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Survivin在NF-κB圈套寡核苷酸促进肝癌细胞HepG2凋亡中的作用
被引量：
1
1
作者
张万广
杨盛力
+4 位作者
李哲夫
张峰
徐宗全
王其
张志伟
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期603-606,701,共5页
目的观察核转录因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸对NF-κB活性的影响,研究Survivin在其诱导肝癌细胞HepG2凋亡中的作用。方法将异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NF-κB圈套寡核苷酸转染至HepG2细胞中,荧光倒置显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位...
目的观察核转录因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸对NF-κB活性的影响,研究Survivin在其诱导肝癌细胞HepG2凋亡中的作用。方法将异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NF-κB圈套寡核苷酸转染至HepG2细胞中,荧光倒置显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位观察,凝胶迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测转染前后NF-κB活性变化;流式细胞仪和TUNEL检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡抑制蛋白Survivin的改变。结果NF-κB圈套寡核苷酸转染后定位于细胞核内,EMSA显示转染后NF-κB活性明显下降。与未处理组、转染错义组相比,转染NF-κB圈套寡核苷酸组的HepG2细胞凋亡率增加,Survivin蛋白表达下调[(39.8±1.9)、(42.7±2.5)vs(20.1±3.1)]。结论NF-κB圈套寡核苷酸具有促进肝癌细胞HepG2凋亡的作用,其机制可能与下调Survivin的表达有关。
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关键词
核转录因子-ΚB
圈套寡核苷酸
SURVIVIN
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职称材料
AP-1在内毒素刺激大鼠肺泡巨噬细胞中的动态变化及其在TNF-α表达中的调控作用
被引量：
1
2
作者
李春穴
蒋建新
+1 位作者
单佑安
张良
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期209-211,共3页
为观察内毒素刺激对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)中核转录因子AP 1活性的影响 ,探讨AP 1在LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞表达TNF α中的基因调控作用 ,应用凝胶迁移阻滞技术(EMSA)检测LPS(Ecoli0 2 6∶B6)刺激大鼠AM核蛋白中AP 1的DNA结合活性的动...
为观察内毒素刺激对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)中核转录因子AP 1活性的影响 ,探讨AP 1在LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞表达TNF α中的基因调控作用 ,应用凝胶迁移阻滞技术(EMSA)检测LPS(Ecoli0 2 6∶B6)刺激大鼠AM核蛋白中AP 1的DNA结合活性的动态变化 ;在LPS刺激前 12h ,应用转基因技术将AP 1的硫代寡核苷酸圈套 (S ODNdecoy)转入大鼠AM ,应用ELISA法观察AP 1硫代寡核苷酸圈套对LPS刺激大鼠AM表达TNF α的影响。结果发现 ,应用 10 0ng/mlLPS刺激大鼠AM 0 5h,AP 1即迅速出现活化并达到峰值 ,在 1h活性略有下降 ,3h活性又逐渐回升 ,5h、8h又迅速回落 ,AP 1的活化状态至少可以持续 8h ,且与LPS刺激呈明显的量效关系 ;AP 1的S ODN圈套能明显抑制但不能完全阻断LPS诱导的TNF α表达。说明LPS刺激可使大鼠AM内AP 1活化 ,其在LPS介导的炎症反应中可能发挥重要作用 ;AP 1在LPS诱导的大鼠AM表达TNF α中可能起重要的调控作用 ,但TNF
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关键词
转录因子AP-1
内毒素类
肿瘤坏死因子
硫代
寡核苷酸
圈套
S-ODN
巨噬细胞
肺泡
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职称材料
题名
Survivin在NF-κB圈套寡核苷酸促进肝癌细胞HepG2凋亡中的作用
被引量：
1
1
作者
张万广
杨盛力
李哲夫
张峰
徐宗全
王其
张志伟
机构
华中科技大学同济医学院附属同济医院肝胆胰外科研究所
出处
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期603-606,701,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No30400431)
文摘
目的观察核转录因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸对NF-κB活性的影响,研究Survivin在其诱导肝癌细胞HepG2凋亡中的作用。方法将异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NF-κB圈套寡核苷酸转染至HepG2细胞中,荧光倒置显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位观察,凝胶迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测转染前后NF-κB活性变化;流式细胞仪和TUNEL检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡抑制蛋白Survivin的改变。结果NF-κB圈套寡核苷酸转染后定位于细胞核内,EMSA显示转染后NF-κB活性明显下降。与未处理组、转染错义组相比,转染NF-κB圈套寡核苷酸组的HepG2细胞凋亡率增加,Survivin蛋白表达下调[(39.8±1.9)、(42.7±2.5)vs(20.1±3.1)]。结论NF-κB圈套寡核苷酸具有促进肝癌细胞HepG2凋亡的作用,其机制可能与下调Survivin的表达有关。
关键词
核转录因子-ΚB
圈套寡核苷酸
SURVIVIN
Keywords
nuclear factor-kappaB
decoy oligodeoxynucleotides
Survivin
分类号
R657.3 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
AP-1在内毒素刺激大鼠肺泡巨噬细胞中的动态变化及其在TNF-α表达中的调控作用
被引量：
1
2
作者
李春穴
蒋建新
单佑安
张良
机构
第三军医大学大坪医院野战外科研究所
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期209-211,共3页
基金
国家重点基础研究发展规划资助项目 (编号G1 9990 542 0 0 )
高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金
教育部优秀年轻教师基金项目资助课题
文摘
为观察内毒素刺激对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)中核转录因子AP 1活性的影响 ,探讨AP 1在LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞表达TNF α中的基因调控作用 ,应用凝胶迁移阻滞技术(EMSA)检测LPS(Ecoli0 2 6∶B6)刺激大鼠AM核蛋白中AP 1的DNA结合活性的动态变化 ;在LPS刺激前 12h ,应用转基因技术将AP 1的硫代寡核苷酸圈套 (S ODNdecoy)转入大鼠AM ,应用ELISA法观察AP 1硫代寡核苷酸圈套对LPS刺激大鼠AM表达TNF α的影响。结果发现 ,应用 10 0ng/mlLPS刺激大鼠AM 0 5h,AP 1即迅速出现活化并达到峰值 ,在 1h活性略有下降 ,3h活性又逐渐回升 ,5h、8h又迅速回落 ,AP 1的活化状态至少可以持续 8h ,且与LPS刺激呈明显的量效关系 ;AP 1的S ODN圈套能明显抑制但不能完全阻断LPS诱导的TNF α表达。说明LPS刺激可使大鼠AM内AP 1活化 ,其在LPS介导的炎症反应中可能发挥重要作用 ;AP 1在LPS诱导的大鼠AM表达TNF α中可能起重要的调控作用 ,但TNF
关键词
转录因子AP-1
内毒素类
肿瘤坏死因子
硫代
寡核苷酸
圈套
S-ODN
巨噬细胞
肺泡
Keywords
transcription factor AP-1
endotoxins
tumor necrosis factor
phosphorothioate oligodeoxynucleotides (S-ODN)
macrophages, alveolar
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Survivin在NF-κB圈套寡核苷酸促进肝癌细胞HepG2凋亡中的作用
张万广
杨盛力
李哲夫
张峰
徐宗全
王其
张志伟
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
AP-1在内毒素刺激大鼠肺泡巨噬细胞中的动态变化及其在TNF-α表达中的调控作用
李春穴
蒋建新
单佑安
张良
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
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