细胞的特性与原代培养的乳鼠窦房结细胞相似。 展开更多
关键词 心脏起搏样细胞 动作电位 全细胞膜片钳
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颈上交感神经节细胞P2X_3受体介导心肌痛伤害性信息作用的电生理研究 被引量：4
12
作者 李桂林 梁尚栋 +3 位作者 徐昌水 高云 许宝华 张春平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期193-198,共6页
目的观察心肌缺血致心肌痛伤害性剌激后颈上神经节(superior cervical ganglion,SCG)细胞P2X3受体在心肌痛伤害性信息传递中的作用。方法用全细胞膜片钳技术记录心肌缺血组和对照组大鼠新鲜分离的SCG神经元P2X受体激动剂激活电流及P2X3... 目的观察心肌缺血致心肌痛伤害性剌激后颈上神经节(superior cervical ganglion,SCG)细胞P2X3受体在心肌痛伤害性信息传递中的作用。方法用全细胞膜片钳技术记录心肌缺血组和对照组大鼠新鲜分离的SCG神经元P2X受体激动剂激活电流及P2X3受体特异性拮抗剂A-317491对P2X受体激动剂激活电流的作用。结果①大部分受检细胞对ATP(1～1000μmol.L-1)敏感,ATP-激活电流(IATP)显示快失敏和慢失敏两种形式的内向电流,心肌缺血组IATP明显高于同一浓度时对照组的IATP。②在心肌缺血组SCG细胞,P2X3受体选择性激动剂α、β亚甲三磷酸腺苷(α,β-meATP)产生激活电流,而在对照组SCG细胞只有极少数细胞有此反应,且电流幅度小。③P2X3受体特异性拮抗剂A-317491(100nmol.L-1)对心肌缺血组和对照组ATP(100μmol.L-1)-激活电流均出现抑制作用,且同一浓度的A-317491对心肌缺血组IATP的抑制作用较对照组IATP的作用更为明显。A-317491(100nmol.L-1)使心肌缺血组和对照组SCG细胞α,β-meATP(10μmol.L-1)-激活电流减小,对心肌缺血组的抑制作用更明显。④心肌缺血组和对照组SCG细胞ATP(100μmol.L-1)-激活电流的I-U曲线反转电位不变,均接近0mV。结论心肌缺血后P2X受体激动剂在SCG神经元激活电流增大,P2X3受体特异性拮抗剂A-317491可抑制P2X受体激动剂激活的电流。因此,颈上交感神经节细胞的P2X3受体可能参与心肌痛伤害性感受信息的传递。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷 P2X3 受体 心肌痛 颈上神经节 A-317491 全细胞膜片钳技术
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膜片钳技术在慢性痛大鼠背根神经节神经元电生理学特性改变中的应用 被引量：4
13
作者 蔡捷 方东 +1 位作者 李松 邢国刚 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期25-28,共4页
目的:以骨癌痛大鼠为例,探讨全细胞膜片钳技术在慢性痛研究中的应用。方法:急性分离背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元,利用全细胞膜片钳技术分别记录对照组和骨癌痛组大鼠小直径DRG神经元的动作电位及TRPV1(transient recept... 目的:以骨癌痛大鼠为例,探讨全细胞膜片钳技术在慢性痛研究中的应用。方法:急性分离背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元,利用全细胞膜片钳技术分别记录对照组和骨癌痛组大鼠小直径DRG神经元的动作电位及TRPV1(transient receptor potential vanilloid channel subfamily V member 1)的电流,分析大鼠小直径DRG神经元电活动的变化。结果:利用全细胞膜片钳技术可以记录到骨癌痛大鼠的小直径DRG神经元静息膜电位绝对值降低、动作电位发放频率增加、爆发动作电位的阈值降低、TRPV1通道的电流幅度增大。结论:全细胞膜片钳技术可以有效而直观的记录到单个神经元动作电位和电流的变化,并由此对神经元电生理学特性进行分析,从而进行慢性痛发病机制的研究。 展开更多
关键词 全细胞膜片钳 背根神经节 慢性痛 动作电位 电流
