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两步串联层析法纯化鼠抗人CD28单克隆抗体2F5
被引量：
5
1
作者
马泓冰
孙中文
+4 位作者
徐颖
李文香
陶然
陈洁
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期152-154,共3页
目的建立从小鼠腹水中纯化鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)2F5的两步串联层析法。方法将含mAb2F5的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换预处理后,先经固相化金属螯合亲和层析法(immobilizedmetalaffinitychromatography,IMAC)纯化,去除大部分杂蛋...
目的建立从小鼠腹水中纯化鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)2F5的两步串联层析法。方法将含mAb2F5的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换预处理后,先经固相化金属螯合亲和层析法(immobilizedmetalaffinitychromatography,IMAC)纯化,去除大部分杂蛋白,再经凝胶过滤层析法(gelfiltration,GF)精细纯化,并探讨了上样的流速和洗脱液的种类对mAb2F5纯度的影响。纯化的mAb2F5的生物学活性用3H-TdR掺入法进行分析。结果以两步串联层析法纯化的鼠抗人CD28mAb2F5的纯度大于90%,总回收率达70%。纯化的mAb2F5在体外对PBTC具有明显的促增殖作用;而且其促增殖作用的活性优于ProteinG亲和层析法(affinitychro-matography,AC)纯化所获得mAb。结论建立的两步串联层析纯化方法操作简便,所得mAb的纯度高、生物学活性好。
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关键词
固相化金属螯合层析法
凝胶过滤
层析
法
纯
化
单克隆抗体
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职称材料
题名
两步串联层析法纯化鼠抗人CD28单克隆抗体2F5
被引量：
5
1
作者
马泓冰
孙中文
徐颖
李文香
陶然
陈洁
张学光
机构
苏州大学医学生物技术研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期152-154,共3页
基金
国家自然科学基金重点项目(30330540)
江苏省干细胞重点实验室基金资助项目(2003年)
文摘
目的建立从小鼠腹水中纯化鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)2F5的两步串联层析法。方法将含mAb2F5的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换预处理后,先经固相化金属螯合亲和层析法(immobilizedmetalaffinitychromatography,IMAC)纯化,去除大部分杂蛋白,再经凝胶过滤层析法(gelfiltration,GF)精细纯化,并探讨了上样的流速和洗脱液的种类对mAb2F5纯度的影响。纯化的mAb2F5的生物学活性用3H-TdR掺入法进行分析。结果以两步串联层析法纯化的鼠抗人CD28mAb2F5的纯度大于90%,总回收率达70%。纯化的mAb2F5在体外对PBTC具有明显的促增殖作用;而且其促增殖作用的活性优于ProteinG亲和层析法(affinitychro-matography,AC)纯化所获得mAb。结论建立的两步串联层析纯化方法操作简便,所得mAb的纯度高、生物学活性好。
关键词
固相化金属螯合层析法
凝胶过滤
层析
法
纯
化
单克隆抗体
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
两步串联层析法纯化鼠抗人CD28单克隆抗体2F5
马泓冰
孙中文
徐颖
李文香
陶然
陈洁
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
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