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应用膜片钳技术研究豆腐果苷对hERG钾通道电生理功能的影响 被引量：3
14
作者 贾元威 汪旻晖 +4 位作者 谢海棠 沈杰 张晓楠 司进辉 张翠锋 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第3期252-255,共4页
目的:探讨豆腐果苷对hERG钾离子电流的影响及潜在心脏毒性。方法:使用稳定转染hERG基因的CHO细胞,通过全细胞膜片钳技术检测不同浓度豆腐果苷对hERG通道电流活动的作用。结果:豆腐果苷对hERG钾通道的IC50约为47μmol/L,比临床常规剂量... 目的:探讨豆腐果苷对hERG钾离子电流的影响及潜在心脏毒性。方法:使用稳定转染hERG基因的CHO细胞,通过全细胞膜片钳技术检测不同浓度豆腐果苷对hERG通道电流活动的作用。结果:豆腐果苷对hERG钾通道的IC50约为47μmol/L,比临床常规剂量下人体内峰浓度高1 000倍以上。结论:临床常用剂量下,豆腐果苷发生与hERG通道抑制作用相关的心脏安全性问题的可能性非常小。 展开更多
关键词 豆腐果苷 HERG钾通道 全细胞膜片钳技术 心脏毒性
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河蟹眼柄神经内分泌细胞Glu受体研究 被引量：2
15
作者 孙金生 高春蕾 相建海 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期647-652,共6页
作者采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)神经内分泌细胞对 0 0 1— 10mmol/L谷氨基酸 (Glu)的反应 ,并结合药理学方法进行了Glu受体研究。结果表明 ,Glu激活A型和B型细胞离子型Cl... 作者采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)神经内分泌细胞对 0 0 1— 10mmol/L谷氨基酸 (Glu)的反应 ,并结合药理学方法进行了Glu受体研究。结果表明 ,Glu激活A型和B型细胞离子型Cl-通道蛋白受体 ,诱导快速激活、快速失活的配体门控Cl-通道电流 (IGlu)。依据内外液的Cl-浓度比例引发去极化或超极化反应 ,继续施加Glu ,细胞快速出现脱敏反应 ;去除Glu后 ,细胞约需 2 0s恢复对Glu的敏感状态。IGlu幅值呈浓度依赖性 ,量 效关系曲线呈线形 ,激活阈值为 0 0 1mmol/L ,约 5mmol/L达到饱和。河蟹眼柄神经内分泌细胞IGlu明显受到Cl-通道阻断剂picrotoxin(0 5mmol/L)抑制 ;对离子型Glu受体激动剂Quisqualate、Kainate、NMDA、AMPA不敏感。Ibotenicacid(IA)可模拟Glu诱导快速激活、快速脱敏的Cl-电流 ,并与Glu产生交互脱敏作用。Glu和GABA对河蟹眼柄神经内分泌细胞无交叉脱敏和交叉激活作用 ,甘氨酸 (Gly)没有诱导细胞产生任何反应 ,提示中枢神经系统通过Glu和GABA两套系统实现对眼柄神经内分泌系统的精确调控。 展开更多
关键词 河蟹 眼柄 神经内分泌细胞 中华绒螫蟹 L谷氨基酸 受体 全细胞膜片钳技术
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氯胺酮对离体大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响 被引量：1
16
作者 黄爱杰 李立环 +1 位作者 陈雷 吴辉 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2006年第7期528-530,共3页
目的研究氯胺酮对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响。方法酶解法分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录Ito,观察50μmol/L氯胺酮对Ito电流-电压曲线以及不同浓度氯胺酮对Ito的影响,并研究氯胺酮对Ito通道动力学的影响。... 目的研究氯胺酮对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响。方法酶解法分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录Ito,观察50μmol/L氯胺酮对Ito电流-电压曲线以及不同浓度氯胺酮对Ito的影响,并研究氯胺酮对Ito通道动力学的影响。结果钳制电压-40mV,刺激电压+70mV条件下,临床相关浓度的氯胺酮50μmol/L使Ito的电流峰值降低23·4%(P<0·01),冲洗后,Ito能够完全恢复。5、10、50、100、500、1000、5000μmol/L的氯胺酮抑制Ito呈浓度依赖性,电流抑制率分别为(13·8±9·7)%、(17·5±6·7)%、(23·4±8·8)%、(31·5±6·7)%、(63·3±5·5)%、(79·7±2·7)%、(88·9±4·4)%,其半数有效浓度(IC50)为299μmol/L。100μmol/L的氯胺酮对激活曲线没有影响;使Ito的失活曲线明显右移,半数失活电压(V1/2)在给药前后数值分别为(-28·27±0·20)mV和(-25·34±0·27)mV(P<0·01),斜率因子(k)值分别为(3·23±0·46)mV和(3·40±0·55)mV(P>0·05)。结论氯胺酮可明显阻滞大鼠心室肌的Ito,这是氯胺酮延长大鼠心室肌动作电位的机理之一,同时氯胺酮使Ito的失活曲线右移。 展开更多
关键词 氯胺酮 全细胞膜片钳 大鼠 心室肌 瞬时外向钾电流
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β_2受体对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流调控的信号转导途径 被引量：1
17
作者 杨蕙 伍卫 邓春玉 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期454-457,526,共5页
【目的】研究β2肾上腺素受体(β2受体)对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流(INCX)调控作用的信号转导途径。【方法】雄性健康Wistar大鼠30只,随机分为正常对照和心肌梗死(MI)组,制作MI模型。采用经典的酶分离心肌细胞方法,应用全细胞... 【目的】研究β2肾上腺素受体(β2受体)对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流(INCX)调控作用的信号转导途径。【方法】雄性健康Wistar大鼠30只,随机分为正常对照和心肌梗死(MI)组,制作MI模型。采用经典的酶分离心肌细胞方法,应用全细胞膜片钳技术记录INCX,予以β2受体激动剂salbutamol、cAMP激动剂forskolin、抑制性cAMP类似物Rp-cAMPS、PKA抑制剂H89及Gi蛋白抑制剂后记录INCX的变化。【结果】在正常和梗死后4周心肌细胞,forskolin可使INCX电流密度升高108.9%和70.3%(P<0.05),抑制性cAMP类似物Rp-cAMPS可抑制salbutamol升高INCX电流密度的作用(P<0.05),PTX能增大salbutamol的作用,INCX电流密度较单独予以salbutamol升高36.8%和50.6%(P<0.05),H89可抑制salbutamol升高INCX电流密度的作用(P<0.05)。【结论】β2受体激动可能通过Gi-cAMP-PKA途径参与调节INCX。 展开更多
关键词 Β2肾上腺素受体 心肌梗死 钠钙交换电流 信号转导 全细胞膜片钳技术
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泮库溴铵对大鼠颈上交感神经元全细胞N型钙通道电流的影响及其机制的探讨
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作者 颜涛 李士通 +1 位作者 庄心良 徐国辉 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期473-476,共4页
目的　研究泮库溴铵对大鼠颈上交感神经元细胞N型钙通道电流的影响。方法　酶 -机械法急性分离大鼠颈上交感神经元 (SCG)细胞。采用全细胞膜片钳技术 ,记录N型钙通道电流。通过自制“Y”型加药系统将以标准细胞外液稀释的泮库溴铵灌流... 目的　研究泮库溴铵对大鼠颈上交感神经元细胞N型钙通道电流的影响。方法　酶 -机械法急性分离大鼠颈上交感神经元 (SCG)细胞。采用全细胞膜片钳技术 ,记录N型钙通道电流。通过自制“Y”型加药系统将以标准细胞外液稀释的泮库溴铵灌流至细胞周围。记录灌流前、灌流 30s后和冲洗 30s后的N型钙电流。在细胞内液内加入非水解性G蛋白抑制剂GDP·βS ,然后再以 10 μmol/L泮库溴铵灌流后观察N型钙电流的变化。结果　 1、4、10、4 0 μmol/L的泮库溴铵可以使钙电流分别增强 12 .6 %、2 4 .2 %、5 6 .6 %和 2 1.9% ,而 10 0和4 0 0 μmol/L的泮库溴铵则分别使N型钙电流减少 14 .1%和 2 5 .5 %。在电极内液中加入G蛋白的非水解性竞争性拮抗剂GDP·βS后 ,10 μmol/L的泮库溴铵对N型钙电流的增强作用消失。 结论　较低浓度的泮库溴铵通过抑制G蛋白调控机制增强交感神经元N型钙通道电流 。 展开更多
关键词 钙通道电流 交感神经元 灌流 大鼠 G蛋白 钙电流 全细胞膜片钳技术 记录 调控机制 兴奋作用
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硝普钠对豚鼠单离耳蜗外毛细胞全细胞电流的影响
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作者 周建波 孔维佳 +1 位作者 顾凤明 王继华 《中华耳科学杂志》 CSCD 2005年第2期121-125,共5页
目的研究并探讨硝普钠(sodiumnitroprusside,SNP)对豚鼠耳蜗外毛细胞(outerhaircells,OHC)全细胞电流的影响及其作用机制。方法利用急性分离的OHC和特异性的离子通道阻断剂作为工具药,通过膜片钳电压钳记录技术观察了SNP对豚鼠耳蜗OHC... 目的研究并探讨硝普钠(sodiumnitroprusside,SNP)对豚鼠耳蜗外毛细胞(outerhaircells,OHC)全细胞电流的影响及其作用机制。方法利用急性分离的OHC和特异性的离子通道阻断剂作为工具药,通过膜片钳电压钳记录技术观察了SNP对豚鼠耳蜗OHC全细胞电流的影响,结果①在以+40mV的指令电压刺激时,10^(-3)mol/L的SNP抑制15.34±6.59%的细胞电流(n=5);②SNP对全细胞电流的抑制作用有电压依赖性,在刺激高于0mV时作用明显,10^(-2)mol/L的SNP在+10mV时抑制率为4.97±1.74%,而在+40mV时的抑制率为33.82±1.61%;③SNP对全细胞电流的抑制呈量效关系,在浓度大于10^(-3)mol/L时,抑制作用逐渐明显,10^(-1)mol/L的SNP时接近达到最大抑制效应;④分离离子电流成分后,SNP仅对Ca^(2+)电流有抑制作用。结论SNP对豚鼠耳蜗外毛细胞的全细胞电流的抑制作用,主要通过抑制细胞外Ca^(2+)的内流,进而影响Ca^(2+)依赖性K^(+)通道而实现。 展开更多
关键词 硝普钠 毛细胞 外 全细胞膜片钳记录 钙电流
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淫羊藿总黄酮抑制大鼠脊髓背角神经元甘氨酸激活的全细胞电流
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作者 程新萍 朱峰 周可青 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期199-202,共4页
目的研究淫羊藿总黄酮对急性分离的大鼠脊髓背角神经元甘氨酸激活的全细胞电流(IGly)的调控。方法在急性分离的大鼠脊髓背角神经元上,采用全细胞膜片钳方法,研究淫羊藿总黄酮对甘氨酸激活的全细胞电流的调控。结果淫羊藿总黄酮呈浓度依... 目的研究淫羊藿总黄酮对急性分离的大鼠脊髓背角神经元甘氨酸激活的全细胞电流(IGly)的调控。方法在急性分离的大鼠脊髓背角神经元上,采用全细胞膜片钳方法,研究淫羊藿总黄酮对甘氨酸激活的全细胞电流的调控。结果淫羊藿总黄酮呈浓度依赖性地抑制IGly;淫羊藿总黄酮使甘氨酸的浓度-效应曲线平行右移;淫羊藿总黄酮没有改变甘氨酸受体的离子选择性。结论淫羊藿总黄酮对甘氨酸介导的反应产生抑制作用可能是由于降低了甘氨酸与其受体的亲和力。 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 甘氨酸受体 全细胞膜片钳技术 脊髓背角神经元
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